JoVE Journal > Environment
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Results
Discussion
Disclosures
Acknowledgements
Materials
References
Türkçe

Automatically Generated
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.
Environment

Ağaç Dokuların içinde eklembacaklı ve Mikrobiyal Toplulukları incelenmesi için Tekniği

Published: November 16, 2014
doi:
10.3791/50793
, , , ,
1School of Forestry,Northern Arizona University, 2Acoustic Ecology Institute

Summary

We provide a technique to preserve intact tree phloem and prepare it for observation. We create an apparatus called a phloem sandwich that allows for the introduction and observation of arthropods, microbes, and other organisms that inhabit phloem tissues.

Abstract

Phloem tissues of pine are habitats for many thousands of organisms. Arthropods and microbes use phloem and cambium tissues to seek mates, lay eggs, rear young, feed, or hide from natural enemies or harsh environmental conditions outside of the tree. Organisms that persist within the phloem habitat are difficult to observe given their location under bark. We provide a technique to preserve intact phloem and prepare it for experimentation with invertebrates and microorganisms. The apparatus is called a ‘phloem sandwich’ and allows for the introduction and observation of arthropods, microbes, and other organisms. This technique has resulted in a better understanding of the feeding behaviors, life-history traits, reproduction, development, and interactions of organisms within tree phloem. The strengths of this technique include the use of inexpensive materials, variability in sandwich size, flexibility to re-open the sandwich or introduce multiple organisms through drilled holes, and the preservation and maintenance of phloem integrity. The phloem sandwich is an excellent educational tool for scientific discovery in both K-12 science courses and university research laboratories.

Introduction

Kozalaklı floem ve kabuğu dokular organizmaların binlerce ev sahibi vardır. Phloeophagy, iç kabuklarından floem dokularında beslenme, genellikle ağaçlar içinde yaşayan kabuk böceklerinin, woodborers, ve diğer birçok omurgasız ve mikrobiyal takson ile ilişkili bir alışkanlıktır 23 Kabuk böcekleri. (Coleoptera: Curculionidae) geliştirmek ve dışında floem içinde yaşayan yetişkinler yeni ev sahibi ağaçları amaçlayan kısa dönemleri. 31 Kabuk böcekleri yoğun ağaçların 18,19 üzerindeki ekonomik etkileri nedeniyle çalışılmıştır, ancak ağaç malzemelerin içinde böceklerin doğrudan davranışsal gözlemler sınırlı olmuştur. 4 Ayrıca, galerileri kabuk böceklerinin tarafından inşa . türlerin sayısız habitat haline mantarların 30 11 Geniş numaraları, bakteriler 3, akarlar 10,21, ve nematodlar diğer yırtıcı ve parazit eklembacaklılar ile birlikte 16,19 22,24 floem malzemeyi yaşamaktadır. Burada sağlanan tekniklerikabuk böcekleri, akarları ve tipik subkortikal ortamlarda yaşayan ahşap deliciler doğrudan gözlem için izin verir. Protokole hafif değişiklikler mantarlar ve bakteriler çalışma yapılabilir.

Ağaç dokular içinde Kabuk böcekleri ve ilişkili organizmalar kullanılarak çalışılmıştır "floem sandviç." Bu tekniğin erken kullanımı Dendroctunus (arka yüzünde Douglas-köknar böceğinin larva dönemi gözlemlemek için kullanılan 1933, için edebiyat kalma bulunabilir farklı malzemeler kullanılabilir hale olarak pseudotsugae). 2 floem sandviç birçok derivasyon geçti. Başlangıçta, bu cihaz, elastik bantlar ile birbirine bastırıldığı iki cam levha arasına yerleştirilen ve floem bir parça oluşturmaktadır. 2. Daha sonra, kelepçeler, bant, yapıştırıcı, plastik ve diğer malzemeler sandviçin yapımında kullanılmıştır. 13,14 Burada anlatılan 15,17,26,28 protokol geçmiş tasarımları üzerinde bazı iyileştirmeler sunuyor. Örneğin, içindeGeçmişte, test türü cam veya plastik levhaları arasında, sandviç yan alındı. Bu bir yöne galerilerinin yapımını kısıtlı. Üst plakasında giriş deliklerinin kullanımı test türü doğal galeri inşaatı başlatmak için büyük bir özgürlük sağlar. Sunulan protokol diğer bir avantajı kolay bir kaç araç ile imal edilebilir, basitleştirilmiş bir tasarımdır. Floem sandviç kullanımı beslenme davranışı, üreme, gelişme doğrudan gözlem için izin verdi, ve organizmaların etkileşimleri aksi mümkün olmazdı ki. 1,5, 22 Bu yöntem aynı zamanda K-12 eğitim ve bilim için mükemmel bir araçtır programlar ve görüntüler.

