Estabelecimento de Infarto Agudo de Pontina em Ratos por Estimulação Elétrica
Summary
Apresentado aqui é um protocolo para estabelecer infarto agudo de pontina em um modelo de rato através de estimulação elétrica com um único pulso.
Abstract
O infarto de pontina é o subtipo de derrame mais comum na circulação posterior, enquanto falta um modelo de roedor imitando infarto de pontina. Desde que aqui esteja um protocolo para estabelecer com sucesso um modelo de rato de infarto agudo de pontina. Ratos pesando cerca de 250 g são usados, e uma sonda com baia isolada é injetada nos pons usando um aparelho estereotaxico. Uma lesão é produzida pela estimulação elétrica com um único pulso. A pontuação de Longa, a pontuação de Berderson e o teste de equilíbrio do feixe são usados para avaliar déficits neurológicos. Além disso, o teste somatossensorial de remoção adesiva é usado para determinar a função sensorial, e o teste de colocação do membro é usado para avaliar propriocepção. As ressonâncias magnéticas são então usadas para avaliar o infarto in vivo, e a coloração TTC é usada para confirmar o infarto in vitro. Aqui, é identificado um infarto bem sucedido que está localizado na base anterolateral dos pons rostral. Em conclusão, um novo método é descrito para estabelecer um modelo agudo de infarto de pontina.
Introduction
Desde a década de 1980, o modelo de oclusão da artéria cerebral média (MCAO) induzido por filamentos de silicone tem sido amplamente utilizado na pesquisa básica de derrame1. Outros métodos (ou seja, a sutura de um ramo do MCA2 e infarto focal induzido fotoquimicamente) também foram utilizados. Esses modelos têm sido denominados modelos de AVC baseados em MCA e têm contribuído muito para investigações dos mecanismos fisiodológicos subjacentes ao AVC e potenciais terapêuticos. Embora existam limitações desses modelos experimentais3,4, esses métodos têm sido utilizados muitos laboratórios5,6. Os modelos de avc baseados em MCA representam um derrame na circulação anterior; no entanto, poucos relatos têm investigado modelos que imitam o AVC na circulação posterior7.
Há diferenças significativas entre a etiologia, mecanismos, manifestação clínica e prognóstico entre os traços de circulação anterior e posterior8. Portanto, os resultados derivados de modelos de traçado de circulação anterior não podem ser aplicados ao curso de circulação posterior. Por exemplo, a janela de tempo de reperfusão para circulação anterior foi estendida para 6h, com uma pequena parcela de estudos estendendo-se para 24 h com base em achados de imagem9. No entanto, a janela de tempo para circulação posterior pode ser maior que 24 h, de acordo com relatórios anteriores10 e nossas próprias experiências clínicas. Esta janela de tempo de reperfusão alongada deve ser mais estudada e confirmada em modelos experimentais.
Em relação aos acidentes vasculares cerebrais de circulação posterior, o infarto de pontina é o subtipo mais comum, representando 7% de todos os casos isquêmicos de AVC11,12. De acordo com a topografia do infarto, os infartos pontinos são divididos em infartos pontinos isolados e não isolados13. Os infartos isolados de pontina são categorizados em três tipos com base nos mecanismos subjacentes: doença arterial grande (LAD), doença do ramo da artéria basilar (BABD) e doença arterial pequena (SAD). O conhecimento dos mecanismos, manifestação e prognóstico do infarto do pontino tem sido derivado de investigações clínicas dos casos14. No entanto, um modelo de roedor imitando o infarto pontino tem sido menos investigado.
Em estudos anteriores, a lesão difusa do tronco tegmentum envolvendo os pons foi explorada7. Um grupo tentou criar um modelo de infarto pontino através da ligadura da artéria basilar (BA)15. Outro grupo usou uma sutura de monofilamento de nyfilament 10-0 para ligar seletivamente quatro pontos da BA proximal seletivamente16. Este modelo imita LAD, mas a maioria dos infartos pontinos resultam de BABD e SAD. Além disso, a ligadura seletiva da BA é uma cirurgia complicada e tem uma alta taxa de mortalidade.
Fornecido aqui é um protocolo detalhado para um modelo de rato fácil de executar, facilmente reproduzido e bem sucedido de infarto agudo de pontina por estimulação elétrica.
Protocol
Representative Results
Discussion
O presente estudo fornece um protocolo para a geração de um modelo agudo de infarto de pontina. Este modelo pode ser usado para pesquisas sobre prognóstico e reabilitação (incluindo dor crônica pós-acidente vascular cerebral) em pacientes com avc pontino.
Há vários pontos fortes deste método. Primeiro, fornece um modelo de rato de infarto agudo de pontina para estudos futuros. Como mencionado acima, o infarto de pontina é um subtipo comum de derrame que tem recebido menos atenção….
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este estudo foi apoiado financeiramente pela Fundação Nacional de Ciência da China (81471181 e 81870933) para Y. Jiang e a Fundação Nacional de Ciência da China (nº 81601011), Fundação de Ciência Natural da Província de Jiangsu (Nº. BK20160345) para J. Zhu e pelo Programa Científico da Comissão Municipal de Saúde de Guangzhou (20191A011083) para Z. Qiu.
Materials
| 4-0 sucture | Shanghai Jinzhong | Surgical instruments | |
| Adhesive tape | Shanghai Jinzhong | Surgical instruments | |
| Animal anesthesia system | RWD | Wear mask when using the system | |
| Bone cement | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Cured clamp | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| General tissue scissors | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| IndoPhors | Guoyao of China | Sterilization | |
| Isoflurane | RWD | 217181101 | |
| Lesion Making Device | Shanghai Yuyan | Making a lesion | |
| MRI system | Bruker Biospin | Confirmation of infarction in vivo | |
| Needle holder | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Penicilin | Guoyao of China | Infection Prevention | |
| Probe | Anke | Need some modification | |
| Q-tips | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Shearing scissors | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Stereotaxic apparatus | RWD | ||
| Suture needle | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Tissue holding forcepts | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| TTC | Sigma-Aldrich | BCBW5177 | For infarction confirmation in vitro |
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