Summary

السديلة المحورية للشريان الشرسوفي السفلي السطحي لدراسة تأثيرات التكييف المسبق الإقفاري في نموذج الفئران

Published: January 27, 2023
doi:

Summary

يصف هذا البروتوكول حصاد وخياطة ومراقبة اللوحات اللفافة الجلدية في الفئران التي تسمح بالتصور الجيد والتلاعب بتدفق الدم عبر الأوعية الشرسوفية السفلية السطحية عن طريق تثبيت وربط الأوعية الفخذية. هذا أمر بالغ الأهمية للدراسات التي تنطوي على التكييف المسبق الإقفاري.

Abstract

أصبحت السديلات الجلدية المتورية (FCF) المعيار الذهبي لإعادة بناء العيوب المعقدة في الجراحة التجميلية والترميمية. تسمح تقنية استبقاء العضلات هذه بنقل الأنسجة الوعائية لتغطية أي عيب كبير. يمكن استخدام FCF كلوحات عنيقة أو لوحات حرة ؛ ومع ذلك ، في الأدبيات ، فإن معدلات الفشل ل FCF و FCF الحر أعلى من 5٪ ، مما يترك مجالا للتحسين لهذه التقنيات والمزيد من التوسع المعرفي في هذا المجال. تمت دراسة التهيئة المسبقة الإقفارية (I.P.) على نطاق واسع ، ولكن لم يتم بعد تحديد آليات وتحسين نظام I.P. هذه الظاهرة في الواقع غير مستكشفة بشكل جيد في الجراحة التجميلية والترميمية. هنا ، يتم تقديم نموذج جراحي لدراسة نظام I.P. في نموذج رفرف لفافة جلدية محورية للفئران ، يصف كيفية تقييم آثار IP. بأمان وموثوقية على بقاء السديلة. توضح هذه المقالة الإجراء الجراحي الكامل ، بما في ذلك اقتراحات لتحسين موثوقية هذا النموذج. الهدف هو تزويد الباحثين بنموذج قابل للتكرار وموثوق به لاختبار أنظمة التكييف المسبق الإقفارية المختلفة وتقييم آثارها على بقاء السديلة.

Introduction

الجراحة التجميلية والترميمية في تطور مستمر. جعل تطوير اللوحات العضلية واللفافة الجلدية والمثقوبة من الممكن تقديم عمليات إعادة بناء ذات جودة أفضل مع تقليل المراضة. من خلال الجمع بين هذه المعرفة التشريحية المحسنة والمهارات التقنية المحسنة ، يمكن للجراحين الترميميين إجراء عمليات نقل سديلة مجانية عندما لا تكون العيوب قريبة من أي حل محلي. ومع ذلك ، في حين أن جراحة السديلة المثقبة هي حاليا التقنية الأكثر تقدما في الجراحة الترميمية ، تشير الأدبيات إلى معدل فشل بنسبة 5٪ في عمليات نقل السديلة الحرة1،2،3 ، وما يصل إلى 20٪ لإعادة بناء السديلة المثقوبة4،5،6. يحدث فشل جزئي إلى كلي في السديلة عندما يتم اختراق عنيق السديلة ، لذلك من الضروري البحث باستمرار عن تحسينات على التقنيات الحالية. تتمثل إحدى طرق تحسين بقاء السديلة في تعزيز الأوعية الدموية الجديدة على فراش الجرح ، مما يسمح بالتروية من مصدر آخر غير عنيق. تم وصف التهيئة المسبقة لنقص تروية الدم (IP) في البداية في نموذج القلب7 ، مما يدل على أن العضو المعرض لنقص التروية المتحكم فيه يبقى على قيد الحياة بدرجة أعلى بعد فقدان إمدادات الدم الأولية عن طريق الخضوع للأوعية الدموية الجديدة التي يسببها نقص التروية. درس العديد من المؤلفين مبدأ حجر الزاوية هذا لتحسين بقاء السديلة في النماذج قبل السريرية والسريرية8،9،10.

