In Vivo évaluation quantitative de la structure du myocarde, Fonction, perfusion et la viabilité utilisant la tomographie cardiaque Micro-calculées
Summary
This method outlines the use of Quantum Micro-Computed Tomography (MicroCT) to assess cardiac morphology, function, perfusion, metabolism and viability with iodinated contrast agent in mice with experimentally-induced myocardial ischemia. The technique can be applied for non-destructive high-throughput longitudinal in vivo imaging of various animal models of human heart disease.
Abstract
The use of Micro-Computed Tomography (MicroCT) for in vivo studies of small animals as models of human disease has risen tremendously due to the fact that MicroCT provides quantitative high-resolution three-dimensional (3D) anatomical data non-destructively and longitudinally. Most importantly, with the development of a novel preclinical iodinated contrast agent called eXIA160, functional and metabolic assessment of the heart became possible. However, prior to the advent of commercial MicroCT scanners equipped with X-ray flat-panel detector technology and easy-to-use cardio-respiratory gating, preclinical studies of cardiovascular disease (CVD) in small animals required a MicroCT technologist with advanced skills, and thus were impractical for widespread implementation. The goal of this work is to provide a practical guide to the use of the high-speed Quantum FX MicroCT system for comprehensive determination of myocardial global and regional function along with assessment of myocardial perfusion, metabolism and viability in healthy mice and in a cardiac ischemia mouse model induced by permanent occlusion of the left anterior descending coronary artery (LAD).
Introduction
Cardiopathie ischémique (IHD) continue d'être la principale cause de morbidité et de mortalité pour les hommes et les femmes dans le monde entier 1. En raison de la complexité et les interrelations qui existent entre les organes et systèmes au niveau de organismal, l'utilisation de l'animal entier comme un modèle de l'IHD demeure pertinent non seulement pour notre meilleure compréhension de la physiopathologie de la maladie, mais permettant également l'évaluation de nouvelles stratégies préventives et thérapeutiques . Des modèles de souris, en particulier, ont contribué à notre connaissance du développement cardiaque, la pathogenèse de l'infarctus du myocarde, l'hypertrophie du myocarde, une myocardite, et des lésions anévrismales 2-7. Les paramètres qui déterminent la performance cardiaque et qui sont utiles en termes de pronostic et le choix d'une intervention thérapeutique sont la masse cardiaque et de la géométrie, la fonction mondiale et régionale, la distribution spatiale du flux sanguin myocardique et la viabilité myocardique.
Cependant, la plupart des traditional Méthodes d'enquête utilisées dans des modèles murins de maladies du cœur impliquent mesures invasives qui nécessitent des heures pour l'achèvement, ainsi que l'animal ne peut pas être utilisé pour des mesures répétées, ou de la méthode, il faudra sacrifier des animaux 8-12. Par exemple, pour mesurer la perfusion myocardique régionale, des microsphères marquées par radioactivité ou par fluorescence sont utilisés lorsque comptage radioactif ou des signaux fluorescents sont détectés sur un coeur disséqué physiquement ou in situ 13,14.
De même, l'évaluation de la taille de l'infarctus chez les modèles animaux de l'infarctus du myocarde est le plus souvent réalisée par le chlorure de triphényltétrazolium (TTC) de coloration, et en vue de déterminer l'évolution temporelle de l'évolution de l'infarctus et de l'effet d'interventions thérapeutiques, cette technique exige que les animaux doivent être sacrifié pour le coeur examen histopathologique à divers points dans le temps 15. En tant que tel, non destructives et humaines techniques qui permettraient quantitative et de l'analyse longitudinale de la morphologie cardiaque, la fonction, le métabolisme et la viabilité sont d'une importance primordiale. Dans ce contexte, l'imagerie préclinique est d'une grande pertinence. Parmi les techniques d'imagerie actuellement disponibles imagerie par résonance magnétique (IRM) et l'échographie sont les plus couramment utilisés 16,17,18.
Cependant, et malgré le fait que l'IRM est considérée comme la modalité de référence à la fois dans le travail clinique et préclinique, le coût élevé pour acquérir et maintenir les systèmes d'IRM petits animaux dédiés, ainsi que la complexité de cette technologie pour les utilisateurs non-avancés de fonctionner , font de l'IRM un coût prohibitif pour une utilisation courante. En ce qui concerne l'échocardiographie, il existe des inconvénients importants à la façon dont la fonction cardiaque est mesurée. Les données produites par la plupart des examens échocardiographiques sont en deux dimensions, et afin d'en tirer les volumes, les hypothèses géométriques doivent être faits 19. En outre, une mauvaise repr intra- et inter-observateuroducibility est une autre limitation importante de cette technique. Imagerie par radio-isotopes avec unique tomographie d'émission (SPECT) et la tomographie par émission de positons (PET) sont principalement utilisés pour l'évaluation de la perfusion myocardique et le métabolisme 17,20,21. Toutefois, la résolution spatiale limitée de ces modalités d'imagerie permet l'imagerie cardiaque chez la souris difficiles.
