Новый простой метод для измерения липофильностью (logP) с помощью ¹⁹F NMR спектроскопия

Липофильностью является ключевым параметром физико-химических молекул наркотиков который влияет на свойства наркотиков кандидатов во многих аспектах, включая наркотиков растворимость, биодоступность и токсичности¹. Липофильностью измеряется как логарифм (logP) коэффициента смеси концентрации после разделения между n октанола и воды. Были предложены оптимальные липофильностью диапазоны на основании статистических данных перорального наркотиков, из которых Липинский в «правило 5” является наиболее известный пример^2,3. Действительно контролируя липофильностью показал важное значение для улучшения перспектив наркотиков кандидатов. Увеличивая повышенных липофильностью сродство наркотиков была обнаружена как одной из основных проблем в проектах обнаружения наркотиков в течение последних нескольких десятилетий, приводит к увеличению истощение ставки³. Таким образом было высказано предположение о том, что успешный наркотиков развитие связано с сохранением молекулярных липофильностью наркотиков кандидатов в рамках оптимального границ во время близости оптимизации процесса^3,4. В этой связи новых концепций (например, показатели эффективности липофильных) были введены^5,6.

Таким образом, это большое значение для точного измерения липофильностью во время процесса разработки препарата. Кроме того, наличие простых методов для измерения липофильностью востребована как фундаментальных исследований стремится определить решения для журналаP модуляции. В настоящее время многочисленные установленные методы доступны для липофильностью определения¹. Метод стандартного «встряхивания полной колбы (SF)»⁷и его вариации обычно используются для измерения значения logP непосредственно, которые в большинстве случаев зависят спектроскопия UV-Vis для количественной оценки. Основной недостаток этого метода классический SF является его трудоемкий характер. Кроме того образование эмульсий может произойти, особенно для очень липофильных соединений^8,9. Несколько методов были разработаны обойти такие вопросы, как с помощью анализа потоков инъекций, диализ трубы, и т.д. ⁹,¹⁰. Однако ни один из этих методов являются простым и легко применимым в неспециализированных лабораториях.

Есть также много косвенных методов, доступных для использования, например потенциометрического титрования¹¹, электрофоретические методы^12,13, основанные на RP-ВЭЖХ Хроматографические методы, методы, основанные на масс спектрометрии¹⁴, др. Это косвенные методы, как журналP значения получаются путем калибровочных кривых. Среди этих методов RP-ВЭЖХ метод широко используется потому, что это удобный и экономии времени. Тем не менее ее точность зависит от обучающего набора, используемый для установления калибровочной кривой, и оценкам липофильностью зависит от раздела система используется^13,15.

Существует ряд ¹H ЯМР-методов на основе сообщили в литературе для определения липофильностью. Mo et al. разработал метод измерения журналаP ¹H ЯМР без транс растворителей. Воде и октаноле, как раздел растворители, были использованы как ссылки для количественного определения концентрации примеси в каждой фазе¹⁶. Подход, в котором раздел эксперимент произошло непосредственно в NMR трубки, где были собраны данные ЯМР нижней D₂O водного слоя до и после экстракции с 1-октанол, для получения распределения сообщили также Херц и коллег Коэффициент¹⁷. Кроме того Соулзби et al. эксплуатации ¹H ЯМР как инструмента анализа, определяя амплитуду сигналов с помощью полное сокращение амплитудно частотной таблицы программного обеспечения. Отношение амплитуды в обоих слоях, привело к измеренной раздела коэффициент¹⁸. Эти методы являются относительно легко использовать, но часто требуют калибровки селективного импульсов и уровни мощности или использование формы градиента импульсов для обеспечения соответствующего растворителя подавления и сигнал избирательности.

Также можно получить значения вычисляемого logP (забиваютP) для соединения. Доступно несколько методов расчета и коммерчески доступное программное обеспечение. Такие забиваютP значения обычно используются в фармацевтической промышленности, при оценке большое количество наркотиков молекул. Однако большие ошибки от засоритьP значения не являются редкостью в^19,20.

Требования УФ деятельности для анализа концентрации и создание калибровочных кривых для расчета журналаP препятствуют прогрессу научных исследований в этой области. В частности это касается УФ активность алифатических соединений. Фторированные алифатических постановление становятся все более привлекательными для конструкции снадобья в последние годы, и их влияние на общую липофильностью комплекса является темой исследований в нашей группы²¹. Кроме того, ¹⁹F является весьма деликатным ЯМР активные ядра, делая ¹⁹F ЯМР является полезным инструментом для анализа фторированные соединения. Она также имеет больший диапазон химический сдвиг по сравнению с ¹ч. Таким образом целесообразно разработать простой метод для журналаP определение УФ активность фторсодержащих соединений методом ¹⁹F ЯМР спектроскопии. Таким образом общая цель этого метода является достижение удобно липофильностью определение фторсодержащих соединений.

Ключевой принцип нашей ¹⁹F ЯМР-метод является добавление ссылки фторированные соединения в эксперименте (рис. 1) раздела²¹. Справочник составные (БС) и составные X секционируются между водой и n– октанол. После equilibrating, Алиготе от каждой фазы взят в трубу ЯМР и ¹⁹F ЯМР эксперименты выполняются на обоих образцах ЯМР. Интенсивности пиков фтора пропорциональна концентрации (C) и количество атомов фтора (n) соединений. Между составные X и ref неотъемлемой соотношения могут быть получены для обоих этапов. Соотношение в n– октанол слоя определяется как ρ_octи ρ_aq для слоя воды (уравнение 1). Соотношение значений ρ равно соотношение коэффициентов (P) соединение X и ref (уравнение 2). Это приводит к окончательной уравнение (экв. 4) для журналаP измерение составных X. Таким образом для того чтобы определить журнала значениеP неизвестное соединение x, только интеграции коэффициенты (ρ_oct и ρ_aq) в обоих слоёв необходимо быть измерено ¹⁹F ЯМР.