ميزة هذه التقنية على الطرق الأخرى لتحسين بقاء السديلة هي سهولة تنفيذها ، والتي تتكون من اختبارات المشبك / فك المشبك لمصدر الدم. في نموذج الفئران ، استخدم المؤلفون السابقون رفرف الشريان الشرسوفي السفلي السطحي (SIEA) لدراسة IP. عن طريق تثبيت عنيق الرئيسي11،12،13. ومع ذلك ، يمكن مواجهة العديد من المشكلات الفنية مع هذا النموذج ، وتفتقر الأدبيات إلى بروتوكولات موصوفة جيدا.

لذلك ، يهدف هذا العمل إلى تزويد الباحثين بوصف تفصيلي لتقنية شراء رفرف SIEA للفئران مع تشريح ممتد لأوعية الفخذ للسماح بدراسات IP. على نموذج السديلة اللفافية الجلدية المحورية. يحتفظ هذا النموذج بسلامة الأوعية الشرسوفية وبدلا من ذلك يتلاعب بالأوعية الفخذية ، والتي تكون أكثر مرونة. نحن نشارك خبرتنا وأدواتنا لتحسين دراسة هذه الظاهرة وزيادة تكرار هذا الإجراء.

Protocol

وافقت لجنة رعاية واستخدام الحيوانات المؤسسية في مستشفى ماساتشوستس العام على البروتوكول التجريبي (IACUC- بروتوكول #2022N000099). اتبع المؤلفون قائمة مراجعة المبادئ التوجيهية REACH (البحوث الحيوانية: الإبلاغ في تجارب الجسم الحي ) لهذا العمل. تلقت جميع الحيوانات رعاية إنسانية باتباع دليل المعهد ا…

Representative Results

كانت جميع اللوحات قابلة للحياة على POD5 ، مما يدل على الأوعية الدموية الجيدة بواسطة SIEA وحدها. يوضح الشكل 5 السديلة قبل وبعد حقن الفلوريسئين الوريدي، ويوضح توعيا كاملا. الشكل 5</stron…

Discussion

تصف هذه المقالة نموذج رفرف لفافة جلدي قابل للتكرار يتم حصاده في الفئران ، مما يسمح بتقييم IP. يمنح هذا البروتوكول الجراحي خطوة بخطوة مجموعات البحث نموذجا موثوقا لاختبار أنظمة IP. المختلفة. من خلال منع أي وعي بخلاف عنيق ، يسمح هذا النموذج بدراسة الأوعية الدموية الجديدة للسديلة من سرير الجرح و…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

تم تمويل هذا العمل من قبل مستشفى ماساتشوستس العام (WGA) و Shriners Children’s Boston (B.U ، K.U ، C.L.C). يتم تمويل Y.B و I.F.v.R من قبل مستشفيات Shriners للأطفال (معرف الاقتراح: # 970280 و # 857829 على التوالي).