Dan yorumlamak zor ya da el yazmalarının rapor değil floem sandviç yaratılması birçok incelikleri vardır. Bir floem sandviç üretiminin görsel (örneğin, bir video) tanımı gereklidir ve olacağına inanıyoruzbilim adamları ve phloeophagous organizmaları okuyan ilgilenen eğitimciler için değerli. Bizim protokol eklembacaklılar, mikrop ve floem dokuların yaşayan diğer organizmaları gözlemlemek için basit ve ucuz bir yol sağlar.

Protocol

1. Phleom Seçimi ve Ağacından Kaldırma Belirli özelliklere sahip bir ağaç seçin. Çam dan Phleom toplayın (yani, cinsi Pinus ağaçlar) onlar birkaç milimetre kalınlığında farklı bir floem tabakası. 18,27 bir ağaç tespit edildikten sonra örneğin böcek saldırıları gibi başka herhangi bir kusurları olmadığını kontrol edin, birkaç alt dalları vardır var gibi ve / veya bir patojen görülmüyordu. Alternatif olarak, bu floem sandviç ladin ağaçlarına gibi kozalaklı ağaçlardan floem kullanımı. 9. diğer ağaç türleri gibi sert ağaç gibi floem çıkarılması için uygun olabilir. NOT: Büyük kronlar ile iğne yapraklı ağaçlar genellikle kalın floem dokusu var. Floem miktarını maksimize etmek için, bu gövde (bole) üzerine birkaç kusurları ve şubeleri var ağaçları kesmek en iyisidir. En iyi öz-budama çalışması olan çam türleri. Floem, tipik olarak, büyüme mevsimi boyunca kalın ve yere yakın gövdelerinde daha yukarı kalındır. Phleom remov bazen zordursonbahar ya da kış mevsiminde ağaçlardan e. Aşağı bir ağaç kesmek veya floem dokusu elde etmek için yeni kesilmiş günlükleri kullanın. Ağaca zarar yanı sıra yakındaki ağaçları minimize edecek bir düşme yönünü seçin. Gövde kapalı kesim şube floem çıkarılması sırasında kabuğu materyallere daha kolay erişimi için. Bir ağaç kesildiğinde (kesilen, yere düştü) keskin bir beraberlik bıçak (. Şekil 1A) ile gövde kapalı kabuğu kazıma başlar. Floem tabakası ulaşana kadar kapalı kabuğu bir alanı kazıyın. NOT: dış kabuğu rengi (. Şekil 1B) kuru ve koyu ise floem tabakası, tipik renk (örneğin, krem rengi) ve nemli hafiftir. Floeme kazımak için değil özel özen gösterin. Kabuklardan alan gereklidir floem birim (ler) büyüklüğüne bağlıdır kazındı. Kabuğu kaldırıldıktan sonra, keskin bir bıçakla floem parçasının bir taslak kesti. Bıçak tüm yol ksilem (Şekil. 2A) keser emin olun. Floem kaldırmak için dikkatlice floeme geri soymak için parmaklarınızı kullanarak floem parçasının bir köşesinde başlar. Ksilem kapalı floem kazıma yardımcı olmak için bir bıçak kullanın. Tüm parça kaldırılıncaya kadar floeme çekerek devam edin. NOT: Phleom genellikle yaz aylarında kolay ağacın soyulmaktadir. Kaldırmak son derece zordur floeme için bir spatula şeklinde aracı çaba yardımcı olabilir. Steril bir torbaya hemen floem parça yerleştirin. En iyi sonuçlar için, vakum ziploc çanta kullanıyorsanız, çanta tüm havayı kaldırmak, çanta (Şekil. 2B) mühür veya. Bu, floem ömrünü artırmaktadır. İsteğe bağlı olarak, bir torba içinde floem çoklu parçalar yerleştirin. Biraz tazeliğini korumak için (1 ve 10C arasında) donma yukarıdaki hava sızdırmaz torbalarda saklayın floem. 