D'autre part, avec l'avènement de la technologie de détecteur à panneau plat qui permet une meilleure sensibilité aux rayons X et plus rapide temps de lecture, l'état actuel de la technique des systèmes de microCT peuvent maintenant fournir cardio-respiratoire fermée en trois dimensions (3D) et à quatre dimensions ( 4D) des images de qualité IRM de qualité. Ils sont les coûts de maintenance pratiquement gratuit et facile à utiliser par les utilisateurs non-avancés. Ainsi, de tels instruments de microCT peuvent être bien adapté pour un examen de routine de petits animaux comme modèles de maladies humaines. Surtout, avec le développement préclinique d'un nouveau produit de contraste iodé, sévaluation fonctionnelle et métabolique imultaneous du cœur est devenu possible 22-24.
Cet agent de contraste contenant une forte concentration d'iode (160 mg / ml), la production de fort contraste sang piscine après son administration par voie intraveineuse permettant l'imagerie in vivo du système vasculaire et les cavités cardiaques. Moins d'une heure après l'administration, une augmentation continue de contraste myocardique associée à son absorption métabolique peut être observée, donc le même agent de contraste peut être utilisé pour l'évaluation de la sidération myocardique et la viabilité.
L'objectif de la technique décrite dans ce manuscrit est de permettre aux chercheurs d'utiliser le système de microCT à grande vitesse avec intrinsèque déclenchement cardio-respiratoire, en conjonction avec le sang-piscine produit de contraste iodé, pour déterminer la fonction globale et régionale du myocarde avec la perfusion myocardique et la viabilité des souris en bonne santé et dans un modèle murin d'ischémie cardiaque induite par une occlusion permanentede l'artère interventriculaire antérieure coronaire (LAD). En utilisant cette technique de formation d'image de modèle et animale, l'évaluation rapide des paramètres cardiaques les plus importantes peut être effectuée de manière répétitive avec une seule modalité d'imagerie et sans la nécessité de procédures invasives ou de la nécessité de sacrifier les animaux. La technique peut être effectuée pour évaluer de nouvelles stratégies préventives et thérapeutiques.
Protocol
Representative Results
Discussion
Au cours des dernières années microCT est devenue la modalité de nombreuses recherches considérées pour la caractérisation de la structure et la fonction cardiaque chez les petits animaux 26-29,30. Toutefois, les instruments utilisés dans le travail préalable a été construit soit personnalisé ou ne sont plus disponibles dans le commerce. En tant que tel, cette étude avait pour but de fournir un protocole simple et complète pour l'utilisation du système de microCT à grande vitesse avec intrinsèque déclenchement cardio-respiratoire pour déterminer la fonction globale et régionale cardiaque ainsi que la perfusion myocardique et la viabilité de petits animaux comme des modèles de cœur humain maladie.
L'une des exigences les plus importantes pour l'étude de la structure et de la fonction cardiaque est la capacité du balayage pour tenir compte des mouvements du coeur physiologiques. A cet effet, l'ECG sur la base des techniques de sélection par porte-prospective et rétrospective peuvent être utilisés. Cependant, prospective (étape et tournage) déclenchement repose sur un intervalle prédéfini du cycle cardiaque, pour examenple pendant la diastole, lorsque le mouvement cardiaque est moins. Avec cette approche, une seule image par cycle cardiaque est obtenu et une seule phase du cycle cardiaque peut être reconstruit. A ce titre, en plus d'être beaucoup de temps pour générer, de façon prospective des reconstructions gated produisent un seul ensemble de données, qui est dépourvu de l'information fonctionnelle. synchronisation rétrospective, d'autre part, permet à la reconstruction de plusieurs ensembles de données à chaque partie du cycle cardiaque, permettant ainsi l'analyse fonctionnelle du ventricule gauche mondiale et régionale.
