Visualiseren van de doeltreffendheid van pesticiden tegen ziekte Vector muggen op het gebied

Opmerking: Dit protocol is speciaal geschreven voor veldproeven, gericht op de volwassen muggen. Informatie over de wijzigingen die noodzakelijk zijn voor onrijpe muggen, andere volwassen sentinel insecten soorten en unieke scenario’s is opgenomen in de discussie. 1. sentinel insecten kweek en Sentinel kooi preparaten Bouw van volwassen sentinel kooien Bepalen van het totale aantal sentinel kooien die nodig zijn voor het veld proces door met inbegrip van behandeling en bestrijding van gebieden en het aantal replicatieonderzoeken gepland, dan toevoegen van 5% om te compenseren voor verliezen als gevolg van schade of ongewoon sterfte (zie stap 2.1). Bereiden van 5 x 5 in tulle mesh vierkanten (2 per sentinel kooi) met behulp van een rollend disk cutter en richtliniaal snijplank met bulk tulle yardage. Winkel de tulle mesh pleinen in batches van 50 in 1 qt hersluitbare plastic zakken. Voorbereiden van de sentinel kooien door zorgvuldig duwen de platte kartonnen schijven uit de bodems van nieuwe ½ pt karton ijs kopjes maken open 2 x 3 in de cilinders. Voor elk kopje, verwijdert u de kartonnen schijven uit 2 deksels te maken van de open randen (1 voor elk uiteinde van de cilinder). Veilig een Tule mesh plein op één uiteinde van de cilinder door het overvullen onder de omlijsting, zoals de ring wordt strak gemonteerd op de cilinder. Voor elke sentinel-kooi, Fast een haak-en-loop kabelbinder aan een elastiekje en beveiligen van de rubberen band rond de bezel dat is op zijn plaats. Tas de sentinel kooien in batches van 50, met een aparte tas met 50 randen en een zak van 50 tulle mesh pleinen.Opmerking: Tulle maaswijdte moet de minimale grootte te bevatten van de bijzondere sentinel-soorten worden geplaatst in de kooi. Aedes aegypti muggen vergt bijvoorbeeld een kleinere maaswijdte dan Culex quinquefasciatus muggen. Figuur 1: Sentinel kooi voorbereiding. (A) hieronder zijn twee personeel laden sentinel kooien met verdoofde muggen verspreid over een groot wit vel papier. De stack van tulle mesh pleinen in de voorgrond klaar voor plaatsing op de wachten open sentinel kooien dient te worden opgemerkt. (B) komt te staan, zijn verschillende geladen sentinel kooien, in afwachting van de plaatsing van 10% sacharose katoenen ballen en herschikking van de rubberen band. (C) weergegeven zijn sentinel kooien in een koeler, klaar voor implementatie in het veld. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer. Planning en kolonie insecten kweek Selecteer voor sentinel insecten, een soort die het meest geschikt is voor het milieu, seizoen en medische dreiging op de locatie waar de proef zal plaatsvinden. Kijken naar de mogelijkheden van de kolonie en ontwikkeltijd tot volwassene voor die soorten; Kijk bijvoorbeeld naar als de kolonie zal zitten kundig voor het aantal specimens die nodig zijn voor het aantal sentinel kooien vereist in het tijdsbestek. Voor alle fokken, zorgen bevolking steigerend kooien worden gehouden in een gecontroleerde omgeving en zijn groot genoeg voor het aantal volwassenen gepland, en dat een voeding en schoonmaak regime is opgericht en zorgvuldig gevolgd om later stressgerelateerde sterfte die zal verwarren werkzaamheid veldproeven. Voor uitgebreide veldproeven, wilt sequentiële batches in aparte goed gelabelde bevolking kooien aan de achterkant. Gebruik alleen vrouwelijke muggen in sentinel kooien, bij voorkeur 3-5 d na eclosion. Mosquito poppen sexed kunnen worden onder een ontleden scope of fysiek van elkaar gescheiden met behulp van een glas pop scheidingsteken om sorteer inspanning met volwassenen op de sentinel cage laden stap te verminderen.Opmerking: Een kolonie moet kunnen leveren twee keer zoveel muggen gepland voor gebruik in sentinel kooien, omdat alleen vrouwtjes voor sentinels worden gebruikt. Gebruik 10 volwassen vrouwtjes voor elke sentinel-kooi, zoals dit nummer is snel te laden, snel te tellen voor de sterfte en gemakkelijk om te bepalen of om het even welk zijn ontsnapt. Het is essentieel aan rug-plan vanaf de datum van de voorgestelde spray zodat 3 – tot 5-dagen oude volwassen muggen beschikbaar zijn. Nochtans, verstrekt de 3-5 d verspreiding sommige marge in het geval dat een greep weer voorkomt spuiten. Laden sentinel kooien Bereid een CO2 kamer door de voering van de bodem van een nieuwe ½ gal plastic voedsel opslagcontainer met katoenen ballen. Directe