2. Phleom Sandwich oluşturma Berrak akrilik, polikarbonat veya benzeri sert, saydam bir malzeme (örneğin, cam) biraz büyük iki eşit parçaya kesilirfloem birim (Şek. 2C) daha r. Akrilik yuvarlak kenarları Parafilm mührü kopmasını köşeleri önlemek için. Bu protokol. Kalınlığında şeffaf akrilik bir 1/8 kullanır. Not: kesilmiş parçaların boyutu konusu organizmanın ihtiyaç ve çalışma uzunluğuna bağlıdır. Örneğin, kabuk böceklerinin bir çifti aylık dönemde floem 4 dm 2 kullanır, ancak çalışma birkaç gün içinde yer alırsa sadece 1 dm2 gerekir. Çalışma organizma (lar) girişine izin akrilik parçalarından biri bir delik delin. Deliklerin büyüklüğü ve sayısı, hedefler (Şek. 2D) bağlıdır. Akrilik parçaları arasındaki floeme yerleştirmeden önce, akrilik yüzey (>% 70 etanol) sterilize veya yeni akrilik kullanıyorsanız, folyoyu çıkarın. Steril akrilik parçaları arasındaki floem taze parça yerleştirin. Floem iç veya dış yanı üzerindeki delik (ler), Orient akrilik parçası whichever gereklidir. Tipik olarak, giriş ağzına doğru floem (üzerinde kabuğu vardı taraf) dış yan yüz. 3. Phleom Sandwich Sızdırmazlık Floem sandviç etrafında geçici bir mühür oluşturmak için, içinde 2 kullanın. Floem sandviç (Res. 2C) kenarlarında çekti geniş Parafilm şeritler. Alternatif olarak, kenarları sızdırmazlık için bir poliviniliden klorür kaydırmak. 6. Daha sonra, floem için akrilik sıkılması için sandviç her bir tarafında bir kelepçe yerleştirin. Tüm yüzeyi akrilik ve floem (Şekil 2C) arasında hava boşluğu önlemek için aşağı kenetlenmiş olduğundan emin olun. Düzgün kenetlenmiş değil, örnekler akrilik ve floem arasında hareket edebilir. Yarı-kalıcı mühür floem etrafında olmayan bir yapıştırma epoksi veya vazelin eklemek oluşturmak için. Materyal tamamen floeme çevreleyen emin olun. Sonra, cıvata ile kelepçeleri veya vidaları kullanın floem sıkı akrilik tutmak için (vaktinden delmenizi gerekebilir).Sandviç, yalnızca en fazla bir ya da iki ay için geçerli kalır. Çalışma organizmaların oksijen ihtiyaçlarına bağlı olarak, sandviç bir veya daha fazla tarafında bir hava filtresi ekleyin. Bu hava floem sandviç içine girmek ancak floem su kaybını sınırlamak için izin verecektir. Biz de mantar ve bakteriyel kontaminasyon riskini azaltmak basit kömür filtreleri kullanın. Irade giriş ve çıkış gerektiren çalışma örneklerinde, bir böcek içine delik odun veya benzeri malzeme ile akrilik parçalarından birini değiştirin. Larva devlet floem tabakası tamamlanmış bu ahşap deliciler gözlem için özellikle önemlidir, çünkü sonra, daha sonra ksilem içine taşıyordu. Giriş delikleri çıkmadan test denekleri önlemek için, delikleri üzerinde küçük petri yemekler (veya diğer nesneleri, bant), engelleme kaçış yerleştirin. Bu mekanlarda ikamet organizmalar düşük ışık seviyelerinde alıştırmak olduğundan, karanlık bir odada veya kutu veya yer o da sandviç yerleştirmek için gerekli olabilirüstüne paque malzeme ışığı engellemek için. Phleom Sandwich 4. Gözlem organizmalar Floem sandviç (Şekil. 2B) girişi deliğe çalışma örneklerini tanıtmak. Kırmızı ışık veya düşük ayarda (Res. 2E) ayarlanmış beyaz ışık altında bir diseksiyon mikroskobu kullanılarak örneklerini görmek. Floem Sandviç içinde örneklerin faaliyetleri veya büyüme kaydetmek için mikroskop bir kamera veya video kamera takın. Mikroskop merceğine (Res. 2E & F) özel video kameralar takın. Kene, nematod ve Yalancı gibi çok küçük organizmalar için, mikroskop bağlı bir yüksek çözünürlüklü video kamera kullanın. Sesleri kaydetmek için, floem sandviç giriş deliğine veya floem sandviç tarafında aracılığıyla mikrofonları yerleştirin. Giriş deliği küçük olduğundan, böyle bir dielektrik kondansatör mikrofon gibi küçük bir mikrofon kullanın. Yan yüzeyden ve kaydetmek içinfloem sandviç bir piezo elemanı (Şekil. 3B) kullanın. Sesi oynatmak için, aynı piezo elemanı kullanın veya akrilik üst veya alt yüzeyine bir dokunsal transdüser (excitor) ekleyin.

