Fourni ici est un protocole qui détaille les étapes pour établir un modèle animal de la douleur chronique post-ischémie (CPIP). C’est un modèle bien-reconnu imitant le type régional humain de syndrome de douleur-I. Les hypersensibilités mécaniques et thermiques sont davantage évaluées, ainsi que les comportements nocifensives induits par la capsaïcine observés dans le modèle de rat CPIP.
Le type régional complexe de syndrome de douleur-I (CRPS-I) est une maladie neurologique qui cause la douleur grave parmi des patients et demeure une condition médicale non résolue. Cependant, les mécanismes sous-jacents de CRPS-I n’ont pas encore été révélés. On sait que l’ischémie/réperfusion est l’un des principaux facteurs qui causent LE CRPS-I. Au moyen d’une ischémie prolongée et d’une réperfusion du membre postérieur, le modèle de douleur chronique de rat post-ischémie (CPIP) a été établi pour imiter CRPS-I. Le modèle CPIP est devenu un modèle animal bien connu pour l’étude des mécanismes du CRPS-I. Ce protocole décrit les procédures détaillées impliquées dans l’établissement du modèle de rat du CPIP, y compris l’anesthésie, suivie de l’ischémie/reperfusion du membre postérieur. Les caractéristiques du modèle CPIP rat sont encore évaluées en mesurant les hypersensibilités mécaniques et thermiques du membre postérieur ainsi que les réponses à l’injection de capsaïcine aigu. Le modèle de CPIP de rat montre plusieurs manifestations CRPS-I-like, y compris l’oedème et l’hyperémie de membre postérieur dans le stade tôt après établissement, les hypersensibilités thermiques et mécaniques persistantes, et les réponses accrues à l’injection aigue de noréenicie. Ces caractéristiques en font un modèle animal approprié pour une étude plus approfondie des mécanismes impliqués dans le SCRS-I.
Le syndrome de douleur régional complexe (SCR) rétorque des symptômes complexes et chroniques de douleur résultant de fractures, de traumatismes, de chirurgie, d’ischémie ou de lésions nerveuses1,2,3. Le SCREst est classé en 2 sous-catégories : CRPS type I et type II (CRPS-I et CRPS-II)4. Les études épidémiologiques ont révélé que la prévalence du SCrS était d’environ 1:20005. LE CRPS-I, qui ne présente aucun dommage nerveux évident, peut entraîner une douleur chronique et affecter considérablement la qualité de vie des patients. Les traitements actuellement disponibles montrent des effets thérapeutiques inadéquats. Par conséquent, le SCRS-I demeure un problème clinique important et difficile qui doit être réglé.
L’établissement d’un modèle animal préclinique imitant le CRPS-I est crucial pour explorer les mécanismes sous-jacents crPS-I. Afin de régler ce problème, Coderre et coll. ont conçu un modèle de rat en appliquant une ischémie prolongée et une réperfusion au membre postérieur pour récapituler le CRPS-I6. On sait que les lésions ischémiques/réperfusion sont l’une des principales causes de CRPS-I7. Le modèle de CPIP de rat présente beaucoup de CRPS-I-comme des symptômes, qui incluent l’oedème de membre arrière et l’hyperémie dans le stade tôt après établissement de modèle, suiviavec les hypersensibilités thermiques et mécaniques persistantes6. Avec l’aide de ce modèle, il est proposé que la sensibilisation centrale de douleur, l’activation périphérique de canal TRPA1 et la génération réactive d’espèces d’oxygène, etc. contribuent à CRPS-I8,9,10. Nous avons récemment établi avec succès le modèle de rat de CPIP et avons exécuté le séquençage d’ARN des ganglions de racine dorsal (DRGs) qui innervate la patte postérieure affectée11. Nous avons découvert quelques mécanismes potentiels qui sont probablement impliqués dans la médiation des hypersensibilités de douleur de CRPS-I11. Nous avons également identifié le canal vanilloid 1 (TRPV1) potentiel de récepteur transitoire dans les neurones DRG comme un contributeur important aux hypersensibilités mécaniques et thermiques de CRPS-I12.
Dans cette étude, nous avons décrit les procédures détaillées impliquées dans l’établissement du modèle de rat de CPIP. Nous avons en outre évalué le modèle cPIP de rat en mesurant les hypersensibilités mécaniques et thermiques aussi bien que sa réactivité au défi aigu de capsaïcine. Nous proposons que le modèle de Rat CPIP puisse être un modèle animal fiable pour une étude plus approfondie des mécanismes impliqués dans CRPS-I.
Ce protocole décrit les méthodes détaillées pour établir un modèle de CPIP de rat en appliquant l’ischémie/reperfusion aux membres postérieurs des rats. Il s’agit de l’évaluation de l’apparence des membres postérieurs, de l’œdème, des hypersensibilités mécaniques/thermiques et des comportements aigus nocifensives en réponse à l’injection de capsaïcine.
L’ischémie/réperfusion des membres est un facteur commun contribuant au CRPS-I chez les patients humains12…
The authors have nothing to disclose.
Ce projet a été parrainé par la National Natural Science Foundation of China (81873365 et 81603676), les Fonds provinciaux de sciences naturelles du Zhejiang pour les jeunes chercheurs distingués (LR17H270001) et les fonds de recherche de l’Université médicale chinoise du Zhejiang ( T2019J01, 2018ZY37, 2018ZY19).
1.5 ml Eppendorf tube | Eppendorf | 22431021 | |
DMSO | Sigma-Aldrich | D1435 | |
Capsaicin | APEXBIO | A3278 | |
Digital caliper | Meinaite | NA | |
O-ring | O-Rings West | Nitrile 70 Durometer | 7/32 in. internal diameter |
Plantar Test Apparatus | UGO Basile, Italy | 37370 | |
von Frey filaments | UGO Basile, Italy | NC12775 |