Evaluación neuroconductual en un modelo murino de lesión de cerebro hipóxico-isquémica Neonatal
Summary
Se realizó oclusión unilateral de la arteria carótida en día postnatal 7-10 CD-1 ratón cachorros para crear un modelo de (HI) hipóxico-isquémica neonatal e investigó los efectos de la lesión cerebral HI. Estudiamos las funciones neuroconductuales en estos ratones, en comparación con ratones normales no funcionan.
Abstract
Se realizó oclusión unilateral de la arteria carótida en ratones CD-1 para crear un modelo de (HI) hipóxico-isquémica neonatal y se investigaron los efectos de lesión de cerebro de HI neonatal mediante el estudio de las funciones neuroconductuales en estos ratones frente a no funcionar (es decir, ratones normales). Durante el estudio, se utilizó método de arroz-Vannucci para inducir daño de cerebro de HI neonatal en ratones de 7-10 (P7-10) día postnatal. La operación de HI fue realizada en los cachorros por la ligadura unilateral de la arteria carótida y la exposición a la hipoxia (8% O2 y 92% N2 de 90 min). Una semana después de la operación, los cerebros dañados fueron evaluados con el ojo desnudo a través del cráneo semitransparente y se clasificaron en subgrupos basados en la ausencia (grupo “ninguna lesión cortical”) o presencia (grupo de “lesión cortical”) de la lesión cortical, como una lesión en el hemisferio derecho. En la semana 6, se realizaron las siguientes pruebas neuroconductuales para evaluar las funciones cognitivas y motoras: escalera (PAT), tarea de evitación pasiva a prueba y prueba de fuerza de agarre. Estas pruebas conductuales son útiles en la determinación de los efectos de lesión de cerebro de HI neonatal y se utilizan en otros modelos murinos de enfermedades neurodegenerativas. En este estudio, neonatal HI cerebro lesiones los ratones mostraron déficit motor que corresponde a daño del hemisferio derecho. Resultados de la prueba de comportamiento son relevantes a los déficits observados en pacientes humanos de HI neonatales, tales como parálisis cerebral o pacientes con accidente cerebrovascular neonatal. En este estudio, un modelo de ratón de lesión de cerebro de HI neonatal fue había establecido y mostró diferentes grados de déficit motor y deterioro cognitivo en comparación con ratones no operados. Este trabajo proporciona información básica sobre el modelo de ratón de HI. Imágenes de MRI demuestran los fenotipos diferentes, separados según la severidad del daño cerebral por pruebas de motor y cognitivas.
Introduction
Lesión de cerebro de HI neonatal ocurre durante la primera infancia (aproximadamente dos pacientes por cada 1.000 niños)1,2,3,4,5. Estudios sobre lesiones de cerebro de HI neonatal son importantes, y usando un neonatal HI cerebro lesiones ratón modelo establecido puede facilitar en vivo investigación preclínica en lesión de cerebro de HI.
Los modelos HI tradicionales se utilizan en ratas adultas6. Para el modelo del recién nacido, comúnmente se utiliza el método de arroz Vannucci P7 ratas7,8. Sin embargo, puesto que ratas y ratones son ligeramente diferentes de9,10, aunque sean ambos roedores, realizamos un método modificado de arroz Vannucci en CD-1 cachorros en P7-10, basado en estudios anteriores que mostraron que P7-10 es el período con oligodendrocitos inmaduros, correspondiente a humanos término P011,12. El modelo de ratón de HI neonatal se establece a través de tanto la ligadura de la arteria carotídea unilateral y la exposición de los ratones a la hipoxia con oxígeno de 8% en P7-10 cachorros.
Los ratones sometidos al procedimiento mostraron diversos grados de lesiones cerebrales en la zona posterolateral del hemisferio derecho. Para identificar el déficit cognoscitivos y motor, evaluaciones neuroconductuales basadas en el PAT, se realizaron a prueba y prueba de fuerza de agarre de la escalera. Se analizaron las diferencias entre los no operados (es decir, normal) y ratones de HI. Este trabajo presenta información básica sobre el modelo de ratón de HI. Las imágenes de MRI demuestran los fenotipos diferentes, separados según la severidad de daños de cerebro usando las pruebas de motores y cognitivas.
Protocol
Representative Results
Discussion
En este estudio, inducida por la lesión cerebral HI en un ratón P7-10 CD-1 neonatal e identifica la lesión de cerebro con déficit cognitivos y motor correspondientes. Durante este procedimiento, oclusión de la arteria carótida derecho unilateral era crítica. En este paso, la arteria podría ser dañada y rasgada. Cachorros más que experimentado un desgarro de la arteria murieron. Por el contrario, si investigadores habían ligada otra vena de la sangre en lugar de la arteria carótida derecho unilateral, el cereb…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este estudio fue apoyado por subvenciones del National Research Foundation (NRF-2014R1A2A1A11052042; 2015M3A9B4067068), el Ministerio de ciencia y tecnología, República de Corea, Coreano salud tecnología R & D proyecto (HI16C1012), Ministerio de salud y Bienestar, República de Corea y el programa de asistencia de investigación de “Dongwha” Facultad de Facultad de medicina (6-2016-0126) de la Universidad de Yonsei.
Materials
| Hypoxic chamber | Jeung Do Bio & Plant Co | Experimental Builder | |
| PAT apparatus | Jeung Do Bio & Plant Co | Experimental Builder | |
| The ladder rung walking | Jeung Do Bio & Plant Co | Experimental Builder | |
| SDI Grip Strength System | San Diego Instruments Inc. | ||
| Grip-Strength Meter | Ugo Basile | 47200 | |
| Harvard Apparatus Fluovac anesthetizing system | Harvard Apparatus | ||
| Anesthetizing box | acryl box | ||
| I-Fran Liquid (Isofluorane) | Hana Pharm. Co., Ltd. | General Anesthetics ( isoflurane 100ml) | |
| CD-1 mice | Orient Co., Ltd. | ||
| Blue Nylon Mono Non-Absorbbable suture 5-0 50cm | Ailee Co., Ltd. | NB 521 | |
| IBM SPSS Statistics | IBM | Ver. 23 | |
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