Le travail actuel employé reconstructions cardiorespiratoires avec synchronisation rétrospective intrinsèque. Synchronisation rétrospective intrinsèque utilise un logiciel basé sur l'image exclusive de reconstruire phases cardiaques fin de diastole et de fin de systole sans avoir besoin de respiratoires dédié et des dispositifs de surveillance cardiaque 29,31,32. Un excellent accord de synchronisation rétrospective rétrospective et extrinsèque ECG dépendant intrinsèque studyila fonction cardiaque ng chez la souris et le rat a été démontrée par Dinkel et al. 29. Pendant ce présent travail, synchronisation rétrospective intrinsèque non seulement minimisé de manière significative le temps nécessaire pour mettre en place la numérisation, mais aussi éliminé la dépendance sur le matériel de surveillance, tels que les dérivations et capteur pneumatique respiratoires, ainsi que les compétences des opérateurs supplémentaires pour mettre correctement en place.
À la suite de la reconstruction, de la qualité des deux ensembles de données de fin de diastole et en fin de systole image a été jugée satisfaisante pour l'analyse cardiaque. Lors de l'examen des images, une attention particulière a été accordée aux artefacts de mouvement qui peuvent survenir au cours d'un niveau insuffisant de l'anesthésie, stries artefacts qui peuvent se produire à la suite de projections manquantes chez les animaux avec des artefacts taux de respiration élevé, faible atténuation qui sont généralement causés par structures osseuses et peuvent imiter défauts de perfusion, et des artefacts les plus cycliques qui peuvent découler d'une mauvaise calibration ou l'échec d'un ou plusieurs détecteur elements.
La capacité de microCT pour produire une information structurale et fonctionnelle cardiaque dépend également de la disponibilité de l'agent de contraste intravasculaire adapté. Plus couramment disponibles dans le commerce contrastes de microCT peuvent être généralement divisées en particules macrophages non métabolisable spécifique et polydisperse contrastes base d'iode-métabolisables 23,33-36. Bien que les agents particulaires offrent une plus grande opacification aux rayons X en raison de leur plus grand nombre atomique (de baryum, Z = 56, et de l'or, Z = 79), ils ne peuvent être utilisés pour l'évaluation du métabolisme. En outre, ces agents sont considérés comme nocifs pour l'organisme et éliminés par les macrophages hépatiques (cellules de Kupffer), les cellules balayage du système réticulo-endothélial (RES). En raison de leur nature non-métabolisable, ces agents provoquent des changements au foie microcirculation concomitante avec 37 lésions hépatiques.
contrastes sur la base d'iode métabolisables, d'autre part, ne sont pas targeTed pour l'enlèvement spécifiques-RES, devrait donc offrir un meilleur profil d'innocuité et d'éviter la toxicité hépatique. En plus de leur meilleur profil de sécurité, ces contrastes sont absorbés par les tissus métaboliquement actives, peuvent donc être utilisés pour l'évaluation de la viabilité 22,23. A cet effet, un agent de contraste iodé a été sélectionnée pour la présente étude. Le contraste a été administré à la dose de 5 ou 10 pi par gramme de poids corporel de l'animal par injection intraveineuse en bolus unique. Bien que les deux doses ont donné des résultats satisfaisants d'amélioration, on a observé une augmentation dose-dépendante du ventricule gauche du myocarde et les niveaux de contraste lors de 10 ul / g de contraste a été injecté. D'intérêt, avec la plus forte dose, la durée de la piscine de sang était prolongée et le pic d'absorption de contraste myocardique a été retardée. Un animal (souris 1) a été suivi pendant 10 semaines après la chirurgie et pendant cette période, il a été imagée toutes les deux semaines. De l'expérience, pas d'effets indésirables liés au contraste (total de 5 àprojections) ou liés à l'exposition aux rayons X (total de 10 balayages de microCT) ont été observés dans cette souris au cours de la période de surveillance. L'un des effets indésirables les plus fréquemment rapportés de l'exposition à l'iode à long terme est la glande thyroïde perturbation qui n'a pas été observé de façon macroscopique sur les examens post-mortem. Mannheim et al. Niveaux de thyroxine étudiés après 3 administrations consécutives de contraste et trouvé aucune différence lorsque les niveaux ont été comparées aux témoins 37. Avec l'utilisation des mêmes ensembles de données microCT, aucun signe de fibrose pulmonaire induite par un rayonnement ont été détectés chez cet animal (données non présentées), conforme à la sécurité de la procédure.
