Affinity Purification of a 6X-His-Tagged Protein using a Fast Protein Liquid Chromatography System

Madhumita Sridharan; Tripthi Battapadi; Lata Balakrishnan

doi:10.3791/66529

Optimizing FPLC for Efficient Purification of His-Tagged FEN1 Protein

April 26, 2024

Purification d’affinité d’une protéine marquée 6X-His à l’aide d’un système de chromatographie liquide à protéines rapides

01:19 min

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Préparation et emballage de colonnes d’affinité pour la chromatographie liquide protéique rapide (FPLC)

01:42 min

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Amorçage de la boucle d’échantillonnage du système de chromatographie liquide à protéines rapides (FPLC) pour la purification de la protéine FEN1 marquée par his-Marks

01:26 min

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Purification de la protéine FEN1 marquée par HIS à l’aide du système FPLC et son analyse à l’aide d’un logiciel lié à la FPLC

02:58 min

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Madhumita Sridharan, Tripthi Battapadi, Lata Balakrishnan

¹Biyoloji Bölümü,Indiana University Indianapolis

Özet

Cet article fournit une procédure pour la purification d’affinité d’une protéine recombinante humaine, l’endonucléase de lambeau 1 (FEN1), qui a été marquée avec un marqueur 6X-histidine. Le protocole implique l’utilisation de deux colonnes d’ions métalliques immobilisées distinctes pour la purification de la protéine marquée.