Materials

1 mL Syringe Luer-Lok Tip BD 309628
3-0 Ethilon 18” Black Monofilament Nylon suture Ethicon ETH-663H
8-0 Ethilon 12” Black Monofilament Nylon suture Ethicon 1716G
Adson Atraumatic Forceps Aesculap Surgical Instruments BD51R
Akorn Fluorescein Injection USP 10% Single Dose Vial 5 mL  Akorn 17478025310
Betadine Solution 5% Povidone-Iodine Antiseptic Microbicide PBS Animal Health 11205
Bipolar Cords ASSI ASSI.ATK26426
Buprenorphine Hydrochloride Injection PAR Pharmaceutical 3003406C This concentration needs to be diluted for rodents.
Depilatory product – Nair Hair remover lotion Nair NC0132811
Ear tag applier World Precision Instruments NC0038715
Gauze Sponges Curity 6939
Isoflurane Auto-Flow Anesthesia Machine  E-Z Systems EZ-190F
Isoflurane, USP Patterson Veterinary 1403-704-06
Jewelers Bipolar Forceps Non-Stick 11 cm, straight pointed tip, 0.25 mm tip diameter ASSI ASSI.BPNS11223
Lone Star elastic stays Cooper Surgical 3311-1G
Lone star Self-retaining retractor  Cooper Surgical 3304G
Metronidazole tablets USP Teva 500111-333-06
Micro spring handle scissors  AROSurgical 11.603.14
Microscope (surgical) Leica M525 F40
Microsurgical clamp applying forceps Ambler Surgical 31-906
Microsurgical clamps (x2)  Millennium Surgical  18-B1V
Microsurgical Dumont #4 forceps  Dumont Swiss made  1708-4TM-PO
Microsurgical needle holder ASSI B-14-8
Needle holder World Precision Instruments 501246
Nosecone for Anesthesia  World Precision Instruments EZ-112
Pixel analysis software GNU Image Manipulation Program v2.10 GIMP GNU Open licence
PrecisionGlide Needle 27 G BD 305109
Ragnell Scissors  Roboz Surgical RS-6015
Rimadyl (carprofen) Zoetis 10000319 This concentration needs to be diluted for rodents
Scientific Elizabethan collar (e-collar) for Rats Braintree Scientific  NC9263311
Small animal ear tag National Band & Tag Company Style 1005-1
Small Animal Heated Operating Table (Adjustable)   Peco Services Ltd 69023
Sterile towel drape Dynarex Corporation 4410
Sterile water for injection and irrigation  Hospira 0409488724-1
Surgical scrub – BD ChloraPrep Hi-Lite Orange 3 mL applicator with Sterile Solution BD 930415
UV lamp UVP UVL-56
Webcol Alcohol prep pads  Simply Medical 5110