één uiteinde van een 6-ft lengte van polyurethaan slang (¼ inch diameter) in het katoen ballen door middel van een strakke gaatje sloeg laag in één kant van de container. Een 20 lb CO2 fles met een regulator hechten aan het andere uiteinde van de buis en plaats het deksel los op de container dat gas om te ontsnappen na verspreiden via de katoenen ballen en circuleren door middel van de container. Tape de buis aan de bovenkant van de tabel om te voorkomen dat de lichte zaal worden getrokken of klopte aan de vloer. Stel een debiet worden de soorten wordt gebruikt (beginnen bij ~ 7 L/min en maken aanpassingen zo nodig). Bereiden van 10% sacharoseoplossing in een nieuwe ½ gal plastic voedsel verpakking en dompelen 100 katoenen ballen, zodat zij volledig verzadigd raken. Lay-out de sentinel kooien vanaf stap 1.1 in batches van 25 of 50 als de ruimte het toelaat, met de Tule mesh pleinen en losse randen aan kant in de buurt. Verwijder muggen uit de kooi van de bevolking met een mechanische aspirator staat channeling muggen rechtstreeks in Verwisselbare geventileerde collectie buizen. Niet meer dan ~ 10 muggen aanzuiging moeten worden in elk buisje en geen meer buizen dan kunnen worden verwerkt binnen 10 min moeten worden ingevuld om te verlichten van de stress. Plaats 2-4 buizen tegelijk in de CO2 -kamer en een timer voor een 4-minuten blootstelling aan de muggen voor latere sexing en transfer naar sentinel kooien anaesthetize instellen. Zodra de timer chimes, verwijder alle buizen uit CO2 kamer en zorgvuldig schudden uit verdoofde muggen van de buizen te verspreiden ze gelijkmatig over een schoon wit 11,5 x 17 – inch vel papier. Stel de timer voor 4 min, dat is de geschatte tijd voordat muggen zal weer actief worden. Gebruik van een pistool aspirator15,16 , of zacht insect pincet te kiezen uit de batches van 20 volwassen vrouwtjes en onmiddellijk weer in de wacht te open sentinel kooien. Zodra alle vrouwtjes zijn gepickt uit de verdoofde batch, gebruiken een aparte mechanische aspirator voor het verzamelen van alle resterende mannelijke muggen die zal worden vernietigd door bevriezing. Zoals elk wachten open sentinel ontvangt kooi een batch van 20 volwassen vrouwelijke muggen, val een Tule plein met een omlijsting gaas over de open bovenkant van de kooi cilinder en duw naar beneden voor de opbouw van de kooi sentinel. Zodra de Tule op zijn plaats is, draaien de rubberen band zodat het legt over beide uiteinden van de maaswijdte van de sentinel-kooi, met de haak-en-loop Kabelbinder geplaatst tegen de kant van de cilinder. Knijp de meerderheid van de 10% sacharoseoplossing uit een katoenen bal zodat het nog vochtige, net voor het punt van vrij druipen, en zachtjes plooi de katoenen bal onder de rubberen band tegen de tulle Maas aan de ene kant van de sentinel-kooi , gemakkelijk toegankelijk is voor de muggen. Herhaal de stappen 1.3.3-1.3.5 om alle de sentinel kooien worden geladen.Opmerking: De kooi laden procedure dient een minimum van twee personeel: een uit te voeren van alle mug behandeling stappen en andere uit te voeren van alle kooi behandeling stappen. Laden sentinel kooi koelers Een 48-qt geïsoleerde picknick koeler voorbereiden op elke 45-50 sentinel kooien (afhankelijk van de zorg/grootte van koeler) door het plaatsen van een natte 18 x 24 – inch katoen handdoek bedekt door een 13-gal hoog keuken Prullenbak zak onderaan. De natte handdoek moet tot het punt van verzadiging maar niet druipend worden uitgewrongen. Vouwen en regelen van de 13-gal zak om het volledig bedekt de bodem van de koeler en ten minste 3 in vanaf de onderkant aan alle kanten. Laad de koeler door zorgvuldig plaatsen sentinel kooien in gestapelde lagen met de katoen ballen naar boven. Afhankelijk van het merk van de koeler, moet er over 10-12 kooien per laag en 4-5 lagen. Indien mogelijk, enigszins gecompenseerd elke laag zodat een kooi niet helemaal de kooi hieronder dekt ter bevordering van de luchtstroom. Bedek de bovenste laag met een tweede 13-gal Prullenbak zak (gevouwen als de onderkant Prullenbak zak) en verspreid een tweede natte handdoek op de top van deze tas. Gebruik plakband vastmaken een gevouwen stuk karton in een voorste hoek van de bovenlip van de koeler, zodanig dat het deksel is gestut openen ongeveer 3/8 in om de uitwisseling van lucht en oververhitting wordt voorkomen. In elke koeler omvatten een 1-qt hersluitbare plastic zak met 10 vrije katoenen ballen gedrenkt in 10% sacharoseoplossing, en