Angiografía por fluorescencia para la evaluación de la perfusión del aneurisma y la paciencia de la arteria parental en modelos de aneurisma de rata y conejo
Özet
Presentamos un protocolo para evaluar eficientemente la perfusión del aneurisma y la patencia de los recipientes del aneurisma de las paredes laterales en ratas y conejos, utilizando la videoangiografía por fluorescencia a base de fluoresceína (FVA). Con un valor predictivo positivo del 92,6%, es un método simple pero muy eficaz y económico sin necesidad de equipos especiales.
Abstract
El tratamiento del aneurisma cerebral se centra en lograr la oclusión completa, así como en preservar el flujo sanguíneo en la arteria principal. Fluoresceina sódica y verde indocyanina se utilizan para permitir la observación del flujo sanguíneo y el estado de perfusión de los vasos, respectivamente. El objetivo de este estudio es aplicar FVA para verificar el flujo sanguíneo en tiempo real, el estado de perfusión de los vasos y la oclusión de los aneurismas después de la inducción de aneurismas laterales en conejos y ratas, así como para validar el procedimiento en estas especies.
Se crearon veinte aneurismas de las paredes laterales en 10 conejos suturando una bolsa descelularizada de los vasos arteriales en la arteria carótida de un conejo donante. Además, se crearon 48 aneurismas de paredes laterales microquirúrgicas en 48 ratas. Durante el seguimiento a los meses posteriores a la creación, se diseccionó el complejo de arteria/aneurisma principal y se realizó FVA utilizando una inyección intravenosa de fluoresceína (10%, 1 ml) a través de un cateterismo en venas de oído en conejos y una catroización venosa femoral en ratas. Luego se cosechaban aneurismas y la patencia se evaluó macroscópicamente.
Macroscópicamente, 14 de los 16 aneurismas en conejos indicaron que no había perfusión residual de arterias madre con luminas totalmente ocluidas, sin embargo 11 (79%) fueron detectados por FVA. Se excluyeron cuatro aneurismas debido a problemas técnicos. En ratas, la perfusión de aneurisma residual se observó macroscópicamente en 25 de los 48 casos. De los 23 sin evidencia macroscópica de perfusión, el FVA confirmó la incidencia de 22 aneurismas (96%). No hubo eventos adversos asociados con la FVA. La fluoresceína es fácilmente aplicable y no se necesita ningún equipo especial. Es un método seguro y extremadamente eficaz para evaluar la integridad de la arteria principal y la patencia del aneurisma/perfusión residual en un entorno experimental con conejos y ratas. FVA utilizando fluoresceína como agente de contraste parece ser eficaz en el control de la patencia de los aneurismas y el vaso subyacente e incluso se puede adaptar a la cirugía de bypass.
Introduction
La evidencia de la obliteración completa del aneurisma y la integridad de la arteria de los padres es de suma importancia en la cirugía de aneurisma. Existen varias opciones para confirmar la patencia de la arteria principal y la oclusión del aneurisma, como la ecografía Doppler, la angiografía cerebral convencional (DSA), la angiografía por tomografía computarizada (CTA) o la angiografía por resonancia magnética (MRA)1, 2. Sin embargo, se trata de métodos costosos y lentos que a menudo no están disponibles en un entorno de laboratorio. Además, pueden tener efectos secundarios relevantes, como la exposición a la radiación o la necesidad de sedación adicional de animales experimentales para evitar el artefacto del movimiento.
Con un número creciente de nuevos dispositivos endovasculares que están surgiendo, existe una necesidad consecutiva de pruebas preclínicas de tales dispositivos. Sin embargo, estos estudios a menudo se basan en el análisis post mortem (por ejemplo, macropatología e histología) y carecen de información sobre la perfusión dinámica. Además, para el investigador puede ser crucial obtener información inmediata y fiable durante un procedimiento quirúrgico experimental. La angiografía por fluorescencia es una técnica de visualización rentable y fácil de realizar1,3,4.
Como tal, la angiografía por videografía verde indocyanina (ICG) se utiliza a menudo en procedimientos neuroquirúrgicos clínicos y se ha estudiado extensamente5,6. La angiografía por videofluoresceína (FVA) es una técnica alternativa, con la ventaja adicional de crear una señal de fluorescencia que está dentro del rango de longitud de onda de la visión humana, y por lo tanto puede ser vista a simple vista sin una cámara infrarroja de espectro extendido 7. La angiografía por videofluoresceína se utiliza con menos frecuencia en la cirugía cerebrovascular clínica y los informes sobre La FVA en entornos experimentales son escasos1,4.
El objetivo de este informe es demostrar la viabilidad y el alcance de las aplicaciones de La FVA en la investigación cerebrovascular preclínica de ratas y conejos.
Protocol
Representative Results
Discussion
FVA es un método prometedor y sin complicaciones para examinar los recipientes en roedores y se puede realizar con dispositivos comerciales y equipos listos para usar. La FVA se puede implementar durante cualquier cirugía donde se necesite una evaluación intraoperatoria de la integridad del vaso, ya que los vasos necesitan primero una disección adecuada.
Los autores prefirieron la inyección venosa a la inyección arterial debido al menor riesgo de eventos involuntarios como infección, is…
Açıklamalar
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este estudio fue apoyado en parte por una beca de investigación del Kantonsspital Aarau, Suiza.
Materials
| For rabbits | |||
| Aluminium foil | |||
| Animal shaver | |||
| Black tape | |||
| Blue filter | Thorlabs MF475-35 | ||
| Body warm plate | |||
| Camera | Sony NEX-5R | ||
| Catheter | 22G Vasofix Safety | ||
| Disinfictant | |||
| Fluorescein sodium | Fluorescein Faure 10% | ||
| Glas plate | |||
| Green filter | Thorlabs MF539-43 | ||
| Incontinence pad | |||
| Infusion pump | Perfusor Secura | ||
| Ketamine hydrochloride | any generic products | ||
| Needle | 25G | ||
| Oxygen | |||
| Ringer's Solution | |||
| Sterile sheets | |||
| Surgical instruments | micro forceps, micro scissor, blunt surgical scissor | ||
| Surgical microscope | OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany | ||
| Syringe 2ml, 5ml, 50ml | |||
| Tape | |||
| Three-way-stopcock | |||
| Torch light | |||
| Xylazin | any generic products | ||
| For rats | |||
| Aluminium foil | |||
| Animal shaver | |||
| Black tape | |||
| Blue filter | Thorlabs MF475-35 | ||
| Body warm plate | |||
| Camera | Sony NEX-5R | ||
| Disinfictant | |||
| Fluorescein sodium | Fluorescein Faure 10% | ||
| Green filter | Thorlabs MF539-43 | ||
| Incontinence pad | |||
| Isoflurane | |||
| Ketamine hydrochloride | any generic products | ||
| Medetomidine hydrochloride | any generic products | ||
| Needle | 25G | ||
| Oxygen | |||
| Plate | |||
| Ringer's Solution | |||
| Sterile sheets | |||
| Surgical instruments | micro forceps, micro scissor, blunt surgical scissor | ||
| Surgical microscope | OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany | ||
| Syringe 2ml, 5ml | |||
| Tape | |||
| Torch light | |||
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