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Medição direta do KDM1A Target Engagement usando imunoensaios baseados em Quimiosonda
JoVE Journal
Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
Direct Measurement of KDM1A Target Engagement Using Chemoprobe-based Immunoassays

Medição direta do KDM1A Target Engagement usando imunoensaios baseados em Quimiosonda

DOI:

11:17 min

June 13, 2019

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Bölümler

  • 00:04Başlık
  • 01:05Solution Preparation
  • 02:11Native Protein Extraction
  • 03:51Luminescent ELISAs for Total and Free KDM1A Determination
  • 08:42Results: Direct Measurement of KDM1A Target Engagement
  • 10:32Conclusion

Özet

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Aqui, apresentamos um protocolo para medir KDM1A engajamento alvo em uma célula humana ou animal, tecido ou amostras de sangue tratadas com inibidores da KDM1A. O protocolo emprega a marcação do chemoprobe da enzima livre de KDM1A e a quantificação direta da ocupação do alvo usando immunoensaios quimioprobe-baseados e pode ser usada em estudos pré-clínicos e clínicos.

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