een aparte tas met 5 reserve elastiekjes en 5 haak-en-loop Kabelbinders (deze onderdelen zijn af en toe verloren van sentinel kooien tijdens de implementatie in het veld). Gedurende de tijd in de koelers op het gebied van het lab en, top af de sacharoseoplossing in alle katoenen ballen op kooien zo nodig met behulp van een druppelaar en 10% sacharoseoplossing opgeslagen in een ruige container.Opmerking: Met deze methode, typische kolonie muggen kunnen worden geladen in sentinel kooien en opgeslagen in koelers 24-28 h vóór gebruik in veldproeven. Vervoer van sentinel kooi koelers naar het veld Tijdens het vervoer naar het veld site houden sentinel kooi koelers in een voertuig met airconditioning maar beschermd tegen direct zonlicht. Op veld plaatsen in milde tot warme gematigde omgevingen, kunnen de koelers worden gestapeld buitenshuis om te acclimatiseren of bewaard in voertuigen met airconditioning die zijn uitgevoerd; maar in beide gevallen houden koelers niet in direct zonlicht. Horloge voor elke omgevingsomstandigheden buiten die invloed kan hebben op de sentinels in de koelers (bv., voertuig uitlaatgas, Prullenbak, branden, enz.) In extreme hete omgevingen, houden van koelers in voertuigen met airconditioning werking niet in direct zonlicht, maar de sentinels geleidelijk naar buiten voorwaarden voordat u het implementeert op het gebied van de behandeling om te voorkomen dat de dood van shock acclimatiseren. In alle omgevingen, raadzaam om één of twee koelers van sentinel kooien om te bepalen hoe lang ze kunnen worden weggelaten of hoe snel ze kunnen worden geacclimatiseerd aan de plaatselijke buiten omstandigheden te testen. 2. voorbereiding van de veld-Site Totstandbrenging van de sentinel-raster en controle-ruimte Selecteer een studiegebied die voldoende ruimte voor de verspreiding van de geplande wijze van toepassing van pesticiden biedt (luchtfoto, vrachtwagen, of draagbaar) met een duidelijk pad voor verkeer van de spray-apparaat, en duidelijk van menselijke bewoning of activiteit. Indien mogelijk, omvatten een scala van de dichtheid van de vegetatie en algemene heterogeniteit van de habitat te vechten spray penetratie. Ontwerpraster een van locaties voor sentinel kooien die variaties in de afstand van de sproeier, de afstand langs de lijn van de spray, de vegetatie/belemmeringen tot spray penetratie, en hoogte boven het wegdek vangt. Gebruik een 300 ft meten tape reel ter gelegenheid van handige intervallen van de sproeier en langs de lijn van de spray; bijvoorbeeld, het gebruik van veelvouden van 25 ft intervallen. De kaart van het raster te produceren door het markeren van een afdruk van een satellietbeeld met een duidelijke nummering code voor sentinel kooi locaties en verspreiden onder het veld team. Waar mogelijk, verkrijgen GPS-coördinaten voor de locatie van elke kooi of op minste coördinaten van de opvallende kenmerken die later kunnen worden gebruikt voor registratiepunten om te bouwen van een ruimtelijk samenhangend kaart in het GIS. Mark sentinel kooi raster locaties op de grond met het markeren van tape, glow sticks en/of pin vlaggen. Bestrijdingsmiddelen sprays worden vaak uitgevoerd bij schemering of ‘s nachts: probeert te duidelijk verschillende wandelpaden naar alle locaties van de sentinel, met inbegrip van extra markeren tape en/of glow sticks ter gelegenheid van de tocht gevaren of andere belangrijke obstakels. Installeer sentinel kooi palen in de grond volgens het ontwerp raster, en duidelijk het label van elke stok met een code voor haar unieke positie met een permanent marker. Ten minste 48 inch van de paal moet boven de grond. Als de habitat natuurlijk geen vegetatie/obstakel uitdagingen voor pesticide spray dispersie biedt, kunt u overwegen een kartonnen doos van 1 ft3 plaatsen op zijn kant met de hoogste open naast elke sentinel kooi paal, zodat een extra sentinel locatie in gesimuleerde refugia. Luchtstroom van het vak kan worden aangepast door het boren van gaten-½-in in een of meer zijden en vakken moeten worden aangeduid met een unieke positie-code met een permanent marker. Als er een risico van mieren aanvallende sentinel muggen, install sentinel kooi palen door middel van een strakke gaatje geboord in het midden van een 18 x 18 – in zelfklevende vloer tegel, met de plakkerige zijde naar boven voor het overvullen van mieren voordat ze sentinels kunnen bereiken. De 1 ft3 vakken uit stap 2.1.5 kunnen ook worden geplaatst aan de