Representative Results

Yukarıda açıklanan protokol, bir ağacın kabuğundan altında şifreli bir ortamda yaşamak organizmaları gözlemlemek için bir araştırmacı sağlayacaktır. Bu deneyde bu tekniği. 12 kullanır bizim laboratuvarından bir temsilci çalışma açıklayan bu tekniğin kullanımını göstermek için, floem sandviç (Şek üreme çıkışı, tünel mesafesi ve kabuk böceklerinin sağkalım üzerine akustik tedavilerin etkilerini gözlemlemek için kullanıldı . Şekiller 2E ve 2F). Floem sandviç kullanımı ile mümkün böcekleri doğrudan gözlem, birkaç ilginç bulgular ortaya çıkarmıştır. İlk olarak, bir işaretleyici her 24 saat ile akrilik böcekleri 'yerini işaretleme günlük tünel mesafeleri kaydedildi. Bu süreç floem sandviç olmadan gizli olurdu ses tedavilerde anlamlı farklılıklar ortaya. Sonra, özel bir ses uygulamaları ile yumurta üretiminde bir azalma gözlemlemişlerdir. E izin floem sandviç mobil doğasıgg gözlemler böcekleri bozmadan bir mikroskop altında tamamlanacak. Bu gözlemler esnasında, biz mikroskop bağlı bir yüksek çözünürlüklü kamera ile böceği yumurtlama davranışı ele geçirdi. Diğer önemli gözlemler arkadaşları öldürülmesi ve özellikle akustik tedavileri ile ilişkili uçuş başlatılmasını dahil. Floem sandviç tahlil akustik tedavilere kabukböcekleri yanıtların bizim çalışmamızda çok önemliydi. Bir ağacın kabuğu altında gözlemlemek imkansız olurdu Bu keşifler, kabuk böceği salgınını mücadele için yönetim seçeneklerini geliştirmeye değerli katkıları vardır. Şekil 1. A) Araçlar ağacının kabuğunu çıkarmak gerekiyordu. Ürünler 1 ve 2 ağacın kapalı kabuğu kazımak için kullanılan beraberlik bıçaklar vardır. Ürün 3 (balta) ve 4 (çekme testere) şube kaldırmak için yararlıdıryakın tıraş alanı. B) beraberlik bıçakların kullanımı ağacının kabuğunu çıkarmak için. Kırmızımsı kabuğu altında floem ışık rengini dikkat edin. Şekil 2. A) kabuğundan sonra floem çıkarılması ağacı. B) vakum mühürlü torba. C) kelepçeler birlikte akrilik parçaları tutan ve Parafilm etrafında kirlenmeyi ve floem kuruma önlemek için kenarları ile Phleom sandviç saklanan Taze floem kazındı. D ) Bark böceği yakın delik floem sandviç gözlemlemek için mikroskobu kullanarak) akrilik. E içine delinmiş. floem Sandviç içinde kabuk böceklerinin F) Video ekranı. Şekil 3. <strong> A) floem sandviç böcekleri Feromon edinimi. Hava floem Sandviç içinde çam böcekleri bir piezo-elektrik transdüser (resmin merkezi) aracılığıyla Süper-Q emici. B) Kayıt ve ses oynatmayı içeren tüpler aracılığıyla çekti ediliyor.

