Elektrikstimülasyon ile Sıçanlarda Akut Pontin Enfarktüsü Kurulması
Summary
Burada sunulan tek bir darbe ile elektrikstimülasyon yoluyla bir sıçan modelinde akut pontin enfarktüsü kurmak için bir protokoldür.
Abstract
Pontin enfarktüsü posterior sirkülasyonda en sık görülen inme alt tipidir, pontin enfarktüsü taklit eden bir kemirgen modeli yoktur. Burada sağlanan başarılı akut pontin enfarktüsü bir sıçan modeli kurmak için bir protokoldür. Yaklaşık 250 g ağırlığındaki sıçanlar kullanılır ve stereotaksik bir aparat kullanılarak ponlara yalıtımlı kılıflı bir sonda enjekte edilir. Bir lezyon tek bir darbe ile elektriksel stimülasyon tarafından üretilir. Longa skoru, Berderson skoru ve ışın dengesi testi nörolojik açıkları değerlendirmek için kullanılır. Ayrıca, sensorimotor fonksiyonu belirlemek için yapıştırıcı kaldırma somatosensoriyel test kullanılır ve ekstremite yerleştirme testi propriosepsiyon değerlendirmek için kullanılır. MRG taramaları daha sonra in vivo inentüsiyi değerlendirmek için kullanılır ve TTC boyama in vitro enfarktüsü doğrulamak için kullanılır. Burada, rostral pons anterolateral temelinde bulunan başarılı bir enfarktüs tanımlanır. Sonuç olarak, yeni bir yöntem akut pontin enfarktüs sıçan modeli kurmak için açıklanmıştır.
Introduction
1980’li yıllardan bu yana, silikon filamentler tarafından indüklenen orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli yaygın temel inme araştırma1kullanılmıştır. Diğer yöntemler (örneğin, MCA2’nin bir dalının dikemi ve fotokimyasal indüklenen fokal enfarktüs) de kullanılmıştır. Bu modeller MCA tabanlı inme modelleri olarak adlandırılmıştır ve inmenin altında yatan patofizyolojik mekanizmaların ve potansiyel terapötiklerin araştırılmasına büyük katkıda bulunmuştur. Bu deneysel modellerin sınırlamaları olmasına rağmen3,4, Bu yöntemler birçok laboratuvarlarda kullanılmıştır5,6. MCA tabanlı inme modelleri ön sirkülasyonda bir inme temsil; ancak, birkaç rapor arka dolaşımda inme taklit modelleri araştırdık7.
Anterior ve posterior dolaşım inmeleri arasında etyoloji, mekanizmalar, klinik bulgular ve prognoz arasında anlamlı farklılıklar vardır8. Bu nedenle, ön sirkülasyon inme modellerinden elde edilen sonuçlar posterior dolaşım inme uygulanamaz. Örneğin, ön sirkülasyon için reperfüzyon süresi 6 saate uzatıldı, çalışmaların küçük bir kısmı görüntüleme bulgularına göre 24 saate kadar uzatıldı9. Ancak, posterior dolaşım için zaman penceresi daha uzun olabilir 24 saat, önceki raporlara göre10 ve kendi klinik deneyimleri. Bu uzatılmış reperfüzyon süresi daha fazla çalışılmış ve deneysel modellerde teyit edilmelidir.
Posterior dolaşım inmeleri ile ilgili olarak, pontin enfarktüsü en sık görülen alt tiptir, tüm iskemik inme olgularının %7’sini oluşturan11,12. Enfarktüs topografisine göre pontin enfarktüsü izole ve izole olmayan pontin enfarktüsleri13olarak ikiye ayrılır. İzole pontin enfarktüsleri altta yatan mekanizmalara göre üç tipe ayrılır: büyük arter hastalığı (LAD), baziler arter dal hastalığı (BABD) ve küçük arter hastalığı (SAD). Pontin enfarktüsünün mekanizmaları, bulguları ve prognozu hakkında bilgi olguların klinik araştırmalarından elde edilmiştir14. Ancak pontin enfarktüsü taklit eden bir kemirgen modeli daha az araştırılmıştır.
Önceki çalışmalarda, pons içeren diffüz beyin sapı tegmentum yaralanmaaraştırılmıştır 7. Bir grup baziler arter ligasyonu ile pontin enfarktüs modeli oluşturmak için çalıştı (BA)15. Başka bir grup seçici proksimal BA seçici16dört nokta ligate için 10-0 naylon monofilament sütür kullanılır. Bu model LAD taklit, ancak en pontin enfarktüsBABD ve SAD sonucu. Buna ek olarak, BA seçici ligasyon karmaşık bir cerrahi ve yüksek ölüm oranına sahiptir.
Burada sağlanan elektrik stimülasyon ile akut pontin enfarktüsü kolay, kolayca çoğaltılabilir ve başarılı bir sıçan modeli için ayrıntılı bir protokoldür.
Protocol
Representative Results
Discussion
Bu çalışma akut pontin enfarktüs sıçan modeli oluşturmak için bir protokol sağlar. Bu model pontin inme hastalarında prognoz ve rehabilitasyon (inme sonrası kronik ağrı dahil) üzerine araştırmalar da kullanılabilir.