plakkerige kant van deze tegels mieren in de weg staan, en ook vakken in plaats te houden in winderige omstandigheden. Totstandbrenging van een ruimte van de wind control (bestaande uit een soortgelijke habitat en meteorologie als de behandeling gebied) voor de implementatie van onbehandeld controlegewas sentinel kooien blootgesteld aan het milieu op palen en/of in 1 ft3 vakken voor de zelfde hoeveelheid tijd als wachters op het gebied van de behandeling. Een specifiek team van personeel met aparte koelers van sentinel kooien moet worden ingezet voor het verwerken van alle controle sentinels. Middelen toelaat, ontwerp een verdeling van de passende vallen in de gehele behandeling gebied, gebieden die grenzen aan het gebied van de behandeling en controle gebieden om toezicht van lokale natuurlijke populaties van muggen die zich het dichtst bij de soorten geselecteerd in punt 1.2.1 te leiden. Beginnen overdag of ‘s nachts toezicht, afhankelijk van de soort, tijdens een of meer van de 12-24 uur perioden voordat de spray proeven moeten plaatsvinden. Voortzetten van de surveillance gedurende de proeven van de spray, gevolgd door toezicht voor één of meer perioden na de spray-proeven. Figuur 2: veld site voorbereiden met sentinel kooi Polen. Twee scenario’s van sentinel kooi Polen verdeeld in (A) geïrrigeerde tropische microhabitat in een hot-aride regio en (B) hot-dorre woestijn. (A), drie soorten sentinel apparatuur worden getoond: de “ladder” aan de linkerkant is een serie van katoenen linten opgehangen tussen PVC pijp te vangen van pesticiden op verschillende hoogtes boven de grond; de paal in het midden is voor sentinel mug kooien; en de paal aan de rechterkant ondersteunt een spinner dia om vast te leggen van bestrijdingsmiddelen druppels. In (B) is er een soortgelijke katoen lint te vangen van bestrijdingsmiddelen, maar hierbij moet worden opgemerkt dat de rechter steun van het apparaat op de voorgrond in de open verdubbelt als een schildwacht kooi paal (de sentinel-kooi bijgevoegd ongeveer eenderde van de weg naar beneden); in tegenstelling, is het apparaat op de achtergrond geplaatst, zodat het lint en de kooi van de sentinel (aangegeven met gele pijl) beschutte binnen vegetatie zijn. Het vliegtuig op de achtergrond is bezig met een ULV pesticide spray. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer. Het beoefenen van veiligheid Het opzetten van een communicatiesysteem tussen de spray team, de behandeling gebied sentinel behandeling team, de controle gebied sentinel behandeling team, enz., via mobiele telefoons (stem/tekst) of draagbare radio’s. Levering van persoonlijke beschermingsmiddelen (PBM) aan al het personeel die geschikt is voor hun rollen en geschikt is voor de opstelling en toepassing pesticiden. Opzetten van een opslag van pesticiden en mengen/laadruimte beschermd met secundaire insluiting en voorradig met nooduitrusting, zoals schoppen en/of brandblussers voor thermische mist toepassingen, handdoeken bevatten morsen of drupt, afvalcontainers, schoon water, EHBO-benodigdheden, en draagbare boerenbedrog stations. Bovenal stellen protocollen in het geval van lekkages of blootstelling van personeel aan chemische stoffen. Markering van de spray-lijn en opname van meteorologie Voor rijden of hand-carry toepassingen, ervoor te zorgen de spray-regel is duidelijk en dat obstakels worden geïdentificeerd en duidelijk gemarkeerd met het markeren van tape, pin vlaggen en/of glow sticks. Voor luchtfoto toepassingen, maken alle passende afspraken met de luchtverkeerscontrole in Europa. De elementaire lengte van de lijn van de spray moet overeenkomen met de afmetingen van het elektriciteitsnet; echter, de begin- en instellen stoppen punten goed-voor en goed-na het raster. Voeg ongeveer 10% van de elementaire lengte van de spray-lijn aan het begin en einde te maken aan het verhogen van de mogelijkheid voor het gehele raster worden blootgesteld, gezien onvermijdelijk verschuivingen en onvolkomenheden in de windpatronen (Zie representatieve resultaten). Waar mogelijk, te anticiperen op grote wind verschuivingen, instellen van alternatieve spray regel (s) en de sentinel ontwerpraster om informatief vanuit beide richtingen spray. De spray-operator moet bereid zijn om te stoppen met spuiten kort als de wind begint te slecht gust of plotseling verschuift, die een gevaar voor de veiligheid kunt maken. De operator kan hervatten sproeien indien nodig en het proces kan nog steeds