Discussion

Floem sandviç eklembacaklılar, mikrop ve floem dokuların yaşayan diğer küçük organizmaların giriş ve gözlem için izin verir. Bu teknik, yeni keşifler sonuçlandı 1,7,8,9,17,18 ve davranışları daha iyi bir anlayış, yaşamı tarih özellikleri, gelişimi ve ağaç floem içinde organizmaların etkileşimleri. sandviç protokolü Burada anlatılan 1,5,10 geçmiş tasarımları bir melez olduğunu ve kolayca minimum ekipman ve malzeme ile inşa edilen bir ekonomik sandviç sağlayacaktır. Cam, akrilik veya polikarbonat parçaları yeniden kullanılabilir ve tek tüketim maddeleri Parafilm ve floem bulunmaktadır.

Protokoldeki tüm adımlar önemli olmakla birlikte, bazı adımlar başarı yüksek derecede sağlamak için sıkı takip edilmelidir. İlk olarak, bir ağaç dalları, serbest ya da görece serbest dalının bir bölüme sahip olduğu yerleştirilmelidir. Birçok şubesi var Ağaçlar tıraş zor ve y olacakfloeme çıkartırken her dal etrafında kesmek gerekir gibi ield birkaç canlı floem adet. Daha sonra, floem hava maruz kalmasını en aza indirmek için önemlidir. Biz hızlı uzaklaştırılması üzerine bir torba içinde her floem parça yerleştirin. 3-6 adet yok olduktan sonra, bir vakumlu torba içine transfer edilir; Biz alanda bir araç aküsünden kapalı mühürleyen çalıştırmak için bir güç çevirici kullanın. Son bu protokolü yürütülmesi sandviç mantar üremesini azaltacak zaman akrilik parçaları ve genel temizlik hijyen. Bu genişletilmiş gözlemler için özellikle önemlidir.

Yukarıda zikredildiği gibi, floem sandviç tertibatının sınırlamalar vardır. Floem katmanlı ince olduğu için, tipik haliyle, floem kalır sadece küçük organizmalar sandviç içine sokulabilir. Odun deliciler gibi büyük böcekler (yani, Buprestid, Cerambycid tür) tanıttı ve onların yaşam döngüsünün erken safhalarında için görülebilir. Bu zaman aralığı, genellikle ikiye sınırlıdırÜç hafta; Bu noktadan sonra larvalar pupa için içine sıkmak ksilem ahşap gerektirir. Buna karşılık, cins Ips özellikle bu kabuk böcekleri için, tam bir yaşam döngüsü görülmektedir dahil edilebilir bir yetişkin böceği içine çiftleşme, yumurtadan çıkan yavrular, beslenme, pupa ve eclosion. Bu noktada sandviçin canlılığı, genellikle desikasyonu ve mantar büyümesi nedeniyle dışarı atılır. 28 Ek olarak, bu cihazın, böcekler açık ve doğal kolonize veya floem sandviç çıkmak için izin vermez. 27

Bizim protokol boyut, şekil ve kullanılan floem türü açısından esnektir. Kısa çalışmalar az floem malzeme gerektiren ve sandviç boyutu buna göre ölçeklendirilebilir. Birçok kozalaklı türler floem sandviç floem vericisi olarak kullanılmaktadır (örneğin, kızılçam çam 12, Douglas-köknar 2, ladin, 29 loblolly çam 27, longleaf çam 27). Sandviç malzemeler de değişmiş olabilir; exgeniş bir cam tabak yerine, akrilik ve epoksi ya da bunun yerine Parafilm bant kullanılabilir.

Bu protokolün en zor kısmı floem giderilmesi işlemidir. Birbirlerinin yanında ağaçlar floem kaldırmak ne kadar zor farklılık gösterebilir. Bir ağaç zor floem sahip olduğunda, sabır önemlidir. Bu durumlarda, dikkatli sert ksilem ve süngerimsi floem arasında bir bıçak çalıştırın. Bu işlem ağacını zarını gibi tam anlamıyla hissediyor.

