統合された行動ステーション（INBEST）を有するマウス疾患モデルの行動表現型

すべての手順は、マクマスター大学動物管理委員会によって承認され、動物ケアのカナダの協議会が定めたガイドラインに基づいて行われている。 1.一般的な手順既存の12時間の明/暗サイクル（ -午後8時例えば、午前8時）に1〜2週間のマウスを慣らす。 RT、湿度、光強度が比較的一定であることで、暗サイクル中にすべての手順やテストを実行します。 マークまたはテールタトゥー全て長期間にわたって簡単​​に、数値識別のためのマウスと5-7日間で1〜2時間、毎日それらを扱う。 直腸温、体重および食物/水摂取の毎日の反復測定は、加齢や病気の進行によって誘発される潜在的な発熱および/または栄養不良を検出する。標準の除外基準は減少による食料/水の摂取、フリル毛皮、水頭症と猫背の姿勢、目の周りのポルフィリン放電などに低体重が含ま identifへそのような反射13を留め後肢などの標準的な感覚テスト、視覚的な配置レフ14を実行し、全体的な活動とパフォーマンスを混乱させる可能性Y神経学的欠損は、テスト15、バスケットテスト16、ビーム歩行試験17-19、ロータロッド20、および嗅覚テストを走地21。 注：結果はまたINBEST対策、他の方法（ 例えば 、モリス水迷路マウスはマウスがhyposmic / anosmicである場合ブラインド、新規物体テストの場合）、群内変動の減少は、とのより慎重に選択して相関分析に役立つ可能性出生赤字または感染によるマウスの除外。 交互に、実験群と対照群のマウスのテスト中に尿中のトレイルを削除するには消毒剤でプラスチックやガラス装置を清掃してください。 2.統合行動駅（INBEST）手順セットアップホームケージ食料ディスペンサを埋める20 mgのマウス飼料ペレットとS。 水道水でボトルを埋める。 注：第二のボトルは、スクロースまたは嗜好テスト用のサッカリン溶液として、関心の溶液で満たすことができる。 セッションの終了時に消費される量を計算するためにボトルを秤量する。 lickometersにボトルの注ぎ口を挿入します。ノズルは赤外線センサーをブロックしないことを確認してください。それがない場合には、注ぎ口の長さを短くする。 家庭ケージの選択された隅に避難所を置きます。 コンピュータのセットアップ注：ステップ2.2-2.11で提供されるソフトウェアコマンドが、私たちの研究室での試験条件（材料/機器のリストで指定）Ethovision XT 8.5ソフトウェアパッケージに関連しています。 ビデオ追跡のために十分であるが、箱、床や壁をオフに反映していないびまん性、薄暗い光で部屋を照らす。 デフォルトのビデオ追跡プロジェクトを開き、キーイングにより、実験設定をセットアップ関連する詳細情報（ 例えば 、日付/研究、グループ割り当て、室内条件などの時間）。その後、点（中央、、nose-とテールポイント）、および測定単位（センチメートル、秒、および度）を追跡し、適切なビデオソース（のPicolo勤勉グラバー）、アリーナ（4）の数を選択します。 セットアップの審判リスト]タブを選択した後、追加試験ボタン（1）をクリックすることで試行回数を定義します。次に、[変数の追加]ボタンを使用して、独立変数（ 例えば 、マウスのID、性別、グループ割り当て、ひずみ）を指定します。 アリーナ[設定]タブをクリックし、ライブビデオから背景画像をキャプチャします。 （そのような長方形/ポリライン/楕円を作成するなど）は、適切な描画ツールを使用して外周を概説して、個々のアリーナのパラメータを定義します。 次に、（ 例えば 、床、lickometers、食品ディスペンサー、登山メッシュを追加ゾーングループ]ボタンをクリックして、様々なゾーンを概説することによって関心のあるゾーンを追加<e同一の態様におけるm>など）。隠されたゾーングループの追加]ボタンをクリックすることで、マウスが見ることができない地域のために隠されたゾーン（ 例えば 、避難所とランニングホイール、 図2）を追加します。入口/出口が指定されており、それぞれの隠されたゾーンにリンクされていることを確認してください。 繰り返しますが、各競技場のための2.4から2.5を繰り返します。キャリブレーションを強調表示し、アリーナの幅と長さを提供するために、適切なツール（校正スケール/ Axesを作成）を使用して、アリーナのキャリブレーションを実行します。最後に、検証アリーナ[設定]ボタンをクリックして、アリーナの設定を検証。 試用コントロール設定]タブをハイライトし、開始/停止条件と裁判長を指定。中心点の期間はアリーナで1秒を超えたときに開始するために開始条件を設定してください。停止条件ボックスを拡大し、そのような10時間として、遅延の後に終了するトライアルを設定することで、試用期間を操作します。 検出の設定]タブの下で、適切な検出方法（ 例えばを強調動的減算およびモデルベース）。 次に、検出]タブの[設定]ボタンをクリックして、グラブ現在のボタンを押して、空のアリーナの参照画像をつかむ。 各マウスの中心地、ノーズとテールベースの​​検出は、信頼できる正確かつ連続していることを、コントラストの範囲を調整します。アルビノマウスの場合は、着色された菌株を使用している場合、マウスが背景よりも明るく、背景よりも暗いことを指定する。 注：被写体サイズ及びビデオ·サ ​​ンプル·レートは、オーバーヘッドカメラと被写体との距離、ならびに使用されるPC（ 例えば、14.9フレーム/秒）の処理速度に応じて変更することができる。 すべての変更が検出設定モジュールを終了する前に保存されていることを確認します。 ジに（ 例えば、赤外線ビームの遮断、走行輪等の移動）は、入力装置から記録されているアナログ·イベントを変換するための責任があるインターフェース装置をオンgitalログ。 データ集録注：以下のソフトウェアコマンドは、セッションパラメータ（ 例えば 、10時間の試用期間、マウスのID、グループ割り当てなど ）のステップバイステップの入力を提供するカスタムメイドメッドPC IVルーチン（「ウィザード」）に関連している。 割り当てられたボックスに各マウスを置きます。 同時に 'レコード」のボタンを押すことでビデオ – とイベント追跡のパッケージを同期させます。 静かに実験室のままにしておきます。 記録期間が経過すると（ 例えば 、数時間、日、または週）は、マウスを削除し、彼らのホーム·ケージに戻す。 （ハードドライブ、ポータブルUSBスティック、DVD）ボトルの重みを測定し、デジタルメディア上のすべてのデジタル録音を保存します。 スプレッドシートに生データを転送します。 まれな行動の行為（ 例えば 、常、発作）のその後のスコアリングのためにMPGファイルを保存します。