المورفومترية التحليلات من أقسام الشبكية
Summary
هذا الفيديو يشرح ثلاثة أنواع من التحليلات المورفومترية من شبكية العين، والتي تشمل قياس سماكة طبقة داخلية النووية، قياس عدد خلايا الشبكية العقدة (الأوقات تستخدم GMT) وقياس الأحجام من الأوقات تستخدم GMT. لا يمكن للتقنية يقدم منصة بسيطة ولكنها علمية لتحليل المورفومترية.
Abstract
وقد استخدمت تحليلات المورفومترية من أقسام الشبكية في دراسة أمراض شبكية العين. فعلى سبيل المثال، قد فقدت كثيرا الخلايا العصبية في طبقة الخلايا العقدية للشبكية (RGCL) في نماذج الفئران مع N-ميثيل مد اسبارتاتي (NMDA) التي يسببها excitotoxicity 1، الشبكية الإسكيمية-ضخه الاصابة (2) والزرق 3. الحد من طبقة ضفيري INL والداخلي (IPL) سمك تم عكس العلاج citicoline في أعين الفئران تعرض لkainic excitotoxicity جلتاميت حامض بوساطة 4. ولوحظ تغيير في كثافة RGC والأحجام سوما مع العلاجات الدوائية المختلفة في عيون مع ارتفاع ضغط العين 3،5،6. لذلك، قد تواجه وسائل موضوعية لتحليل morphometries شبكية العين تكون ذات أهمية كبيرة في تقييم أمراض شبكية العين، ومدى فعالية الاستراتيجيات العلاجية.
بنية شبكية العين هي متعددة الطبقات وعدة أنواع مختلفة من الخلايا العصبية EXIش في شبكية العين. المعلمات المورفومترية من شبكية العين مثل عدد الخلايا، وحجم الخلية وسمك طبقات مختلفة هي أكثر تعقيدا من خلية نظام الثقافة. في وقت مبكر، ويمكن الكشف عن هذه المعلمات باستخدام برامج أخرى من التصوير التجاري. القيم هي عادة من القيمة النسبية، وتغيير لقيمة دقيق قد تحتاج حساب مزيد من الدقة. أيضا، قد تتبع من حجم الخلية والصرف لا تكون دقيقة وحساسة بما يكفي للتحليل الإحصائي، وخصوصا في نموذج الزرق المزمن. قدمت القياسات المستخدمة في هذا البروتوكول على نحو أكثر دقة وسهولة. ويمكن ذكرت وطول مطلقة من خط وحجم الخلية مباشرة وسهلة ليتم نسخها إلى ملفات أخرى. على سبيل المثال، تعود علينا هامش الأنوية الداخلية والخارجية الأكثر خطورة في INL وشكل خط ثم استخدام البرنامج لرسم زاوية 90 درجة لقياس سماكة. في حين من دون مساعدة من البرنامج، خط مائل ربما وتغيير سمك شبكية العين قدلا تكون قابلة للتكرار بين المراقبين الفردية. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن أيضا أن عدد وكثافة الأوقات تستخدم GMT يكون كميا. هذا البروتوكول يقلل بنجاح التغير في ملامح quantitating من شبكية العين، ويزيد من حساسية في الكشف عن تغيرات طفيفة.
وهذا الفيديو شرح ثلاثة أنواع من التحليلات المورفومترية من المقاطع في شبكية العين. وهي تشمل قياس سماكة INL، قياس عدد من الأوقات تستخدم GMT وقياس الأحجام من الأوقات تستخدم GMT في القيمة المطلقة. وتجرى هذه التحليلات مع ثلاثة من أصل محقق ستيريو (MBF العلوم البيولوجية – MicroBrightField، وشركة). لا يمكن للتقنية يقدم منصة بسيطة ولكنها علمية لتحليل المورفومترية.
Protocol
Discussion
1. كيفية الحصول على قياس سماكة أكثر دقة؟
يمكنك تكبير الصورة بالنقر على "تكبير" زر وتركت فوق في إطار البحث عن المفقودين. يمكن النظر إلى الحدود INL بوضوح. إذا غيض من خط ليست على الحدود الخارجية للINL، لا يمكننا ضبط خط تحت وضع التحرير. …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ويدعم العمل على الأبحاث العين في هذا المختبر من قبل مؤسسة الصحة الاميركية مساعد، الأزالية (1972) صندوق الهبات، وجامعة هونغ كونغ صندوق المشاريع الصغيرة (20097176185).
Materials
| Name of the reagent | Type | Company | Catalogue number |
| Stereo Investigator | MBF Bioscience Analysis Software | MicroBright Field | |
| Microscope | Olympus BX51 | Olympus Corporation | BX51 |
References
- Lam, T. T., Abler, A. S., Tso, M. O. N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)–Induced Apoptosis in Rat Retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).
- Lam, T. T., Abler, A. S., Tso, M. O. Apoptosis and caspases after ischemia-reperfusion injury in rat retina. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 40, 967-975 (1999).
- Luo, X. G., Chiu, K., Lau, H. S., Lee, V. W. H., Yung, K. K. L., So, K. F. The Selective Vulnerability of Retinal Ganglion Cells in Rat Chronic Ocular Hypertension Model at Early Phase. Cellular and Molecular Neurobiology. 29 (8), 1143-1151 (2009).
- Han, Y. S., Chung, I. Y., Park, J. M., Yu, J. M. Neuroprotective effect of citicoline on retinal cell damage induced by kainic acid in rats. Korean J. Ophthalmol. 19, 219-226 (2005).
- Hernandez, M., Urcola, J. H. Retinal ganglion cell neuroprotection in a rat model of glaucoma following brimonidine, latanoprost or combined treatments. Exp. Eye Res. 86, 798-806 (2008).
- Chan, H. C., Chang, R. C. C., Ip, A. K. C., Chiu, K., Yuen, W. H., Zee, S. Y., So, K. F. Neuroprotective effects of Lycium barbarum Lynn on protecting retinal ganglion cells in an ocular hypertension model of glaucoma. Experimental Neurology. 203, 269-273 (2007).
