一个<em在体外</em>模型研究人类巨噬细胞分化和极化的异质性
Summary
单核细胞源性巨噬细胞是先天免疫系统的重要细胞。这里，我们描述一个易于使用的<em>在体外</em>模型来生成这些细胞。使用梯度离心法，负胎圈分离和特定的细胞培养条件，可以产生单核细胞源性巨噬细胞表型和功能的研究。
Abstract
单核细胞源性巨噬细胞的一个重要的先天免疫系统的细胞不同的。遭受巨噬细胞生物学研究的小鼠模型小鼠和人类之间的单核细胞源性巨噬细胞的表型和功能的差异。因此，我们在这里描述的生成和学习初级人类巨噬细胞的体外模型。简言之，密度梯度离心，从前臂静脉抽血周后，单核细胞分离出外周血单核细胞，使用负磁珠隔离。在这些单核细胞，然后在特定的条件下培养6天后，诱导巨噬细胞的分化或极化的不同类型的。该模型是易于使用和规避鼠标和男人之间的种属特异性的差异所造成的问题。此外，它更接近体内条件比永生化细胞系的使用。最后，这里所描述的模型适合研究巨噬细胞ê生物学，找出疾病的机制和新的治疗靶点。即使不能完全代替实验动物或人体组织获得验尸 ，这里所描述的模型允许疾病可能是高度相关的各种人类疾病的机制和治疗靶点的识别和验证。
Introduction
单核细胞源性巨噬细胞的一个重要的先天免疫系统的细胞成分和向许多急性或慢性的炎症过程1。巨噬细胞发挥 了重要作用，在许多炎症性疾病，如动脉粥样硬化或癌症2。巨噬细胞表现出高度的可塑性，能够承担不同的表型，这取决于在当地micromilieu 3。因此，巨噬细胞分化和异质性研究是必不可少的许多疾病的病理生理增加我们的知识，并让新的治疗靶点的识别和开发新的疗法。
在许多情况下，小鼠模型用于研究特定疾病的病理生理学。然而，使用小鼠模型研究巨噬细胞生物学是伴随着一些缺点：（1）白细胞子集数的比例（ 即单核细胞和粒细胞）在侏罗纪大庆外围的老鼠或人类的血液显著不同建议单核细胞在小鼠和人类生理的不同角色。 （2）建议实质性的差异，它们的功能在健康和疾病4的小鼠和人类外周血单核细胞之间的基因表达有很大差异。 （3）数的标记，用来识别小鼠单核细胞和巨噬细胞（F4/80，LYC 等 ），人类髓系细胞中不存在，使转移的小鼠模型中的结果的人的情况，而难以。
因此，为了提高我们的理解在人类疾病中的巨噬细胞分化和异质性，我们需要利用模型与人类巨噬细胞。因此，我们在这里描述的模型人原发性巨噬细胞产生的，并且容易使用，并允许在各种条件下产生的在不同的巨噬细胞婆的人单核细胞源性巨噬细胞的体外研究偏振类型。在几项研究中，我们已经使用了单核细胞衍生的原代人巨噬细胞的体外模型分析巨噬细胞生物学和其潜在的相关人类动脉粥样硬化5-7。
即使不能完全代替实验动物或人体组织获得验尸 ，这里所描述的模型允许疾病可能是高度相关的各种人类疾病的机制和治疗靶点的识别和验证。
Protocol
Representative Results
Discussion
单核细胞源性巨噬细胞的先天免疫系统的主要细胞类型的代表。他们发挥了重要的作用，在许多炎症性疾病，包括动脉粥样硬化或癌症2。因此，巨噬细胞的生物学研究是必不可少的许多疾病的病理生理学增加我们的知识，并允许开发新的疗法。
许多研究应用小鼠模型的过度表达或缺乏某些基因的利益。在单核细胞源性巨噬细胞的情况下，这似乎不是最好的方法来研?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们感谢纳丁Wambsganss，优良的技术援助。通过CAG创新基金FRONTIER（海德堡大学）的资助，这项工作是由授出德意志研究联合会（GL599/1-1）和部分支持
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
| 50 ml centrifuge tube (sterile) | Fisher | 055398 | |
| D-PBS (1X), liquid (no calcium or magnesium) | Invitrogen | 14190-250 | |
| EDTA | Sigma | T9285 | |
| BSA | Sigma | A-8806 | |
| FCS | Invitrogen | ||
| EasySep Human Monocyte Enrichment Kit | StemCell Technologies | 19059 | |
| EasySep Magnet | StemCell Technologies | 18000 | |
| FACS tubes | Fisher | 352008 | |
| Macrophage-SFM (1X) | Invitrogen | 12065-074 | |
| Penicillin-streptomycin | Sigma | P-4458 | |
| Nutridoma-SP | Roche | 11011375001 | |
| human M-CSF 10 μg | Peprotech | 300-25 | |
| Cell Culture Plates 6-well | Fisher | 07-200-80 |
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