نقل الاجنه طفيف التوغل والتزجيج الجنيني في مرحله الجنين الأمثل في نموذج الأرنب

وبهدف تجاوز العقم البشري أو تحسين نشر الماشية ذات القيمة الجينية العالية والحفاظ علي الموارد الوراثية الحيوانية ، فان مجموعه من التقنيات تسمي مجتمعه تكنولوجيات الإنجاب المساعدة ، مثل الاباضه الفائقة ، في تم تطوير الإخصاب الأنبوبي ، وثقافة الاجنه ، أو التجميد ،^1،2. حاليا ، يتم إعطاء العلاجات الهرمونية لتحفيز المبيضين وإنتاج عدد كبير من بصيلات المبيض عدد الجريبات الغاريه¹. البويضات التي يتم جمعها من هذه البصيلات يمكن نضجها ، المخصبة ، وتطويرها في المختبر حتى يتم اما بالتبريد أو نقلها إلى الأمهات البديلة³. ومع ذلك ، خلال هذه العلاجات ، ويتعرض الامشاج و تخليق ملقح لسلسله من العمليات غير الفسيولوجية التي يمكن ان تتطلب التكيف الجنين للبقاء علي قيد الحياة في هذه الظروف^4،5. هذا التكيف هو ممكن بسبب اللدونة الجنين في وقت مبكر ، والذي يسمح التغييرات الجنينية في التعبير الجيني والبرمجة التنموية⁶. ومع ذلك ، يمكن ان تؤثر هذه التعديلات علي المراحل اللاحقة من تطور الجنين حتى سن الرشد ، ومن المقبول علي نطاق واسع الآن ان الأساليب والتوقيت وإجراءات التجميد أو الظروف الثقافية تظهر نتائج مختلفه علي مصير الجنين^{7 , 8}. لذلك ، لتوضيح الآثار المستحثة محدده من الفنون ، واستخدام نماذج الحيوانية تتميز جيدا لا مفر منه.

وقد حدثت أول ولادة حيه موثقه ناتجه عن نقل أجنه ثدييه في ال1890⁹. اليوم ، نقل الاجنه (ET) إلى انثي بديله هو خطوه حاسمه في دراسة الآثار الناجمة عن الفن خلال مرحله ما قبل الغرس علي مراحل تطوير الاجنه اللاحقة¹⁰. تقنيات ET تعتمد علي حجم والهيكل التشريحي لكل الحيوانية. وفي حاله النماذج الحيوانية الكبيرة الحجم ، كان من الممكن القيام بعمليات ET عن طريق تقنيات ET غير جراحيه لعنق الرحم ، ولكن في قسطرة الأنواع الأصغر حجما من عنق الرحم هي أكثر تعقيدا وتستخدم التقنيات الجراحية في كثير من الأحيان¹¹. ومع ذلك ، يمكن ان يسبب الجراحة ET نزيف التي يمكن ان تضعف زرع ونمو الجنين ، والدم يمكن ان تغزو تجويف الرحم ، مما تسبب في وفاه الجنين¹⁰. ولا تزال التقنيات غير الجراحية عبر عنق الرحم تطبق في البشر ، والبالونات ، والأبقار ، والخنازير والفئران^{12،13،14، 15،16،17}، ولكن الجراحية لا تزال تستخدم ETs في أنواع مثل الماعز والأغنام أو الحيوانية الأخرى التي تمثل صعوبات اضافيه^{10،18،19،20،21}، مثل الأرانب (اثنين الاجهزه المستقلة) أو الفئران (حجم صغير). ومع ذلك ، تميل أساليب النقل الجراحية تدريجيا إلى استبدالها بطرق اقل الغازية. واستخدم التنظير الباطني لنقل الاجنه ، علي سبيل المثال ، في الأرانب والخنازير والتاملات الصغيرة^18و19و20. ويمكن استخدام هذه الطرق التنظير طفيف التوغل لنقل الاجنه في أمبول عن طريق infundibulum ، وهو أمر ضروري في الأرانب وأظهرت اثار مفيده في بعض الأنواع²⁰. ويستند هذا إلى اهميه الحوار الصحيح بين الجنين والام خلال مراحل الاجنه المبكرة في القناة. وكما ذكر أعلاه ، فان أعاده عرض الاجنه التي تجري في الأرانب اثناء هجره الاجنه من خلال القناة الهوائية ضرورية لتحقيق الاجنه القادرة علي زرع^22،23.