gegevens over de werkzaamheid van de bruikbare produceren zolang besturingselementen worden bewaard in de omgeving voor een dergelijke langere periode. Plaats ten minste één weerstation met een gegevens-recorder kan meten van temperatuur, relatieve vochtigheid, windsnelheid en windrichting op het gebied van spray en een ander in het controlegebied. Ook ingesteld een eenvoudig wind indicator lint (ongeveer 2-3 ft van helder gekleurde kwijnende tape) op een vrije sentinel kooi paal met het oog op de spray operator en veld team aan de algemene bewustwording van voorwaarden. Voor luchtfoto toepassingen moet het vliegtuig idealiter kunnen rapportage meteorologie op release hoogte.Opmerking: Samenwerken met een universiteit, de volksgezondheid organisatie, mug en vector controle district of andere instantie met kennis van het gebied voorgesteld om uit te voeren van de veldproeven, zodanig dat de bestaande partnerschappen en afspraken met de grondeigenaren of over land rentmeesters kunnen worden voortgebouwd en bijdragen aan de ontwikkeling van het onderzoeksprogramma. Bestaande partnerschappen vertalen naar sitebeveiliging, langdurig gebruik, en in sommige gevallen, kritische buy-in en acceptatie door het publiek. Met gestructureerde rasters is het eenvoudig voor lokale medewerkers te ontwikkelen hun eigen nummering/labeling regelingen voor snelle en herhaalbare implementatie, collectie en sterfte controles van sentinel kooien. Zodra het raster, spray lijn en meteorologie zijn ingesteld, kunnen de materialen worden overgelaten in plaats (bijvoorbeeld ‘s nachts tot een handige spray tijd of als er een greep weer).Let op: Kartonnen dozen kunnen vervormen wanneer nat als het regent, en sterke wind de zware zelfklevende vloertegels verplaatsen kunnen. 3. implementatie van de Sentinel kooien Vooraf de plaats bepalen van sentinel kooien op elk punt van de sentinel in het raster, zoals de hoogte van de kooi op de paal montage (inclusief multi hoogte, waar men kan worden geplaatst aan de onderkant van de paal en een andere aan de bovenkant), of of kooien zullen geplaatst ik n de 1 ft3 vakken. 2-persoons sentinel kooi implementatie teams toewijzen: een te houden van de koeler en de andere op het uitlichten van sentinel kooien zo nodig. Alternatief, het toewijzen van individuen te gaan in plaats van meerdere kooien afhankelijk van de omgeving en de grootte van het raster. Extra sentinel kooien zijn altijd inclusief in het geval een is gedaald of stapte op, tulle is gescheurd of verloren is tijdens het doorlopen van het raster. Per het positionering regime zoals beschreven in stap 3.1, kunt de haak-en-loop Kabelbinder brengt sentinel kooien aan palen en zorg ervoor dat de katoenen ballen met 10% sacharoseoplossing worden nog op zijn plaats onder de rubberen band. Plaats kooien aan hun kanten in de vakken 1 ft3 zodat beide uiteinden van de mesh tulle staan loodrecht op de grond. Oriëntatie van de kooien die op palen kan worden gespecificeerd bij voorbaat; bijvoorbeeld, wind zodanig dat gaas tulle partijen in overeenstemming zijn met de geplande spray richting en verwachte richting. In de hete woestijn omgevingen, hoek de kooien op de palen zodat de insecten niet in direct zonlicht zijn en in de schaduw van de kant van de cilinder van de kooi kunnen bewegen. In zowel de behandeling en de controle gebieden, duidelijk label elke sentinel-kooi met een permanent marker zoals het wordt opgezet met de twee stukken van informatie: (1) de pole en/of het vak unieke positie code voor later toewijzen in het GIS, en (2) pre spray mortaliteit voor latere correctie voor spray-geïnduceerde sterfte of sterfte door blootstelling aan het milieu ongeacht spray. Bijvoorbeeld, als pre spray sterfte nul is, schrijf “pre-0”; Als 2 exemplaren dood zijn, schrijven “pre-2”, enz. Figuur 3: plaatsing van sentinel kooien binnens- en buitenshuis. Voorbeelden van pole plaatsingen en 1 ft3 vakken (A) binnen in een gesimuleerde landelijke woning, (B) de buitenlucht in een gesimuleerde omgeving, en (C) in een datum palmentuin in een hot-aride zone. Ook getoond zijn de kleverige tegels onder het vak en onder de sentinel kooi geplaatst in de open in (A) en de sentinel pin voor de pool van de kooi geduwd door de kleverige tegel naast het vak in (B) om inval van mieren in sentinel kooien. De multiplex vierkante met rechtop PVC mount links van het vak in (A) is een ondersteuning voor een dia-spinner. Een soortgelijk apparaat kan worden gebruikt ter ondersteuning van een sentinel kooi paal zodat plaatsing van sentinels op variërende hoogten. Verder wordt getoond de dia spinner met dia’s op een berg aan de linkerkant van de sentinel kooi paal en vak (B). Onder C wordt weergegeven een hoog/laag-plaatsing van twee sentinel kooien te onderzoeken beweging van het bestrijdingsmiddel op verschillende niveaus. De bovenkant van de geopende sentinel kooi koeler is net zichtbaar op de voorgrond. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer. Opmerking: Afhankelijk van de grootte van het raster, zorgen er voldoende personeel voor de implementatie van alle kooien in een passend tijdsbestek aan het minimaliseren van de milieu-effecten op sentinel sterfte. Het kan nodig zijn te verrichten praktijk loopt met lege kooien om te bepalen of er voldoende personeel aanwezig zijn. Het spreekt vanzelf dat er onvermijdelijk sommige verspreiding in de blootstellingstijd van sentinel kooien voor het milieu, ten gevolge van de set-up tijd met het opgegeven aantal kooien per persoon zullen. In zeer grote sentinel rasters (bijvoorbeeld voor sommige luchtfoto toepassingen), plan betreffende de coördinatie van meerdere teams in verschillende voertuigen te plaatsen van de sentinel kooien binnen een redelijke termijn. Het is onvermijdelijk dat sommige sterfte in de sentinel kooi mug bevolking, optreden zal zodat het met zorgvuldige kooi labeling vóór omgevingsblootstelling buiten de koelers en voorafgaand aan de toepassing van pesticiden moet worden verantwoord. 4. het uitvoeren van de toepassing van pesticiden Het toewijzen van een timekeeper bijhouden van toepassing spray duur (start/stop tijden) en houd tijden met behulp van een stopwatch, klok of digitale video met tijd/datum stempels. De timekeeper ook een scribe voor het opvangen van meerdere belangrijke variabelen met inbegrip van de tijd op welke sentinel kooi implementatie is voltooid, vliegen, rijden, wandelen snelheid, toepassing apparaat debiet, bestrijdingsmiddelen concentratie en oplosmiddel, spuiten van tijd kan worden toegewezen, houdt tijd, tijd bij welke kooi collectie is voltooid en algemene habitat opmerkingen. De toepassingsapparatuur per fabrikant richtsnoeren voor te bereiden en laden de bestrijdingsmiddelen (en verdunningsmiddel indien nodig), met behulp van het minimum bedrag ter dekking van het doelgebied plus een vooraf bepaald bedrag ter verantwoording voor spray lijn volumes en bestrijdingsmiddelen reservoir sump om te voorkomen dat cavitatie tijdens spray. Aangegeven op het etiket van het bestrijdingsmiddel doses niet overschrijden en gebruik geen pesticiden niet goedgekeurd door de US Environmental Protection Agency, tenzij een specifiek naar de locatie van het veld proces experimenteel gebruik-vergunning is verkregen. Vast een voldoende tijd van de post spray greep waarmee pesticide spray pluim te verspreiden in het raster van de kooi sentinel voordat de sentinel kooien worden verzameld. Houd tijd is gebaseerd op een evenwichtige afweging van de habitat/vegetatie dichtheid, meteorologische omstandigheden (met name extreme hitte of wind) toepassingsinstrument, toepassingsmodus (luchtfoto, ground vehicle, draagbare), doel insect en pesticideformulering, en voorbereidende proeven te ontwikkelen effectief kunnen vereisen. Zodra sentinel kooien zijn gelabeld en geïmplementeerd in zowel de behandeling en de controle gebieden en alle sleutelposities bereidheid hebben meegedeeld, hebben de spray exploitant voeren een laatste controle op windsnelheid en windrichting en initiëren het sproeien vanuit de lucht, grond of draagbare de toepassing van pesticiden van de aangewezen spray lijn of alternatieve spray lijn zoals nodig. Stel het vliegen, rijden of wandelen snelheden afhankelijk van toepassing apparaat debiet en bestrijdingsmiddelen label tarief. Zodra de toepassing van de spray voltooid is, hebben de timekeeper markeert het begin van de wacht tijd en kennis van alle personeelsleden 1-2 min voordat de wacht tijd duren zal, zodat alle personeelsleden kunnen naar de gewenste positie verplaatsen en bereiden voor het verzamelen van de sentinel kooien.Let op: Observeren al voorzorgsmaatregelen vermeld op het etiket van het bestrijdingsmiddel naast standaard bestrijdingsmiddelen applicator beste praktijken. Bestrijdingsmiddelen toepassingen moeten worden uitgevoerd door een gecertificeerde bestrijdingsmiddelen applicator met, indien mogelijk, aanvullende certificering