Évaluation de la fonction cardiaque globale et régionale ventriculaire est considéré comme le facteur le plus déterminant de la performance cardiaque et important en termes de pronostic et le choix d'une intervention thérapeutique 38,39. Les indices fonctionnels du ventricule gauche mondiaux incluent à gauche volume de fin de diastole ventriculaire (VTDVG), le volume ventriculaire gauche en fin de systole (LVESV), gauche volume d'éjection systolique ventriculaire (LVSV), gauche fraction d'éjection ventriculaire gauche (FEVG), et le débit cardiaque (CO). études de microCT antérieures ont confirmé que l'évaluation quantitative de la fonction cardiaque globale est réalisable dans des modèles de maladies cardiovasculaires murins et que diminution prononcée de la fonction cardiaque globale a lieu peu de temps après LAD occlusion de l'artère. Ces résultats sont en accord avec les rapports précédents dans cette réduction marquée LVSV, la FEVG, et le CO ont eu lieu déjà au jour 1 après l'occlusion 29,40-43. Il est important de mentionner que la performance fonctionnelle cardiaque dépend du type et le degré de l'anesthésie, donc pour des mesures précises de la fréquence cardiaque lors de l'acquisition de l'image doit être maintenue aussi physiologique que possible 44.
L'évaluation quantitative de la masse ventriculaire gauche du myocarde (de LVMM) est important pour l'évaluation de l'hypertrophie ventriculaire gauche et a été principalement réalisée à l'aide MRJe 11,43,45,46. LVMM est souvent corrigée pour le poids corporel et présenté comme ventriculaire gauche indice de masse myocardique (LVMMI) pour permettre la normalisation de poids cardiaque chez les souris de l'âge et de l'habitus différente. Une estimation précise de ces paramètres est important, comme les souris avec un infarctus du myocarde développer LV importante hypertrophie 47. Évaluation de la géométrie LVMM, LVMMI et LV est également important pour le diagnostic de l'hypertrophie cardiaque et de la dysplasie 11. En tant que tel, la détermination de ces paramètres sera en outre utile pour différencier des conditions telles que l'hypertrophie concentrique, l'hypertrophie excentrique, ou le remodelage concentrique. Dans le présent travail, à la fois LVMM et les valeurs LVMMI ont été déterminées chez des souris soumises à la banque DAL ligature de l'artère et dans l'animal opération fictive. Par la suite, la taille de l'infarctus du myocarde a été identifié et utilisé pour calculer le pourcentage de la taille de l'infarctus. Bien cours de la chirurgie de la ligature de l'artère coronaire LAD est applié au même niveau, l'occlusion généré infarctus avec une certaine variabilité: 13,3%, 15,8% et 22,4% (tableau 1). Une explication possible de cette variabilité peut provenir de différences anatomiques des artères coronaires et leur approvisionnement en sang territoriale entre les animaux, et en accord avec les rapports précédents 48. La façon la plus courante de l'évaluation de la taille de l'infarctus dans un modèle murin d'infarctus du myocarde est par ex vivo Chlorure de triphényl tétrazolium (TTC) coloration, la technique qui ne permettrait pas un suivi longitudinal de la maladie chez le même animal. Dans le cadre de travaux antérieurs par Ashton et al. 22 et de ce présent, il est à noter que microCT conjointement avec produit de contraste iodé peut fournir une méthode alternative et non destructif de détermination de la taille de l'infarctus longitudinalement.
Un avantage supplémentaire de la technique d'microCT réside dans la détermination très précise d'une ischémie régionale. Like chez l'homme la artère coronaire gauche des fentes de la souris dans une artère descendante (LAD) et une branche septale (LCX). Cependant, chez la souris, l'anatomie des Branches latérales de la LAD et LCX diffère considérablement entre les animaux 48. Grandes Branches du LCX parfois parallèles étroitement la LAD et étant donné que les artères coronaires de souris sont intra-myocardique et donc non visible, supports latéraux de la LCX sont parfois accidentellement mais inévitablement inclus dans l'occlusion coronaire au cours de la procédure de souris-infarctus. En tant que tel, le plan polaire circumferentional obtenu après microCT peut être utilisé pour déterminer exactement les artères coronaires ont été bouchés, depuis perfusion et prise de contraste dans les secteurs 2, 3, 8 et 9 sont touchés par le LCX tandis que les secteurs 7, 10, 11, 12 , 13, 15, 16 et 17 sont fournis par la LAD. En conséquence, le plan polaire est d'une grande utilité pour la détermination précise des artères obstruées et facilite donc important dans l'interprétation correcte des effets de la myocainfarctus rdial de la fonction cardiaque et la progression de la maladie.
