全身麻酔を使用してプロシージャのマウスにおける体系的な評価
Summary
全身麻酔を使用してプロシージャの間にマウスの福利を評価するためのプロトコルを開発しました。グルココルチコイド代謝物を分析しただけでなく幸福のレベルを示す行動パラメーターのシリーズ。プロトコルは、動物を中心とした科学的な厳しさの度合いを推定する一般的な援助として使用できます。
Abstract
ラッセルとトリーバーチの原則 (交換、削減、洗練された) が開発した 3 r、合わせて科学的な研究は、可能な限り動物実験に代わる方法を使用してください。動物実験に代わるものがない、実験動物使用数の合計は貴重なデータを取得するための必要最小限にする必要があります。さらに、痛み、苦しみ、そして実験手順に伴う苦痛を最小限にする適切な洗練の手段が適用されるべき。痛み、苦しみ、そして苦痛の程度を分類に使用されるカテゴリは、非回復、軽度、中程度、または重度 (EU 指令 2010年/63) です。カテゴリは、個々 のケースで適用するには、それは科学的に正しいツールを使用する重要です。
ここで示したよくあ評価プロトコル中に全身麻酔を使用するプロシージャです。プロトコルは穴を掘るなど幸福の指標としての動作の造巣ホーム ケージ活動、マウスのしかめっつらスケールと豪華な行動に焦点を当てください。また、特性不安関連行動の自由探索的パラダイムを使用します。24 時間麻酔後に急性ストレスの指標として糞便中コルチコステロン代謝物を測定します。
プロトコルはマウスの全身麻酔の幸福の科学的に確かな情報を提供します。その簡単のためプロトコル簡単に適応でき計画研究の統合します。それが EU 指令 2010年/63 のカテゴリーにおける苦悩を分類するスケールを提供していない研究者が科学的データを用いた手法の厳しさの度合いを見積もることができます。それは、動物を中心とした科学的方法で幸福の評価を改善する方法を提供します。
Introduction
EU ディレクティブ 2010年/631は、ラッセルとバーチ2によって開発された 3 r 原則 (交換、削減、改良) は動物実験が必要な場合に適用することを定めています。EU 指令の究極の目標はすべての動物テストを段階的に、ディレクティブ、当分の間、いくつかの動物実験がまだ必要な人間と動物の健康を守る研究を行うことを認めています。したがって、動物実験は、任意の別の方法で置き換えることはできません、実験動物の最小数のみは、信頼性の高い結果を得られます。さらに、痛み、苦しみ、そして実験プロシージャを伴う苦痛の量は適切な洗練の手段を使用して最小化する必要があります。EU ディレクティブ 2010年/63 は、手順の重大度は、非回復、軽度、中程度、または重度の1として前向き分類される必要が定めています。重症度分類は、ケースバイ ケースに基づいて決定は、特定の手順の重大度を推定するための科学的ツールを持つことが重要です。
モートンとグリフィス3提案としてスコア シートは、幸福4に対するマイナスの効果を含む正常な状態からの任意の偏差を検出するに必要不可欠なツールです。スコアシートが遡及的痛み、苦しみを決定する使用され、実験によって引き起こされると (例えば体重、毛皮、歩行)、個々 の動物の物理的な状態で目に見える変化に焦点を当てる。附属書 VIII の EU 指令 2010年/63 は、それぞれに重要度カテゴリの例を示します、データに基づく科学的を使用して指定されたプロシージャの厳しさの度合いを推定する研究者まだ欠如ツール。
否定的な幸福を示す指標の不在は、動物の状態を判断する唯一の方法ではないです。肯定的な幸福を指す指標の存在はまた重要な5,6,7,8です。たとえば、動物は穴を掘るのような豪華な行動を表示や入れ子建物動作に不可欠なニーズが満たされたときのみ。幸福を縮小した場合高級動作5,7を拒否する最初のです。幸福の評価で使用されるプロトコルは、詳細かつ包括的な9の彼らの幸福感を評価するために物理的な生理学的/生化学的、および動物の心理状態を指すインジケーターを含める必要があります。
洗練されたコンテキスト内でプロトコルはこれらの要件を満たすために、マウス10の福利に全身麻酔を含む手順の効果を評価するために開発されました。同時に目標は、与えられた実験にプロトコルの簡単な統合を有効にする追加のストレスを最小限に抑えることでした。プロトコルは、行動、活動、食物摂取、入れ子などホーム ケージ動作と特性不安関連行動を掘り進むと見なします。さらに、糞マウス顔をしかめるスケール (MGS) とコルチコステロン代謝物質の非侵襲的な分析を含みます。プロトコルは、科学的かつ動物中心に幸福の評価を容易にして厳しさの度合いの分類をサポートする福利に関する情報を提供するために設計されています。スコア シートの他のプロシージャの重症度分類に有用な情報を提供できます。プロトコルを実行する簡単です広範な装置を必要としない、研究の結果に影響を与えることがなく継続的な実験に統合できます。注意すべきこと動物の研究: レポートので生体実験 (到着) ガイドライン11は、動物実験、改善設計、分析、およびレポートの目的を含むすべての調査で観察されます。
Protocol
Representative Results
Discussion
プロトコルは、単一の麻酔または繰り返しのイソフルラン麻酔を受けた C57BL/6JRj マウスの福利を評価するために元々 開発されました。結果は幸福を評価するため機密性の高いメソッドが他の手段 (例えば無料探索的パラダイム MGS、穴居性の食品の摂取量) と同様に、高級な動作テストをするを確認します。繰り返しイソフルラン麻酔には、特性不安関連行動、MGS、潜砂行動の短期的な?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ザビーネ ・ ジェイコブス サンプル コレクション、エディス ・ Klobetz-・ ラッサムの FCM 解析を支援するためのおかげで PD 博士医獣医します。habil。統計分析を支援するため Roswitha メルルと原稿の校正のための Wiebke ・ ゲントナー。研究ベルリン-ブランデンブルク研究プラットフォーム BB3R の一部 (www.bb3r.de) は、ドイツ連邦教育省、研究によって資金が供給された (許可番号: 031A262A) (www.bmbf.de/en/index.html)。
Materials
| Isofluran | CP-Pharma Handelsgesellschaft mbH | 1214 | |
| InfraMot – Sensore Units | TSE Systems | 302015-SENS | |
| InfraMot – Control Units | TSE Systems | 302015-C/16 | |
| InfraMot – Software | TSE Systems | 302015-S | |
| Nestlet N | Ancare – Plexx | NES3600 | |
| Camera EOS 350D | Canon |
References
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