Özet

ラットおよびウサギ動脈瘤モデルにおける動脈瘤灌流および親動脈の知覚の評価のための蛍光血管造影

Published: July 24, 2019
doi:

Özet

我々は、フルオレセイン系蛍光ビデオ血管造影(FVA)を用いて、ラットおよびウサギにおける側壁動脈瘤の動脈瘤灌流および血管透過性を効率的に評価するためのプロトコルを提示する。92.6%の肯定的な予測値によって、それは特別な装置が必要としないで、簡単だが非常に有効で経済的な方法である。

Abstract

脳動脈瘤治療は、完全な閉塞を達成するだけでなく、親動脈の血流を維持することに焦点を当てています。フルオレセインナトリウムとインドシアニングリーンは、それぞれ血流と血管灌流状態の観察を可能にするために使用されます。本研究の目的は、ウサギやラットにおける側壁動脈瘤の誘導後のリアルタイム血流、血管灌流状態および動脈瘤の閉塞を検証し、これらの種の手順を検証するためにFVAを適用することです。

20の側壁動脈瘤は、ドナーウサギの頚動脈に脱細胞化動脈血管パウチを縫合することによって10匹のウサギで作成された。さらに、48匹のラットに48個のマイクロ外科的側壁動脈瘤が作成された。作成後1ヶ月のフォローアップ中に親動脈/動脈瘤複合体を解剖し、FVAはウサギの耳静脈カテーテル法およびラットのフェミニル静脈カテーテル法を介して静脈静脈蛍(10%、1mL)注射を用いて行った。その後、動脈瘤を採取し、パテンシーをマクロ的に評価した。

ウサギの動脈瘤16体中14人は、完全に閉塞したルミナを有する残留親動脈灌流を示さなかったが、11(79%)であった。FVA によって検出されました。技術的な問題により、4つの動脈瘤が除外された。ラットでは、残留動脈瘤灌流は48例中25例で大視認された。灌流の大術的証拠のない23人のうち、FVAは22の動脈瘤(96%)の発生率を確認した。FVA に関連する有害事象はありませんでした。フルオレセインは容易に適用可能であり、特別な装置は必要ない。これは、ウサギとラットとの実験環境で親動脈の完全性と動脈瘤の受入/残留灌流を評価するための安全かつ非常に効果的な方法です。対照的な薬剤としてフルオレセインを使用するFVAは、動脈瘤および基礎血管の経度を制御するのに有効であり、バイパス手術にも適応することができる。

Introduction

完全な動脈瘤の消滅および親動脈の完全性の証拠は動脈瘤の外科において最も重要である。ドップラー超音波検査、従来の脳血管造影(DSA)、コンピュータ断層撮影血管造影(CTA)または磁気共鳴血管造影(MRA)1など、親動脈の動脈の痛みと動脈瘤閉塞を確認するためのいくつかのオプションがあります。2.しかし、これらは多くの場合、実験室の設定では利用できない高価で時間のかかる方法です。さらに、それらは放射線被曝などの関連する副作用を持っているか、動きのアーティファクトを避けるために実験動物の追加の固定の必要性を持っている可能性があります。

新しい血管内デバイスの数が増えるにつれて、このようなデバイスの前臨床試験が連続して必要とされています。しかし、これらの研究はしばしば死後分析(例えば、マクロ病理学および専門学)に依存し、動的灌流に関する情報を欠いている。さらに、研究者にとっては、実験的な外科的処置の間に即時かつ信頼性の高い情報を得ることが重要である。蛍光血管造影は、費用対効果が高く、視覚化技術1、3、4を行いやすいです。

そのように、indocyanine緑(ICG)ビデオ血管造影は、しばしば臨床神経外科的処置で使用され、広範囲に研究されている5、6.フルオレセインビデオ血管造影(FVA)は、人間の視野の波長範囲内にある蛍光信号を作成する追加の利点を持つ代替技術であり、したがって、拡張スペクトル赤外線カメラなしで肉眼で見ることができます7.フルオレセインビデオ血管造影は、臨床脳血管外科であまり使用され、実験設定でのFVAに関する報告は1、4が不足している。

この報告書の目的は、ラットおよびウサギ前臨床脳血管研究におけるFVAの適用の実現可能性と範囲を実証することです。

Protocol

げっ歯類は動物介護施設に収容され、実験はスイスのベルン大学動物福祉委員会(BE 108/16)および(BE65/16)によって検討され、承認されました。すべての動物は、食べ物と水への無料アクセスと標準的な実験室の食事で維持されました。すべての動物実験は、3R(置換、削減、改良)を慎重に検討して行われました。10匹の女性ニュージーランド白ウサギと48匹のオスのウィスターラットが含まれてい…

Representative Results

手術中に心拍数と血圧をモニターした。平均心拍数はウサギで193/分、ラットで196/分であった。ウサギの体重は3.05-4.18kg、ラットの体重は335〜690gであった。 10匹中8匹のウサギでFVAを行うことができました(図1)。2匹のウサギの4つの動脈瘤検査は、技術的な問題のためにカメラで記録されませんでした。ラットのFVAに関する技術的な問題は報告されな?…

Discussion

FVAはげっ歯類の容器を調べる有望で複雑な方法であり、市販の装置および市販の装置と行うことができる。FVAは容器が最初に適切な解剖を必要とするように容器の完全性の術中の評価が必要であるあらゆる外科の間に実施することができる。

著者らは、感染症、虚血およびコンパートメント症候群12などの不注意な事象のリスクが低いため、動脈注射に…

Açıklamalar

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この研究は、スイスのカントンスピタル・アラウからの研究助成金によって一部支援されました。