Le modèle de la souris infarctus myocardique utilisé hautement imite la situation clinique humaine où les vaisseaux coronaires deviennent soudainement occlus à la suite d'une rupture de la plaque aiguë et est en tant que telle d'une grande utilité pour étudier le développement de la maladie du cœur infarci 49. Alors que dans le traitement des pays occidentaux développés des patients souffrant d'un infarctus du myocarde est destiné à rétablir rapidement la recirculation du vaisseau coronaire, à plusieurs reprises, en particulier dans les pays économiquement moins développés, où l'incidence de l'infarctus du myocarde augmente rapidement, l'occlusion ne peut pas être annelées à temps 1,50. Ceci induit dans les grandes infarctus ventriculaires que le plus souvent conduira à une insuffisance cardiaque chronique et sont un fardeau énorme sur la santé publique. Par conséquent, les méthodes de diagnostic non invasifs longitudinales en utilisant un modèle d'infarctus du myocarde avec une occupation permanente de l'artère coronairelusion et une grande myocarde ventriculaire sont d'une grande importance pour développer de nouvelles stratégies de traitement contre cette maladie.
Imagerie de perfusion myocardique CT est une technique en évolution rapide qui permet une évaluation quantitative des coronaires anomalies régionales du flux sanguin et de leur pertinence pour la fonction cardiaque et la viabilité. Les nouvelles petites études sur les animaux ont réduit l'écart entre microCT et SPECT, la modalité de choix pour la perfusion et la viabilité évaluation 22. Dans le but d'évaluer le degré de déficience de la circulation sanguine régionale provoquée par la LAD occlusion de l'artère coronaire, les données de microCT ont également été évalués pour obtenir des informations de la perfusion myocardique. L'artère LAD ligaturé est connu pour fournir l'approvisionnement en sang sur la paroi libre, une partie de la cloison, et dans la région apicale du ventricule gauche. défauts de perfusion myocardique (zones hypoenhanced) de la souris 1 sont présentés dans une polaire système et évidente coordonnée à la mi-antérieure, mi-inférolatérale, mi-antérolatérale, apicaleantérieur et segments latéraux apical, les résultats sont cohérents avec la même distribution coronaire (figure 3). Aucune différence entre les défauts de perfusion dérivées d'images de fin de diastole et en fin de systole a été trouvé dans homosegments. Les perfusion myocardique en fin de diastole et de fin de systole polaires affichages cartographiques de l'animal opération fictive sont présentés dans la figure 4. De légères différences de débit sanguin myocardique entre les segments de l'animal de contrôle ne sont pas significatifs sur les deux représentations de fin de diastole et en fin de systole . Fait intéressant, les domaines de hypoenhancement peut être vu visuellement sur les images de section courts-axiales (figure 1) et peut être facilement quantifiables comme le montre la figure 3. Cela n'a pas été possible dans l'étude de Befeda et al. Et peut être expliquée par plus le bruit de l'instrument utilisé microCT 22. Pour être discerné visuellement, les différences de signaux doivent être au moins trois à cinq fois plus grandeque le bruit (écart-type) dans l'image 51. Faible niveau de bruit de la microCT utilisée dans cette étude a permis la détection d'une petite différence de signal entre le myocarde et une altération normalement perfusé (± 127HU 23HU contre 217HU ± 29HU), ce qui permet une évaluation positive du myocarde défauts de dessin de perfusion.
L'un des principaux avantages de l'utilisation produit de contraste iodé est la capacité d'évaluer la viabilité myocardique et le métabolisme en raison de l'amélioration du myocarde de contraste liés. A notre connaissance, la capacité de renforcer le contraste pour le myocarde a été décrite par Detombe et al. 23 et sa première utilisation pour l'imagerie d'infarctus du myocarde a été rapporté par Ashton et al. 22. Bien que le groupe indiqué que myocarde perfusé chez les souris avec un infarctus du myocarde a montré l'amélioration semblable aux témoins, et que le myocarde infarci a montré aucune amélioration, l'évaluation quantitative de l'infarctus du segment enhancement n'a pas été rapportée. Pour étudier plus avant si l'amélioration du myocarde peut être évaluée quantitativement, toutes les souris ont été réimagés utilisant le même protocole d'imagerie 3 – 4 heures après l'administration de contraste, lorsque l'accessoire par rapport à la cavité myocardique était maximale.