in de volksgezondheid bestrijdingsmiddelen categorie. Voordat de spray toepassing zorgen alle personeel bovenwinds module of in voertuigen met airconditioning op recirculate als ze in het doelgebied moeten worden, en/of passende PPE dragen. Controleer alle sentinel kooi koelers zijn gesloten en dat in gesloten voertuigen geparkeerd bovenwinds van de spray-toepassing hebben de airco op recirculate. Figuur 4: voertuig gemonteerde thermische mist een raster in warm-dorre equatoriale locatie spuiten. Een truck gemonteerd ULV sproeier rijdt langs een lijn van de spray regisseren pesticide spray door een raster van sentinel kooien in een open veld (A). Vergelijkbaar met Figuur 2, elke sentinel-positie is uitgerust met een tweede paal ter ondersteuning van een katoenen lint voor het verzamelen van bestrijdingsmiddelen druppels voor een latere anayse met gaschromatograaf/massaspectrometrie. Close-ups van sentinel kooien (B) in een warme omgeving tot de gematigde voordat spray en (C) in een hot-droge omgeving na de spray. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer. 5. het verzamelen van de Sentinel kooien en opname sterftecijfers Gebruiken dezelfde sentinel kooi teams om te verzamelen van kooien in het raster, zodra de hold-tijd is verstreken. Alle personeel behandeling na spray kooien moet dragen wegwerp nitril handschoenen om te minimaliseren van menselijk contact met pesticiden. Na spray kooien terugkomen in de beschermende omgeving van de sentinel kooi koelers zo spoedig mogelijk, opgeslagen in een cool voertuig niet in direct zonlicht, en keerde terug naar het lab voor de verwerking van zo spoedig mogelijk. In zowel de behandeling en de controle gebieden is het cruciaal voor de record na spray sterfte op elke sentinel-kooi met een permanent marker zoals het is verzameld. Na spray sterfte telling dient alle dode muggen in de kooi, en dit nummer moet worden geschreven direct aan de “pre” telling, maar duidelijk genoeg te onderscheiden van de pre blootstelling sterfte telling omcirkeld. Later, zal de pre telling worden afgetrokken van de post telling te verkrijgen van de werkelijke sterfte door blootstelling aan de bestrijdingsmiddelen (spray gebied) of het milieu (regelzone). Probeer niet te voeren deze wiskunde in het veld terwijl haast om te verzamelen van sentinel kooien. Poging om terug te keren sentinel kooien aan de lab-werkruimte binnen 6 uur na spray zodat de 6 h sterfte telling kan worden opgenomen. Breng alle kooien in kunststof trays, teruggooi alle elastiekjes, haak-en-loop kabels banden en katoenen ballen in het lab. Elke lade moet ongeveer 20 sentinel kooien opgeslagen met de mesh tulle parallel aan de grond houden. Plaats een nieuwe 10% sacharose oplossing katoenen bal op alle kooien en dekking van elke lade met een nieuwe vochtige katoen handdoek, vergelijkbaar met die gebruikt in de sentinel kooi koelers. Stapel de schaaltjes op een bankje lab of in een broedmachine met behulp van ½-in PVC pijp afstandhouders. Bewaar de schaaltjes met kooien van behandeling gebieden goed gescheiden of in verschillende starterscentra waarmee kooi laden. At this point, pre- en post spray sterftecijfers uit elke kooi aan overdragen gegevensformulieren zoals de 6 h sterfte telling wordt uitgevoerd: één persoon wegwerp nitril handschoenen moet nemen sentinel kooien uit laden één-door-één voor elke kooi, roepen de 1) uniek vestiging, vervolgens de 2) pre graaf en de onmiddellijke na graaf lezen uit de kooi zelf, gevolgd door de 3) huidige 6 h graaf rechtstreeks waargenomen. Een tweede persoon moet deze gegevens op een rij voor elke unieke positiecode uit de evaluatieversie (tabel 1) vooraf bereid vorm opnemen. Herhaal dit proces na 12 uur en 24 h na spray, het laden op te slaan in stabiele omstandigheden tussen de graven van de sterfte. Zodra de 24u sterfte telling voltooid is, bevriezen van alle dienbladen van de sentinel kooien te doden alle exemplaren, en vervolgens voeren final graven voor elke kooi te verkrijgen van een nauwkeurige noemer voor de berekening van percentage mortaliteit. Als een specimen in een kooi ontbreekt, kijk direct eronder in de lade, waar het uitgedroogd en gedaald door kan hebben. Beschikken over alle sentinel kooien, katoenen handdoeken en plastic afval zak liners in gesloten vuilniszakken in normale prullenbak, grondig schoon alle koelers en schaaltjes met water en zeep en drogen ze in direct zonlicht.Opmerking: Larvale lade spacers zijn gemakkelijk