大動脈弁移植 - 教則ビデオのマウスモデルでスリーブを用いた

動物を対象とする手順がアーヘン工科大学、アリゾナ州 84 02.04.2012.A234 で承認された機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC). 注: CD1 の背景を持つ成人男性野生型マウスを使用して、手順を説明します。食品、動物用の特殊なコントロールや治療への適切なアクセスを確保し、手術前後の専門研究所単位でマウスを飼うため。動物を購入した場合の手術を行う前に、1 週間を順化外。 1 ドナーの準備 感染症を避けるために手術中に滅菌状態を維持するために滅菌材料・機器を使用します。。 は、ボリューム イソフルランとフェイス マスクを通して酸素を 100% 1.5% の混合物に各マウスを麻酔します。仰臥位とテープでプラットフォーム オペレーティング テーブルにすべての足でマウスを置きます。その反射を確認するには、マウスを十分に麻酔、確かに後部のフィートをつまんでします。プロシージャの間に乾燥を防ぐために目の上眼軟膏を置きます。 脱毛ジェルを使用して腹部からすべての髪を削除または髭剃りを使用します。無菌条件下で操作を実行します。クロルヘキシジンと滅菌水のスクラブを交互に腹部を消毒します。 ハサミやメスで正中線腹部切開を介してドナー大動脈を削除します。右に手動で腸を撤回します。手動で軽くパウダー フリー手袋を使用する側に上腸を反映します。 それを湿った保つため生理食塩水で湿らしたガーゼの部分に腸を配置します。 離れて非常に慎重にピンセットで鈍的切離を使用して周囲の組織から腹部大動脈を解剖します。 ピンセットで腎動脈と上大静脈からの分岐の間に大動脈のセグメントを区切ります。 このセグメントを非常に慎重に 11-0 モノフィラメント縫合を使用のすべての小さな枝を確保します。 大動脈を削除する前に下大静脈にヘパリンの 50 U を含む生理食塩水の溶液 0.5 ミリリットル (mL) を挿入します。 大動脈のセグメントが削除された後の exsanguinate ドナー動物ができます。 生理食塩水を完全にグラフトをすすいで氷冷生理食塩水の容器にすぐに転送します。 2。受信者の準備 ボリューム イソフルランとフェイス マスクを通して酸素を 100% 1.5% の混合物を持つ受信者の動物の麻酔を髪を削除し、(セクション 1) を駆除します。メスと骨盤に、剣から中間線切開を行い、腹部の壁を撤回します。プロシージャの間に乾燥を防ぐために目の上眼軟膏を置きます。 ラップ食塩水内腸ガーゼを湿らせたし、動物に非常にゆっくり転置 ' s 右。 Dissect 高齢者大動脈腎動脈の間無料の近位と遠位のピンセット分岐します。 このセグメントを非常に慎重に 11-0 モノフィラメント縫合を使用のすべての小さな枝を確保します。 6-0 シングル絹縫合糸で大動脈の近位および遠位部分をクランプします。 クランプ間の中間に大動脈を分割し、ルーメン オープンをフラッシュするヘパリン生理食塩水で切口を灌漑します。 は世話を正しく合わせてドナーと受信者 (大動脈の任意のねじれを避けるために 11-0 のモノフィラメントで縫合に続いて受信容器に挿入餌容器端と同所性同種の位置にグラフトを配置します。 図 1) 10. 吻合部の検査を実施した後、合字を慎重に取り外します。まず遠位クランプをリリースします。この方が低気圧が近位部の高圧側を解放する前に、一緒に壁を保持します。 はすぐに移植を灌流し、パルスが見えるを確認してください。絹の残党を慎重に取り外します。ドナーと受信者の大動脈の間最適なラップの長さは 1-2 mm. 腹部の内容を腹腔内に戻り、全体を閉じる実行中 3-0 ポリグ リコール酸縫合糸で巻き。 マウス ブプレノルフィンを与える (0.05 mg/kg 体重の皮下 (SC)) 麻酔を終了する前にします。 放置しないでください動物それが完全に意識するまで。疼痛管理 buprenophine 0.05 mg/kg 体重で療法が SC 術後後 3 日間一日に三回管理機関監督機関による承認。 組織採取、麻酔として受信者のマウスの上記の説明し、4% ホルムアルデヒド/PBS、続いてリン酸緩衝生理食塩水 (PBS) で血管のフラッシュ (pH 7.4 を =) 心臓穿刺によって。グラフトをそっと取り外します。4% ホルムアルデヒド/PBS で一晩固定後プロセス標本はさらに、パラフィンに埋め込む。