Быстрое определение тепловых Ноцицептивная порога в диабетических крыс
Summary
Здесь мы рассмотрим быстрый надежный и простой процедурой, чтобы определить самую низкую температуру, при которой крыс или мышей показывают nocifensive поведения,<em> Т.е.</em><em> Ноцицептивных тепловой порог</em> (ТНТ). Этот метод применяется медленно растущих тепловых стимулов позволяет точную и воспроизводимую оценку ТНТ с минимальным, если таковые имеются, стресс для животных.
Abstract
Болезненные диабетической нейропатии (PDN) характеризуется гипералгезии т.е. повышенная чувствительность к болевые раздражители, а аллодиния например, повышенная чувствительность к обычно безобидные раздражители 1. Гипералгезии и аллодиния изучались в различных моделях грызунов больных сахарным диабетом 2. Однако, как заявил Bölcskei и др., определение "боль" на животных моделях, является сложной задачей в связи с его субъективный характер 3. Кроме того, традиционные методы используются для определения поведенческих реакций на вредное термические раздражители обычно не хватает воспроизводимости и фармакологическая 3 чувствительности. Например, с помощью горячей пластины методом Ankier 4, вздрагивать, изъятие и / или лизать либо задних и / или передних лапах количественно, как рефлекс задержки при постоянной высокой тепловой раздражитель (52-55 ° С). Тем не менее, животные, которые hyperalgesic тепловой стимул не воспроизводимо показать различия в повторнойгибкого использования этих задержек выше пороговой температуры 3,5. Как недавно описанный метод Bölcskei соавт. 6 процедур, описанных здесь, позволяет оперативно, чувствительной и воспроизводимое определение тепловых ноцицептивных пороги (ТНТ) у мышей и крыс. Метод использует медленно растущих тепловой раздражитель главным образом на кожу мышей / крыс подошвенной поверхности. Этот метод особенно чувствительны к изучению анти-ноцицепции в hyperalgesic государств, таких как PDN. Процедуры, описанные ниже, основаны на тех, опубликованной в деталях Almasi и др. 5 и Bölcskei и др. 3. Процедуры, описанные здесь, были одобрены Уход лабораторных животных и использования комитета (LACUC), Государственный университет Райта.
Protocol
Discussion
Как и в классическом горячей пластины теста количественно тепловой гипералгезии 4,13, анализ ноцицепции описанный здесь позволяет быстрый и надежный способ количественной nocifensive поведение у крыс и мышей. Однако, в отличие от классического теста, дополнительные горячие пластины м?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа финансировалась Американской Диабетической Ассоциации (ADA), Грант JF1-10-14 (MDiF). Мы хотели бы поблагодарить сотрудников лаборатории животноводства в WSU. Авторы выражают благодарность помощи статистического анализа данных Нил Патон, к.т.н.
Materials
| Name | Company | Catalogue number |
| Incremental Hot-Plate Analgesia Meter | IITC Inc. Life Science | Part #PE34 |
| Soft Series 8 | IITC Inc. Life Science | Part # Series8 |
| Streptozotocin | Calbiochem | 572201 |
References
- Baron, R. Peripheral neuropathic pain: From mechanisms to symptoms. Clin. J. Pain. 16, S12-S20 (2000).
- Calcutt, N. A., Jorge, M. C., Yaksh, T. L., Chaplan, S. R. Tactile allodynia and formalin hyperalgesia in streptozotocin-diabetic rats: Effects of insulin, aldose reductase inhibition and lidocaine. Pain. 68, 293-299 (1996).
- Bolcskei, K., Petho, G., Szolcsanyi, J. Noxious heat threshold measured with slowly increasing temperatures: Novel rat thermal hyperalgesia models. Methods Mol. Biol. 617, 57-66 (2010).
- Ankier, S. I. New hot plate tests to quantify antinociceptive and narcotic antagonist activities. Eur. J. Pharmacol. 27, 1-4 (1974).
- Almasi, R., Petho, G., Bolcskei, K., Szolcsanyi, J. Effect of resiniferatoxin on the noxious heat threshold temperature in the rat: A novel heat allodynia model sensitive to analgesics. Br. J. Pharmacol. 139, 49-58 (2003).
- Bolcskei, K., Horvath, D., Szolcsanyi, J., Petho, G. Heat injury-induced drop of the noxious heat threshold measured with an increasing-temperature water bath: A novel rat thermal hyperalgesia model. Eur. J. Pharmacol. 564, 80-87 (2007).
- Chesler, E. J., Wilson, S. G., Lariviere, W. R., Rodriguez-Zas, S. L., Mogil, J. S. Identification and ranking of genetic and laboratory environment factors influencing a behavioral trait, thermal nociception, via computational analysis of a large data archive. Neurosci. Biobehav. Rev. 26, 907-923 (2002).
- Langford, D. J., Crager, S. E., Shehzad, Z., Smith, S. B., Sotocinal, S. G., Levenstadt, J. S., Chanda, M. L., Levitin, D. J., Mogil, J. S. Social modulation of pain as evidence for empathy in mice. Science. 312, 1967-1970 (2006).
- Hunt, S. P., Koltzenburg, M. . The neurobiology of pain. , (2005).
- Willis, W. D. . The pain system : The neural basis of nociceptive transmission in the mammalian nervous system. , (1985).
- Calcutt, N. . Modeling diabetic sensory neuropathy in rats. In: Methods in molecular medicine. Pain research: Methods and protocols. , (2004).
- Bars, D. L. e., Gozariu, M., Cadden, S. W. Animal models of nociception. Pharmacol. Rev. 53, 597-652 (2001).
- Shaikh, A. S., Somani, R. S. Animal models and biomarkers of neuropathy in diabetic rodents. Indian J. Pharmacol. 42, 129-134 (2010).
- Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32, 77-88 (1988).
- Hardy, J. D. Method for the rapid measurement of skin temperature during exposure to intense thermal radiation. J. Appl. Physiol. 5, 559-566 (1953).
- Sumino, R., Dubner, R., Starkman, S. Responses of small myelinated "warm" fibers to noxious heat stimuli applied to the monkey’s face. Brain Res. 62, 260-263 (1973).
- Hammond, D. L., Ruda, M. A. Developmental alterations in thermal nociceptive threshold and the distribution of immunoreactive calcitonin gene-related peptide and substance p after neonatal administration of capsaicin in the rat. Neurosci. Lett. 97, 57-62 (1989).