References

  1. Copelli, C., et al. Management of free flap failure in head and neck surgery. ACTA Otorhinolaryngologica Italica. 37 (5), 387-392 (2017).
  2. Lese, I., Biedermann, R., Constantinescu, M., Grobbelaar, A. O., Olariu, R. Predicting risk factors that lead to free flap failure and vascular compromise: A single unit experience with 565 free tissue transfers. Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery. 74 (3), 512-522 (2021).
  3. Wang, W., et al. Flap failure and salvage in head and neck reconstruction. Seminars in Plastic Surgery. 34 (4), 314-320 (2020).
  4. Gabrysz-Forget, F., et al. Free versus pedicled flaps for reconstruction of head and neck cancer defects: a systematic review. Journal of Otolaryngology – Head & Neck Surgery. 48 (1), 13 (2019).
  5. Sievert, M., et al. Failure of pedicled flap reconstruction in the head and neck area: A case report of a bilateral subclavian artery stenosis. International Journal of Surgery Case Reports. 76, 381-385 (2020).
  6. Vaienti, L., et al. Failure by congestion of pedicled and free flaps for reconstruction of lower limbs after trauma: the role of negative-pressure wound therapy. Journal of Orthopaedics and Traumatology. 14 (3), 213-217 (2013).
  7. Murry, C. E., Jennings, R. B., Reimer, K. A. Preconditioning with ischemia: a delay of lethal cell injury in ischemic myocardium. Circulation. 74 (5), 1124-1136 (1986).
  8. Akcal, A., et al. Combination of ischemic preconditioning and postconditioning can minimise skin flap loss: experimental study. Journal of Plastic Surgery and Hand Surgery. 50 (4), 233-238 (2016).
  9. Ulker, P., et al. Does ischemic preconditioning increase flap survival by ADORA2B receptor activation. Clinical Hemorheology and Microcirculation. 75 (2), 151-162 (2020).
  10. Min, S. -. H., Choe, S. H., Kim, W. S., Ahn, S. -. H., Cho, Y. J. Effects of ischemic conditioning on head and neck free flap oxygenation: a randomized controlled trial. Scientific Reports. 12 (1), 8130 (2022).
  11. Dacho, A., Lyutenski, S., Aust, G., Dietz, A. Ischemic preconditioning in a rat adipocutaneous flap model. HNO. 57 (8), 829-834 (2009).
  12. Yildiz, K., et al. Comparison of the flap survival with ischemic preconditioning on different pedicles under varied ischemic intervals in a rat bilateral pedicled flap model. Microsurgery. 34 (2), 129-135 (2014).
  13. Ottomann, C., Küntscher, M., Hartmann, B., Antonic, V. Ischaemic preconditioning suppresses necrosis of adipocutaneous flaps in a diabetic rat model regardless of the manner of preischaemia induction. Dermatology Research and Practice. 2017, 4137597 (2017).
  14. Grimaud, J., Murthy, V. N. How to monitor breathing in laboratory rodents: a review of the current methods. Journal of Neurophysiology. 120 (2), 624-632 (2018).
  15. Strohl, K. P., et al. Ventilation and metabolism among rat strains. Journal of Applied Physiology. 82 (1), 317-323 (1997).
  16. Mucke, T., et al. Autonomization of epigastric flaps in rats. Microsurgery. 31 (6), 472-478 (2011).
  17. Hsu, C. -. E., et al. The rat groin flap model redesigned for evaluating treatment effects on ischemia-reperfusion injury. Journal of Surgical Research. 222, 160-166 (2018).
  18. Mücke, T., et al. Indocyanine green videoangiography-assisted prediction of flap necrosis in the rat epigastric flap using the flow® 800 tool. Microsurgery. 37 (3), 235-242 (2017).
  19. Wang, D., Chen, W. Indocyanine green angiography for continuously monitoring blood flow changes and predicting perfusion of deep inferior epigastric perforator flap in rats. Journal of Investigative Surgery. 34 (4), 393-400 (2021).
  20. Berkane, Y., et al. How to secure pedicled flaps using perioperative indocyanine green angiography: a prospective study about 10 cases. World Journal of Surgery and Surgical Research. 4 (1), 1319 (2021).
  21. Alstrup, T., Christensen, B. O., Damsgaard, T. E. ICG angiography in immediate and delayed autologous breast reconstructions: peroperative evaluation and postoperative outcomes. Journal of Plastic Surgery and Hand Surgery. 52 (5), 307-311 (2018).
  22. Küntscher, M. V., et al. Ischemic preconditioning by brief extremity ischemia before flap ischemia in a rat model. Plastic and Reconstructive Surgery. 109 (7), 2398-2404 (2002).
  23. Liu, R. Q., et al. Cost analysis of indocyanine green fluorescence angiography for prevention of anastomotic leakage in colorectal surgery. Surgical Endoscopy. 36 (12), 9281-9287 (2022).
  24. Cheng, M. H., et al. Devices for ischemic preconditioning of the pedicled groin flap. The Journal of Trauma. 48 (3), 552-557 (2000).
  25. Xiao, W., et al. An innovative and economical device for ischemic preconditioning of the forehead flap prior to pedicle division: a comparative study. Journal of Reconstructive Microsurgery. 38 (9), 703-710 (2022).
  26. Küntscher, M. V., Hartmann, B., Germann, G. Remote ischemic preconditioning of flaps: a review. Microsurgery. 25 (4), 346-352 (2005).

Play Video

Cite This Article
Berkane, Y., Alana Shamlou, A., Reyes, J., Lancia, H. H., Filz von Reiterdank, I., Bertheuil, N., Uygun, B. E., Uygun, K., Austen Jr., W. G., Cetrulo Jr., C. L., Randolph, M. A., Lellouch, A. G. The Superficial Inferior Epigastric Artery Axial Flap to Study Ischemic Preconditioning Effects in a Rat Model. J. Vis. Exp. (191), e64980, doi:10.3791/64980 (2023).

View Video