Temel sandviç tekniği mastering sonra, protokole değişiklikler uygun özel ihtiyaçlarına yardımcı olabilir. Örneğin, floem bertaraf edilmesi için gereken teknikleri üzerinde durulacaktır göre, daha büyük parçalar uzaklaştırılmıştır ve daha büyük sandviç oluşturmak için de kullanılabilir. Ayrıca, değişiklikler kimyasal emisyonları (Res. 3A), ya da kayıt veya oynatma sesleri (Res. 3B) izlemek için, örneğin özel araçlar, ek delik karşılamak için yapılabilir. Değişiklikler, yarı kalıcı floem korunması ve organının sağlamak için yapılabilirizm, ya da daha sonra ücretsiz izin organizma geçici gözlemleri için.

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

We thank Eli Jensen, Stefano Padilla, and Kasey Yturralde for assistance, and Karen London and anonymous reviewers of the manuscript. We thank Jake Baker and Karla Torres for video footage. Funding was provided to R.W.H by the NAU School of Forestry and NAU Technology and Research Initiative Fund (TRIF).

Materials

Draw blade Big Horn Brand  20265 11” blade
Fillet Knife American Angler 30530 9” blade
Polycarbonate Nexan GE-33 0.093 in. thickness
Parafilm M Fisher Scientific S37441 2” wide
Clamps Pony Jaw Opening 3201-HT-K 4” x 1”
Vacuum Sealer  FoodSaver V2840,  VacLoc vacuum 
and bags FSFSBF0742-015 bags in rolls
DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Aukema, B. H., Raffa, K. F. Behavior of adult and larval Platysoma cylindrical. (Coleoptera: Histeridae) and larval Medetera bistriata. (Diptera: Dolichopodidae) during subcortical predation of Ips pini (Coleoptera: Scolytidae). J Insect Behav. 17, 115-128 (2004).
  2. Bedard, W. D. The number of larval instars and the appropriate length of the larval stadia of Dendroctonus pseudotsugae. Hopk., with a method for their determination in relation to other bark beetle. J Econ Entomol. 26, 128-134 (1933).
  3. Bridges, J. R. Nitrogen-fixing bacteria associated with bark beetles. Microb Ecol. 7, 131-137 (1981).
  4. Cardoza, Y. J., Klepzig, K. D., Raffa, K. F. Bacteria in oral secretions of an endophytic insect inhibit antagonistic fungi. Ecol Entomol. 31, 636-635 (2006).
  5. Cardoza, Y. J., Moser, J. C., Klepzig, K. D., Raffa, K. F. Multipartite symbioses among fungi, mites, nematodes, and the spruce beetle, Dendroctonus rufipennis. Environ Entomol. 37, 956-963 (2008).
  6. Chen, H. -. F., Salcedo, C., Sun, J. -. H. Male mate choice by chemical cues leads to higher reproductive success in a bark beetle. Animal Behavior. 83, 421-427 (2012).
  7. Dodds, K. J., Graber, C., Stephen, F. M. Facultative intra guild predation by larval Cerambycidae (Coleoptera) on bark beetle larvae (Coleoptera: Scolytidae). Environmental Entomology. 30, 17-22 (2001).
  8. Franklin, R. T. A technique for studying the insect parasites of Dendroctonus frontalis. and other bark beetles (Coleoptera: Scolytidae). Journal of Georgia Entomology Society. 2, 43-44 (1967).
  9. Gries, G., Pierce, H. D., Lindgren, B. S., Borden, J. H. New techniques for capturing and analyzing semiochemicals for Scolytid beetles (Coleoptera: Scolytidae). J Econ Entomol. 81, 1715-1720 (1988).
  10. Hofstetter, R. W., Moser, J. C., McGuire, R. Observations of the mite Schizosthetus lyriformis. (Acari: Parasitidae) preying on bark beetle eggs and larvae. Entomology. News. 120, 397-400 (2009).
  11. Hofstetter, R. W., Klepzig, K. D., Coulson, R. Chapter 11: Mutualists and Phoronts of the Southern Pine Beetle. United States Dept. of Agriculture Forest Service, Southern Research Station General Technical Report SRS-140. , 161-181 (2011).
  12. Hofstetter, R. W., Dunn, D. D., McGuire, R., Potter, K. A. Using acoustic technology to reduce bark beetle reproduction). Pest Manag Sci. 70, 24-27 (2014).