gemaakt van PVC voorraad pijp, met een uitsparing gesneden in elk uiteinde, zodat ze niet kunnen uit de lade rollen. Afstandhouders toestaan stapeling van larvale bakjes om ruimte te besparen in voertuigen, starterscentra, of lab bankjes. Voor een aantal veld-sites, het niet mogelijk om terug te keren naar het lab binnen 6 uur; in dat geval kooien overbrengen van koelers te laden in het veld met behulp van het bovenstaande protocol en materialen en stapel ze zorgvuldig in het van airconditioning voorziene voertuig. Opname mortaliteit in iedere kooi onmiddellijk na de post spray houden tijd, en op ongeveer 6 uur, 12 h en 24u na spray zal informatie verstrekken over knockdown (korte termijn) vs. langetermijneffecten van het bestrijdingsmiddel. Figuur 5: Processing sentinel kooien na spray. Twee scenario’s voor het overbrengen van post spray kooien in gestapelde schaaltjes tijdens de controle van de sterfte 6 h: (A) in een hotelkamer in de buurt van een extern veld site en (B) in een handige parkeerplaats terug te keren naar het lab van een verre veld site. Opmerking de PVC afstandhouders in de foto van de inzet in (A), vochtige handdoeken die betrekking hebben op kooien aangelegd in bakjes in de belangrijkste foto van (A), en een voorbeeld van een unieke vestiging en pre en omcirkelde na spray sterfte geannoteerde rechtstreeks op een sentinel kooi in de foto van de inzet in (B). Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer. 6. verwerking, analyseren, en in kaart brengen van de sterftecijfers Breng alle sterfte hand opgenomen gegevens uit de formulieren in een elektronische spreadsheet en berekenen van 4 nieuwe kolommen voor post spray, 6 h en 12 h 24 h mortaliteit (alle gecorrigeerd voor de sterfte van de pre-spray). Corrigeren van alle gegevens van de sterfte van behandeling gebied voor de sterfte in de controlegroep in 4 extra nieuwe kolommen met behulp van de correctie van Abbott17: berekenen van een sterfte in de controlegroep van de gemiddelde over alle controle sentinels voor elke periode die sterfte was opgenomen (dat wil zeggen, na spray, 6 h en 12 h 24 h; alle gecorrigeerd voor de sterfte van de pre-spray), en gebruik deze betekenen voor Abbott-correct de sterfte in iedere behandeling gebied sentinel kooi voor elke overeenkomstige periode. De drempel voor de sterfte in de controlegroep aanvaardbaar kan worden willekeurig bepaald op basis van de soort van sentinel mug gebruikt maar mag niet hoger zijn dan 25. In een geografisch informatie systeem-kaart alle unieke sentinel kooi locaties met behulp van de GPS-gegevens verzameld in stap 2.1.3 en maak 4 kolommen voor de sterfte Abbott-gecorrigeerd voor de sterfte in de 4 perioden in de kenmerk-tabel voor deze locaties. Maak een geïnterpoleerde dekking voor de sterfte voor elk van de 4 sterfte perioden over alle unieke sentinel locaties op het gebied van de behandeling. Deze geïnterpoleerde dekkingen toevoegen aan de kaart en gebruik een uitgerekte kleurengrafiek op een blauwe tot rode spectrum georiënteerde laag (blauw) te hoog (rood). Verbeteren van de kaart van het gebied van de behandeling met een onderliggende satellietbeeld en sentinel kooi posities (onderscheid te maken van behandeling en controle sentinels) toevoegen, lijn, rijden richting, schaal bar, Noord pijl, geïnterpoleerde sterfte kleur oprit sleutel, de sleutel tot spuiten symbolen, en een gedetailleerde titel met de datum, type habitat, bestrijdingsmiddelen en oplosmiddel gebruikt, apparatuur voor de toepassing gebruikt, en doelsoorten. Exporteer een kaartafbeelding voor elk mortaliteit periode oppervlak. Meteorologische informatie toevoegen als een vlakbouw grafiek en omvatten een aparte windroos (polar perceel) om te laten zien van de heersende wind, windsnelheid en variabiliteit gedurende de spray. Ook aparte meteorologische gegevens leveren voor release hoogte in het geval van luchtfoto toepassingen. Grafiek natuurlijke bevolking toezicht als een index van het aantal vrouwelijke dieren van elke soort gegevens per trap per nacht. Uitgang van een aantal grafieken per locatie (naast behandeling gebied, binnen het gebied van de behandeling, en binnen regelzone) gepartitioneerd en periode (bemonsterd vóór, tijdens of na de spray proeven) en plaats hen afzonderlijk zoals inzetstukken in het GIS voor de belangrijkste kaart te laten zien van de effecten op natuurlijke populaties over tijd binnen, naast, en uit de buurt van de toepassing van pesticiden.