Myocardiques défauts contraste d'absorption ont été observées visuellement sur les images en coupe court axiale en fin de diastole et de fin de systole d'un coeur de souris avec un infarctus du myocarde (Figure 5), mais pas chez l'animal opération fictive (figure 6). Fixation myocardique a été évaluée quantitativement dans chaque segment du myocarde à partir des deux reconstructions de fin de diastole et de fin de systole et présentées dans un système de coordonnées polaires (figure 7 et 8). Les valeurs de homosegmental fin de diastole et de fin de systole obtenues à partir du même animal ne sont pas différents. Cependant, les tracés polaires circonférentielles ont montré des anomalies par segment (Figure 7) avec des motifs semblables à ceux représentés sur les cartes de perfusion myocardique (figure 2). Aucun contraste défauts d'absorption ont été vus sur les tracés polaires périphériques de la souris opération fictive (figure 8). Les données d'absorption du myocarde étaient d'une qualité suffisante pour effectuer une analyse fonctionnelle globale et l'évaluation quantitative de la masse myocardique LV et la taille de l'infarctus (non représenté). Bien que pas pertinent pour le modèle actuellement utilisé avec LAD permanente occlusion de l'artère coronaire, nous croyons que le contraste extraction du myocarde peut être liée non seulement à des modifications dans la circulation régionale sanguin myocardique, mais aussi de l'état des cardiomyocytes (par exemple cicatrices, stupéfait et le myocarde en hibernation) . Pour tester cette hypothèse, les travaux futurs emploiera le modèle avec une ischémie myocardique temporaire et reperfusion.
contraction active des résultats du myocarde en mouvement de la paroi du myocarde et l'épaississement qui servent de marqueurs importants de systolique fonction et la viabilité myocardique. Évaluation du mouvement régional de la paroi, l'épaississement et la fraction d'éjection permet de discerner passive mouvement de la paroi artérielle systolique de la contraction myocardique active. Afin de permettre la quantification normalisée de l'étendue et la gravité de la lésion, mouvement de la paroi, épaississement de la paroi, et les fractions d'éjection régionales sont couramment mappé en cartes polaires. Anomalies du mouvement régional de la paroi ventriculaire sont des marqueurs importants de l'ischémie myocardique qui sont le plus souvent évalués par IRM 52. Le mouvement de la paroi du VG, épaississants et fraction régionale d'éjection scores pour chaque segment d'une souris avec et sans infarctus du myocarde sont présentés à la figure 9 et la figure 10. Comme on s'y attendait, la coronaire ligature de l'artère LAD entraîné une diminution marquée des indices fonctionnels régionaux LV ( Figure 9), alors qu'aucun effet n'a été observé chez la souris subi une opération factice (figure 10). Ces résultats sont en concordance avecdonnées déclarées précédemment.
En conclusion, ce travail a démontré la première utilisation réussie d'un système de microCT haut débit pour la détermination complète de paramètres fonctionnels mondiaux et régionaux du myocarde ainsi que l'évaluation de la perfusion myocardique et la viabilité de bonne santé et dans un modèle murin de l'infarctus du myocarde. Ce travail peut être prolongée vers la caractérisation des autres modèles de la maladie cardiovasculaire, permettant une évaluation précise et non-destructive des changements fonctionnels et physiopathologiques cardiaques, et pour l'évaluation de nouvelles stratégies préventives et thérapeutiques.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par la Stichting Lijf en Leven, projet dilatant contre stenosing maladie artérielle.
Materials
| Quantum FX MicroCT Imaging System | PerkinElmer, Hopkinton, MA, USA | Micro Computed Tomography System | |
| XGI-8 Anesthesia System | PerkinElmer, Hopkinton, MA, USA | Cat. No. 118918 | Gas Anesthesia System |
| Analyze 12.0 Software | Analyze Direct, Overland Park, KS, USA | Visualization and Analysis Software for Imaging | |
| eXIA160 MicroCT Contrast | Binitio Biomedical, Ottawa, ON, CANADA | Cat. No. eXIA160-01; eXIA160-02; eXIA160-03; eXIA160-04; eXIA160-05 | Iodine based Radiocontrast for MicroCT Imaging |
| Isoflurane | Pharmachemie BV, Haarlem, Netherlands |
Cat. No. 45.112.110 | inhalation anesthesia |
| 1/2CC U-100 28G1/2 Insulin Syringe | Becton Dickinson and Company, USA |
Cat. No. 329461 | Insulin syringes with sterile interior |
| Leica microscope type M80 | Leica Microsystems BV, Eindhoven, Netherlands | Stereo zoom microscope |
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