نماذج الحيوانية أكبر حجما ، مثل الأبقار ، هي مثيره للاهتمام لان السمات البيوكيميائية وما قبل الغرس مماثله لتلك الموجودة في الأنواع البشرية²⁴. ومع ذلك ، الحيوانية الكبيرة مكلفه للغاية لاستخدامها في التجارب الاوليه ، وتعتبر القوارض نموذجا مثاليا (76 ٪ الكائنات الحية النموذجية هي القوارض) للبحوث المختبرية²⁵. ومع ذلك ، فان نموذج الأرنب يوفر بعض المزايا علي القوارض في الدراسات الانجابيه ، كما ان بعض العمليات البيولوجية الانجابيه التي عرضها البشر هي أكثر تشابها في الأرانب من تلك الموجودة في الفئران. الإنسان والأرانب تقديم مماثله الوراثية الجنينية تنشيط الجينوم ، والذواقة وبنيه المشيمة الأرقاء. الاضافه إلى ذلك ، باستخدام الأرانب فمن الممكن ان نعرف التوقيت الدقيق للإخصاب ومراحل الحمل بسبب الاباضه المستحثة²⁵. الأرنب دورات الحياة قصيرة ، واستكمال الحمل في 31 يوما والوصول إلى سن البلوغ في حوالي 4-5 أشهر ؛ الحيوانية من السهل التعامل معها بسبب سلوكها المنصاع وغير العدواني ، وصيانتها اقتصاديه جدا بالمقارنة مع حساب الأكبر من الماشية. وعلاوة علي ذلك ، من المهم ان نذكر ان الأرانب لديها الرحم المزدوج مع اثنين من cervixes مستقله^11،25. هذا يضع الأرنب في وضع تفضيلي ، كما يمكن نقل الاجنه من المجموعات التجريبية المختلفة إلى نفس الحيوانية ، ولكن في قرن الرحم مختلفه. وهذا يتيح لنا مقارنه كل من الآثار التجريبية ، والحد من عامل الامومه من النتائج.

اليوم ، غير الجراحية أساليب ET ليست في استخدامها في الأرنب. بعض الدراسات التي أجريت في أواخر 90s باستخدام تقنيه ET عبر عنق الرحم أسفرت عن انخفاض معدلات التسليم تتراوح بين 5.5 ٪ إلى 20.0 ٪^11،26 مقابل 50-65 ٪ من الطرق الجراحية ، من بينها اجراء تنظير البطن الموصوفة من قبل Besenfelder و Brem¹⁸. معدلات النجاح المنخفضة لهذه الطرق غير الجراحية ET في الأرانب تتزامن مع عدم وجود أعاده عرض الاجنه اللازمة في القناة ، والتي يتم تجنبها في الناقلات العنقية. هنا ، ونحن وصف فعاله الحد الأدنى من الجراحة بالمنظار ET الاجراء باستخدام الأرانب كنموذج الكائن الحي. هذا الأسلوب يوفر نموذجا لمزيد من البحوث الانجابيه في الحيوانية الكبيرة والبشر.

لان الأرانب لديها نافذه زمنيه ضيقه بشكل خاص لغرس الاجنه ، ET في هذا النوع يتطلب درجه عاليه من التزامن بين المرحلة التنموية للجنين في ET والوضع الفسيولوجي للمستلم²⁷. في بعض الحالات ، بعد العلاج التناسلي الذي يبطئ نمو الجنين (مثل الثقافة الانبوبيه) أو يغير من تقبل بطانة الرحم (مثل علاجات الاباضه) ، لا يوجد تزامن بين الجنين ورحم الام. ويمكن ان تؤثر هذه الحالات سلبا علي النتيجة. للرد في هذه السياقات ، ونحن وصف الفعالة الأرنب مورلي التزجيج البروتوكول الذي يسمح لنا لوقفه ، وتنظيم واستئناف التجارب. وهذه العملية مستصوبه من النواحي اللوجستية للدراسات الانجابيه وتتيح لنا القدرة علي تخزين الاجنه علي المدى الطويل ، مما يسمح بنقلها. الاجراء بالمنظار واستراتيجيات الحفظ بالتبريد تسمح بتخطيط أفضل للدراسات مع عدد اقل من الماشية. التالي ، فان منهجيتنا توفر مزايا صحية واقتصاديه وتتوافق مع مفهوم 3Rs (الاستبدال والتخفيض والصقل) للبحوث الحيوانية مع الهدف المعلن لتحسين العلاج البشري للحيوانات التجريبية. وهكذا ، مع هذه الأساليب ، والأرانب تشكل كائن نموذجي مثالي لاختبارات التكاثر في الجسم الحي.