Affinity Purification of a 6X-His-Tagged Protein using a Fast Protein Liquid Chromatography System

Madhumita Sridharan; Tripthi Battapadi; Lata Balakrishnan

doi:10.3791/66529

Optimizing FPLC for Efficient Purification of His-Tagged FEN1 Protein

April 26, 2024

Purificação de afinidade de uma proteína marcada com 6X-His usando um sistema de cromatografia líquida de proteína rápida

01:19 min

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Preparação e empacotamento de coluna de afinidade para cromatografia líquida de proteína rápida (FPLC)

01:42 min

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Preparando o loop de amostra do sistema de cromatografia líquida de proteína rápida (FPLC) para a purificação da proteína FEN1 marcada com HIS

01:26 min

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Purificação da proteína FEN1 marcada com His usando o sistema FPLC e sua análise usando software vinculado a FPLC

02:58 min

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Madhumita Sridharan, Tripthi Battapadi, Lata Balakrishnan

¹Biyoloji Bölümü,Indiana University Indianapolis

Özet

Este artigo fornece um procedimento para a purificação de afinidade de uma proteína recombinante humana, a endonuclease 1 (FEN1), que foi marcada com uma marca de 6X-histidina. O protocolo envolve a utilização de duas colunas distintas de íons metálicos imobilizados para a purificação da proteína marcada.