A Rapid and Facile Pipeline for Generating Genomic Point Mutants in <em>C. elegans</em> Using CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins

Harriet Prior; Lauren MacConnachie; Jose L. Martinez; Georgina C.B. Nicholl; Asim A. Beg

doi:10.3791/57518

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Uma rápida e superficial Pipeline para gerar Genomic ponto mutantes em c. elegans usando CRISPR/Cas9 ribonucleoproteínas

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Genetik

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A Rapid and Facile Pipeline for Generating Genomic Point Mutants in C. elegans Using CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins

Uma rápida e superficial Pipeline para gerar Genomic ponto mutantes em c. elegans usando CRISPR/Cas9 ribonucleoproteínas

DOI:

10.3791/57518-v

•

08:37 min

•

April 30, 2018

•

Harriet Prior*¹, Lauren MacConnachie*¹, Jose L. Martinez, Georgina C.B. Nicholl, Asim A. Beg

¹Department of Pharmacology,University of Michigan

Bölümler

00:04Başlık
00:42sgRNA Target Selection and Homology-directed Repair Template Design
02:21Prepare Injection Mix and Injection Protocol
03:18Screen P0 Plates and Single mCherry(+) F1s
04:03Single Worm PCR and Genotyping
05:41Indentification and Sequence Verification of Edited Animals
06:34Results: Rapid CRISPR/Cas9 Generated Point Mutations in C. elegans sod-1
07:50Conclusion

Özet

Otomatik Çeviri

Aqui, apresentamos um método para engenheiro do genoma de c. elegans usando CRISPR-Cas9 ribonucleoproteínas e modelos de reparo dependente de homologia.

Etiketler

CRISPR/Cas9 Genomic Point Mutation C. Elegans Homology Directed Repair SsODN SgRNA Restriction Endonuclease Site Nörobilim Neurodegenerative Disease Endogenous Regulatory Control Protein Overexpression Pipeline Rapid Facile

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