Bu yöntemin çeşitli güçlü yönleri vardır. İlk olarak, gelecekteki çalışmalar için akut pontin enfarktüsü bir sıçan modeli sağlar. Yukarıda da belirtildiği gibi pontin enfarktüsü daha az dikkat çeken yaygın bir inme alt tipidir. İnme araşt?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma, Çin Ulusal Bilim Vakfı (814711181 ve 81870933) tarafından Y. Jiang ve Çin Ulusal Bilim Vakfı (No. 81601011), Jiangsu Eyaleti Doğa Bilimleri Vakfı (No. BK20160345) J. Zhu ve Guangzhou Belediye Sağlık Komisyonu Bilimsel Programı (20191A011083) z. Qiu için.
Materials
| 4-0 sucture | Shanghai Jinzhong | Surgical instruments | |
| Adhesive tape | Shanghai Jinzhong | Surgical instruments | |
| Animal anesthesia system | RWD | Wear mask when using the system | |
| Bone cement | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Cured clamp | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| General tissue scissors | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| IndoPhors | Guoyao of China | Sterilization | |
| Isoflurane | RWD | 217181101 | |
| Lesion Making Device | Shanghai Yuyan | Making a lesion | |
| MRI system | Bruker Biospin | Confirmation of infarction in vivo | |
| Needle holder | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Penicilin | Guoyao of China | Infection Prevention | |
| Probe | Anke | Need some modification | |
| Q-tips | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Shearing scissors | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Stereotaxic apparatus | RWD | ||
| Suture needle | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Tissue holding forcepts | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| TTC | Sigma-Aldrich | BCBW5177 | For infarction confirmation in vitro |
References
- Zhu, J., et al. Suppression of local inflammation contributes to the neuroprotective effect of ginsenoside Rb1 in rats with cerebral ischemia. Neuroscience. 202, 342-351 (2012).
- Xu, X., et al. MicroRNA-1906, a Novel Regulator of Toll-Like Receptor 4, Ameliorates Ischemic Injury after Experimental Stroke in Mice. Journal of Neuroscience. 37, 10498-10515 (2017).
- McBride, D. W., Zhang, J. H. Precision Stroke Animal Models: the Permanent MCAO Model Should Be the Primary Model, Not Transient MCAO. Translational Stroke Research. , (2017).
- Liu, F., McCullough, L. D. Middle cerebral artery occlusion model in rodents: methods and potential pitfalls. Journal of Biomedicine & Biotechnology. 2011, 464701 (2011).
- Jiang, Y., et al. A new approach with less damage: intranasal delivery of tetracycline-inducible replication-defective herpes simplex virus type-1 vector to brain. Neuroscience. 201, 96-104 (2012).
- Lopez, M. S., Vemuganti, R. Modeling Transient Focal Ischemic Stroke in Rodents by Intraluminal Filament Method of Middle Cerebral Artery Occlusion. Methods in Molecular Biology. 1717, 101-113 (2018).
- Pais-Roldan, P., et al. Multimodal assessment of recovery from coma in a rat model of diffuse brainstem tegmentum injury. NeuroImage. 189, 615-630 (2019).
- Merwick, A., Werring, D. Posterior circulation ischaemic stroke. The British Medical Journal. 348, 3175 (2014).
- Nogueira, R. G., et al. Thrombectomy 6 to 24 Hours after Stroke with a Mismatch between Deficit and Infarct. The New England Journal of Medicine. 378, 11-21 (2018).
- Wilkinson, D. A., et al. Late recanalization of basilar artery occlusion in a previously healthy 17-month-old child. Journal of Neurointerventional Surgery. 10, 17 (2018).
- Huang, R., et al. Stroke Subtypes and Topographic Locations Associated with Neurological Deterioration in Acute Isolated Pontine Infarction. Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases: The Official Journal of National Stroke Association. 25, 206-213 (2016).
- Jiang, Y., et al. In-stent restenosis after vertebral artery stenting. International Journal of Cardiology. 187, 430-433 (2015).
- Huang, J., et al. Topographic location of unisolated pontine infarction. BMC Neurology. 19, 186 (2019).
- Banerjee, G., Stone, S. P., Werring, D. J. Posterior circulation ischaemic stroke. The British Medical Journal. 361, 1185 (2018).
- Wojak, J. C., DeCrescito, V., Young, W. Basilar artery occlusion in rats. Stroke: A Journal of Cerebral Circulation. 22, 247-252 (1991).
- Namioka, A., et al. Intravenous infusion of mesenchymal stem cells for protection against brainstem infarction in a persistent basilar artery occlusion model in the adult rat. Journal of Neurosurgery. , 1-9 (2018).
- Jiang, Y., et al. Intranasal brain-derived neurotrophic factor protects brain from ischemic insult via modulating local inflammation in rats. Neuroscience. 172, 398-405 (2011).
- Schaar, K. L., Brenneman, M. M., Savitz, S. I. Functional assessments in the rodent stroke model. Experiments in Translational and Stroke. 2, 13 (2010).
- Wu, L., et al. Keep warm and get success: The role of postischemic temperature in the mouse middle cerebral artery occlusion model. Brain Research Bulletin. 101, 12-17 (2014).
- Wen, Z., et al. Optimization of behavioural tests for the prediction of outcomes in mouse models of focal middle cerebral artery occlusion. Brain Research. 1665, 88-94 (2017).
