の幼虫や蛹に振動や音響に反応する臓器を免疫染色し、可視化する方法<em>キイロショウジョウバエ</em>記載されています。
固有感覚は、身体内の生じる刺激に応答することによって、身体の部分の動き、または位置を感知する能力である。ショウジョウバエや他の昆虫に固有感覚は、振動や音響に反応する器官(ChOs 2)と呼ばれる特殊な感覚器官で提供されています。 ショウジョウバエの他の多くの臓器と同様に、ChOsはハエのライフサイクル中に2回開発しています。まず、幼虫ChOsは、胚形成の間に開発しています。その後、成人ChOsは、幼虫成虫に開発し、変態中に区別するために継続して開始します。
胚発生時の幼虫のChOsの開発が広く10,11,13,15,16検討されている。各CHOの目玉は、ニューロンとscolopaleセルで構成される感覚のユニットです。感覚のユニットは特殊な表皮添付ファイル細胞1,9,14を経由してキューティクルに接続するアクセサリー2種類の細胞の間に張られています。時ハエの幼虫の動きは、電子の相対変位pidermal付着細胞は樹状突起8,12の外側のセグメントで特定の一過性受容器電位バニロイド(TRPV)チャネルの感覚装置とその結果としての開口部の延伸につながる。信号は、中枢神経系における運動中枢パターン発生回路に転送される誘発した。
複数ChOsは、大人のフライ7に記載されている。これらは成人のフライ付属器(足、翼とホルター)の関節の近くにあり、胸部と腹部に位置しています。さらに、ChOs数百は、総称して機械的エネルギー3,5,17,4、その伝達し音響大人のアンテナでジョンストン器官を形成しています。
胚の段階でChOsの開発に関する広範な知識とは対照的に、ほとんどは幼虫の段階でこれらの器官の形態について知られている。また、大腿ChOsの例外18、ジョンストン器官で、私たちのknowled大人のフライでChOsの開発と構造についてGEは、非常に断片的です。
ここでは、3齢幼虫と蛹のChOsを染色し、可視化する方法について説明します。このメソッドは、優れた形態を特徴づけるとフライの様々なChOsの発展を理解するために遺伝的ツールと一緒に適用することができます。
このビデオで説明されたプロトコルでは、幼虫および蛹の段階で自己受容ChOsを可視化する方法を提供します。自己受容ChOsの構造と開発に関する研究はこれまで主に胚の段階へと幼虫の成虫に制限されている。したがって、幼虫と成虫の両方ChOsの開発の後期段階の多くの側面は、大部分は不明のままである。 ショウジョウバエの共通の遺伝的ツールと組み合わせて記述されたプロトコルは、ChOs開発の後の段階で役割を果たす新しい遺伝子および経路を特定し、研究に利用することができます。このプロトコルは、CHOの可視化のために最適化されたが、そのような蛹の翼6のような他の組織の染色に適合させることができます。
The authors have nothing to disclose.
著者は私達の抗体を送信するためにアイオワ大学の発達研究ハイブリドーマバンクに感謝します。この作品は、イスラエル科学財団からの助成金(第29号/ 08)によってサポートされていました。 ASにもDFG(ドイツ学術振興)から研究助成金によってサポートされています。
Name of the reagent/tool | Company | Catalogue number | Yorumlar |
Dumont #5 (or #55) forceps, biologie tip | F.S.T | 11252-20 or 11252-10 (or similar forceps) |
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Austerlitz stainless steel insect pins, minutiens 0.1mm | Roboz Surgical Instrument Co | RS-6083-10 | |
Sylgard 184 silicone elastomer kit | DOW Corning Corporation | 240.4019862 | |
Vannas micro scissors (straight, 7.5 cm, blade 3mm) | AS Mdeizintechnik GmbH | 11-590-00 | Vannas Spring Scissors with identical specifications can be purchased from Roboz Surgical Instrument Co. |
Orbital shaker – Rotamax-120 | Heidolph | N/A | |
Dako Fluorescent Mounting Medium | Dako Cytomation, Glostrup, Denmark | DK-5302392 | |
X10 PBS formulation | 2 gr/lit KCl, 2 gr/lit KH2PO4, 80 gr/lit NaCl, 21.7 gr/lit Na2HPO4.7H2O |
The quality of PBS is critical for the success of this protocol | |
PBT | X1 PBS + 0.1% Tween 20 |