Évaluation systématique du bien-être chez les souris pour les procédures utilisant l’anesthésie générale
Summary
Nous avons développé un protocole pour évaluer le bien-être chez les souris au cours de procédures à l’aide de l’anesthésie générale. Une série de paramètres du comportement indiquant les niveaux de bien-être ainsi que les métabolites de glucocorticoïdes ont été analysés. Le protocole peut servir comme une aide générale pour estimer le degré de sévérité d’une manière scientifique, axée sur l’animal.
Abstract
En accord avec les 3R principe (remplacement, réduction, raffinement) développé par Russell et Burch, recherche scientifique doit utiliser des alternatives à l’expérimentation animale, lorsque cela est possible. Lorsqu’il n’y a pas d’alternative à l’expérimentation animale, le nombre total d’animaux de laboratoire utilisés doit être au minimum nécessaire pour obtenir des données précieuses. En outre, les mesures de raffinement appropriées devraient être appliquées pour minimiser la douleur, la souffrance et la détresse qui accompagne la procédure expérimentale. Les catégories utilisées pour classer le degré de douleur, la souffrance et la détresse sont non-recouvrement, légère, modérée ou grave (Directive européenne 2010/63). Pour déterminer quelles catégories s’appliquent au cas particuliers cas, il est essentiel d’utiliser des outils scientifiquement.
Le protocole de bien-etre-évaluation présenté ici est conçu pour les procédures au cours desquelles l’anesthésie générale est utilisée. Le protocole met l’accent sur les comportements de l’activité, la souris Grimace échelle et luxe maison cage comme fouisseurs et nid comportement en train de construire des indicateurs de bien-être. Il utilise également le paradigme exploratoire gratuit pour un comportement liées à l’anxiété trait. Métabolites fécaux corticostérone comme indicateurs de stress aigu sont mesurés sur la période post anesthésique de 24 h.
Le protocole fournit des informations scientifiquement solides sur le bien-être des souris après une anesthésie générale. En raison de sa simplicité, le protocole peut facilement être adapté et intégré dans une étude prévue. Bien qu’il ne fournit pas une échelle pour classer la détresse en catégories selon la Directive européenne 2010/63, elle peut aider les chercheurs à estimer le degré de sévérité d’une procédure à l’aide de données scientifiquement. Il fournit un moyen d’améliorer l’évaluation du bien-être d’une manière scientifique, axée sur l’animal.
Introduction
L’Union européenne Directive 2010/631 stipule que le principe des 3R (remplacement, réduction, raffinement) développé par Russell et Burch2 doit être appliquée chaque fois que l’expérimentation animale est nécessaire. Le but ultime de la Directive de l’Union européenne doit éliminer progressivement tous les essais sur les animaux, mais la Directive reconnaît que, pour l’instant, quelques expériences sur des animaux sont encore nécessaires pour mener des recherches qui permettra de protéger la santé humaine et animale. Ainsi, si une expérimentation animale ne peut être remplacée par toute autre méthode, seul le nombre minimum d’animaux de laboratoire doit être utilisé pour obtenir des résultats fiables. En outre, le montant de la douleur, la souffrance et la détresse qui accompagnent les procédures expérimentales devrait être minimisé par des mesures appropriées de raffinement. L’Union européenne Directive 2010/63 stipule que la gravité d’une procédure devant être prospectivement qualifiée de non recouvrement, légère, modérée ou grave1. Classification de la gravité est décidé sur une base de cas-par-cas, il est important d’avoir des outils pour estimer la gravité d’une procédure donnée scientifiquement.