  13. Hopping, G. R. Techniques for rearing Ips. De Geer (Coleoptera: Scolytidae). Can Entomol. 93, 1050-1063 (1961).
  14. Hougardy, E., Gregoire, J. -. C. Cleptoparasitism increases the host finding ability of a polyphagous parasitoid species, Rhopalicus tutela (Hymenoptera: Pteromalidae). Behav Ecol Sociobiol. 55, 184-189 (2003).
  15. Kaston, B. J., Riggs, D. S. Studies on the larvae of the native elm bark beetle. J Econ Entomol. 30, 98-108 (1937).
  16. Kinn, D. N. Life cycle of Dendrolaelaps neodisetus. (Mesostigmata: Digamasellidae), a nematophagous mite associated with pine bark beetles (Coleoptera: Scolytidae). Environ Entomol. 13, 1141-1144 (1984).
  17. Kinn, D. N., Miller, M. C. A phloem sandwich unit for observing bark beetles, associated predators, and parasites. USDA FS Res. Notes SO-269. , 3 (1981).
  18. Lieutier, F., Day, K. R., Battisti, A., Gregoire, J. -. C., Evans, H. F. . Bark and wood boring insects in living trees in Europe, a synthesis. , 569 (2004).
  19. Massey, C. L. The influence of nematode parasites and associates on bark beetles in the United States. Bulletin of the Entomology Society of America. 12, 384-386 (1966).
  20. Moser, J. C., Roton, L. M. Mites associated with southern pine bark beetles in. Allen Parish, Louisiana. Can Entomol. 103, 1775-1798 (1971).
  21. Mills, N. J. The natural enemies of scolytids infesting conifer bark in Europe in relation to the biological control of Dendroctonus. spp in Canada. Biocontrol News Information. 4, 305-328 (1983).
  22. Nagel, W. P., Fitzgerald, T. D. Medetera aldrichii. larval feeding behavior and prey consumption [Dipt.: Dolichopodidae]. Entomophaga. 20, 121-127 (1975).
  23. Paine, T., Raffa, K., Harrington, T. Interactions among scolytid bark beetles, their associated fungi, and live host conifers. Annu Rev Entomol. 42, 179-206 (1997).
  24. Reeve, J. D., Coulson, R. N., Klepzig, K. D. Predators of the southern pine beetle. Southern Pine Beetle II. , 153-160 .
  25. Reid, R. W. The behavior of the mountain pine beetle, Dendroctonus monticolae. Hopkins, during mating, egg laying and gallery construction. Can Entomol. 90, 505-509 (1958).
  26. Taylor, A. D., Hayes, J. L., Roton, L., Moser, J. C. A phloem sandwich allowing attack and colonization by bark beetles (Coleoptera: Scolytidae) and associates. J. Entomol. Soc. Amer. 27, 101-116 (1992).
  27. Yu, C. C., Tsao, C. H. Gallery construction and sexual behavior in the southern pine beetle, Dendroctonus frontalis. Zimm. (Coleoptera: Scolytidae). Georgia Entomology Society. 2, 95-98 (1967).
  28. Yturralde, K. The Acoustic Ecology of Bark Beetles and Bed Bugs. PhD. Dissertation. , 323 (2013).
  29. Wermelinger, B., Seifert, M. Analysis of the temperature dependent development of the spruce bark beetle Ips typographus (L.) (Col., Scolytidae). Journal of Applied Entomology. 122, 185-191 (1998).
  30. Whitney, H. S., Mitton, J. B., Sturgeon, K. B. Relationships between bark beetles and symbiotic organisms. Bark Beetles in North American Conifers. , 183-211 (1982).
  31. Wood, S. L. The bark and ambrosia beetles of North and Central America (Coleoptera: Scolytidae), a taxonomic monograph. , 1359 (1982).

Tags

PhloemCambiumArthropodsMicrobesInvertebratesFeeding BehaviorsLife-history TraitsReproductionDevelopmentInteractionsPhloem SandwichEducational ToolScientific Discovery

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Cite This Article
Aflitto, N. C., Hofstetter, R. W., McGuire, R., Dunn, D. D., Potter, K. A. Technique for Studying Arthropod and Microbial Communities within Tree Tissues. J. Vis. Exp. (93), e50793, doi:10.3791/50793 (2014).
Download Citation
Reprints and Permissions

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image