Materials

For rabbits
Aluminium foil
Animal shaver
Black tape
Blue filter Thorlabs MF475-35
Body warm plate
Camera Sony NEX-5R
Catheter 22G Vasofix Safety
Disinfictant
Fluorescein sodium Fluorescein Faure 10%
Glas plate
Green filter Thorlabs MF539-43
Incontinence pad
Infusion pump Perfusor Secura
Ketamine hydrochloride any generic products
Needle 25G
Oxygen
Ringer's Solution
Sterile sheets
Surgical instruments micro forceps, micro scissor, blunt surgical scissor
Surgical microscope OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany
Syringe 2ml, 5ml, 50ml
Tape
Three-way-stopcock
Torch light
Xylazin any generic products
For rats
Aluminium foil
Animal shaver
Black tape
Blue filter Thorlabs MF475-35
Body warm plate
Camera Sony NEX-5R
Disinfictant
Fluorescein sodium Fluorescein Faure 10%
Green filter Thorlabs MF539-43
Incontinence pad
Isoflurane
Ketamine hydrochloride any generic products
Medetomidine hydrochloride any generic products
Needle 25G
Oxygen
Plate
Ringer's Solution
Sterile sheets
Surgical instruments micro forceps, micro scissor, blunt surgical scissor
Surgical microscope OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany
Syringe 2ml, 5ml
Tape
Torch light

Referanslar

  1. Kakucs, C., Florian, I. A., Ungureanu, G., Florian, I. S. Fluorescein Angiography in Intracranial Aneurysm Surgery: A Helpful Method to Evaluate the Security of Clipping and Observe Blood Flow. World Neurosurgery. 105, 406-411 (2017).
  2. Ajiboye, N., Chalouhi, N., Starke, R. M., Zanaty, M., Bell, R. Unruptured Cerebral Aneurysms: Evaluation and Management. ScientificWorldJournal. 2015, 954954 (2015).
  3. Suzuki, K., et al. Confirmation of blood flow in perforating arteries using fluorescein cerebral angiography during aneurysm surgery. Journal of Neurosurgery. 107 (1), 68-73 (2007).
  4. Gruter, B. E., et al. Fluorescence Video Angiography for Evaluation of Dynamic Perfusion Status in an Aneurysm Preclinical Experimental Setting. Operative Neurosurgery. , (2019).
  5. Raabe, A., et al. Prospective evaluation of surgical microscope-integrated intraoperative near-infrared indocyanine green videoangiography during aneurysm surgery. Journal of Neurosurgery. 103 (6), 982-989 (2005).
  6. Riva, M., Amin-Hanjani, S., Giussani, C., De Witte, O., Bruneau, M. Indocyanine Green Videoangiography in Aneurysm Surgery: Systematic Review and Meta-Analysis. Neurosurgery. , (2017).
  7. Kuroda, K., et al. Intra-arterial injection fluorescein videoangiography in aneurysm surgery. Neurosurgery. 72, 141-150 (2013).
  8. Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. Improving Bioscience Research Reporting: The ARRIVE Guidelines for Reporting Animal Research. PLOS Biology. 8 (6), 1000412 (2010).
  9. Marbacher, S., et al. The Helsinki rat microsurgical sidewall aneurysm model. Journal of Visualized Experiments. (92), e51071 (2014).
  10. Marbacher, S., et al. Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques. American Journal of Neuroradiology. 32 (4), 772-777 (2011).
  11. Shurey, S., et al. The rat model in microsurgery education: classical exercises and new horizons. Archives of Plastic Surgery. 41 (3), 201-208 (2014).
  12. Foster, S. D., Lyons, M. S., Runyan, C. M., Otten, E. J. A mimic of soft tissue infection: intra-arterial injection drug use producing hand swelling and digital ischemia. World Journal of Emergency Medicine. 6 (3), 233-236 (2015).
  13. Flower, R. W. Injection technique for indocyanine green and sodium fluorescein dye angiography of the eye. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 12 (12), 881-895 (1973).
  14. Yoshioka, H., et al. Advantage of microscope integrated for both indocyanine green and fluorescein videoangiography on aneurysmal surgery: case report. Neurologia medico-chirurgica (Tokyo). 54 (3), 192-195 (2014).
  15. Ichikawa, T., et al. Development of and Clinical Experience with a Simple Device for Performing Intraoperative Fluorescein Fluorescence Cerebral Angiography: Technical Notes. Neurologia medico-chirurgica. 56 (3), 141-149 (2016).
  16. Alander, J. T., et al. A review of indocyanine green fluorescent imaging in surgery. International Journal of Biomedical Imaging. 2012, 940585 (2012).
  17. Lane, B., Bohnstedt, B. N., Cohen-Gadol, A. A. A prospective comparative study of microscope-integrated intraoperative fluorescein and indocyanine videoangiography for clip ligation of complex cerebral aneurysms. Journal of Neurosurgery. 122 (3), 618-626 (2015).
  18. Blair, N. P., Evans, M. A., Lesar, T. S., Zeimer, R. C. Fluorescein and fluorescein glucuronide pharmacokinetics after intravenous injection. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 27 (7), 1107-1114 (1986).
  19. Hillmann, D., et al. In vivo optical imaging of physiological responses to photostimulation in human photoreceptors. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 113 (46), 13138-13143 (2016).
  20. Golby, A. J. . Image-Guided Neurosurgery. , (2015).

Play Video

Bu Makaleden Alıntı Yapın
Strange, F., Sivanrupan, S., Gruter, B. E., Rey, J., Taeschler, D., Fandino, J., Marbacher, S. Fluorescence Angiography for Evaluation of Aneurysm Perfusion and Parent Artery Patency in Rat and Rabbit Aneurysm Models. J. Vis. Exp. (149), e59782, doi:10.3791/59782 (2019).

View Video