Feuilles de pointage tel que proposé par Morton et Griffith3 sont un outil essentiel pour détecter les déviations de l’état normal, y compris les effets négatifs sur le bien-être4. Feuilles de pointage sont utilisés afin de déterminer rétrospectivement la douleur, la souffrance, et la détresse causée par une expérience et de se concentrer sur les changements visibles dans l’état physique de l’animal (p. ex., poids corporel, fourrure, démarche). Même si, à l’annexe VIII de la Directive européenne 2010/63 fournit des exemples de chaque catégorie de gravité, chercheurs des outils manque encore d’estimer le degré de sévérité d’une procédure donnée en utilisant scientifiquement basent données.
L’absence d’indicateurs montrant bien-être négatif n’est pas la seule façon de déterminer l’état de l’animal ; la présence d’indicateurs pointant au bien-être positif est aussi important de5,6,7,8. Par exemple, animaux affiche des comportements de luxe comme fouisseurs et niche bâtiment comportement uniquement lorsque tous leurs besoins essentiels sont satisfaites. Si bien-être est réduite, les comportements de luxe sont les premiers à baisser de5,7. Protocoles à utiliser pour évaluer le bien-être devraient inclure des indicateurs pointant vers physiques, physiologiques et biochimiques et des États psychologiques des animaux afin d’évaluer leur bien-être dans une forme détaillée et complète9.
Dans le cadre du raffinement, un protocole a été développé pour répondre à ces besoins et d’évaluer les effets d’un régime comportant une anesthésie générale sur le bien-être des souris10. Dans le même temps, l’objectif était de minimiser tout stress supplémentaire pour permettre l’intégration facile du protocole dans une expérience donnée. Le protocole estime fouisseurs, comportement, comportement cage maison comme activité, la prise alimentaire et imbrication et le comportement de liées à l’anxiété trait. En outre, il comprend l’échelle souris de la Grimace (MGS) et l’analyse non invasif des métabolites de la corticostérone dans les fèces. Le protocole est conçu pour faciliter l’évaluation du bien-être d’une manière scientifique et axée sur l’animal et à fournir des informations sur le bien-être qui prend en charge la classification du degré de gravité. En plus des feuilles de pointage, il peut fournir des informations utiles pour la classification de la gravité d’une procédure. Que le protocole est facile à réaliser et ne nécessite pas d’équipement vaste, il peut être intégré dans une expérience en cours, sans influencer les résultats d’une étude. Il est à noter que la recherche de l’Animal : Reporting de In Vivo des expériences (arrivée) ligne directrice11 doit être observée dans toutes les études portant sur l’expérimentation animale, dans le but d’améliorer la conception, l’analyse et les rapports.
Protocol
Representative Results
Discussion
Le protocole a été développé pour évaluer le bien-être des souris C57BL/6JRj qui a reçu une seule anesthésie ou anesthésie isoflurane répétées. Les résultats confirment qui teste des comportements de luxe, mais aussi d’autres mesures (par exemple le paradigme exploratoire gratuit, MSG, la prise alimentaire fouisseur) étaient des méthodes sensibles permettant d’évaluer le bien-être. L’anesthésie isoflurane répétés causés des effets à court terme sur le comportement de caractère lié …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Merci à Sabine Jacobs pour aider avec le prélèvement d’échantillons, Edith Klobetz-Rassam pour l’analyse de la FCM, PD Dr méd. vétérinaire. Habil. Roswitha Merle d’aide à l’analyse statistique et Wiebke Gentner pour la relecture du manuscrit. L’étude fait partie de la plate-forme de recherche de Berlin-Brandebourg BB3R (www.bb3r.de) et a été financée par le ministère fédéral allemand de l’éducation et la recherche (numéro de licence : 031A262A) (www.bmbf.de/en/index.html).
Materials
| Isofluran | CP-Pharma Handelsgesellschaft mbH | 1214 | |
| InfraMot – Sensore Units | TSE Systems | 302015-SENS | |
| InfraMot – Control Units | TSE Systems | 302015-C/16 | |
| InfraMot – Software | TSE Systems | 302015-S | |
| Nestlet N | Ancare – Plexx | NES3600 | |
| Camera EOS 350D | Canon |
References
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