في هذا الفيديو ، ونحن تصف طريقة لتصوير الخلايا الحية لتقسيم الخلايا الاصلية غير متماثلة الحسية والجهاز سليمة في خلايا البشرة<em> ذبابة الفاكهة</em> الشرانق
منذ اكتشاف بروتين الفلورية الخضراء (GFP) ، كان هناك تغير ثوري في استخدام التصوير الخلية الحية كأداة لفهم الآليات البيولوجية الأساسية. وقد ضرب التقدم واضحا بشكل خاص في ذبابة الفاكهة ، التي واسعة من الأدوات المسوخ وخطوط المعدلة وراثيا تقدم نموذجا مناسبا لدراسة تطويريا – الحفظ الآليات البيولوجية التنموية والخلية. ونحن مهتمون في فهم الآليات التي تحكم مواصفات مصير الخلية في نظام أخلاقي العصبي الطرفي (المحيطي) في ذبابة الفاكهة. الشعر الخشن الذي يغطي الرأس والصدر والبطن والساقين وأجنحة تطير البالغين mechanosensory الأجهزة الفردية ، وكان قد درس كنظام نموذجا لفهم آليات نوتش التي تعتمد على قرارات مصير الخلية. ويتم توزيع الجهاز الحسي السلائف (سوب) خلايا microchaetes (أو شعيرات صغيرة) ، في جميع أنحاء ظهارة من القفص الصدري العذراء ، ويتم تحديده خلال الساعات ال 12 الأولى بعد ظهور pupariation. بعد مواصفات ، SOP تبدأ الخلايا على الانقسام ، الذي يحدد مصير عزل الخلايا خدران إلى الخلية أثناء الانقسام ابنة واحدة. خدر يعمل بمثابة مثبط خلية مستقلة تابعة لنوتش مسار الإشارات.
هنا ، وتبين لنا طريقة لمتابعة ديناميكية البروتين في الخلية وSOP ذرية في غضون الصدر والعذراء سليمة باستخدام مزيج من الأنسجة الخاصة Gal4 السائقين وGFP الموسومة 1،2 البروتينات الانصهار ، وهذا الأسلوب له ميزة على الأنسجة الثابتة أو مثقف explants لأنه يسمح لنا متابعة تطور جهازا بأكمله من مواصفات السلائف العصبية للنمو وتمايز محطة للجهاز. يمكننا بالتالي ترتبط مباشرة تغييرات في سلوك الخلية إلى تغييرات في التفريق المحطة. وعلاوة على ذلك ، يمكننا الجمع بين تقنية التصوير العيش مع تحليل الفسيفساء مع علامة الخلية repressible (MARCM) نظام لتقييم ديناميات بروتينات المفتاحية في إجراءات العمل الموحدة في ظل ظروف متحولة الإنقسامية أو wildtype. باستخدام هذه التقنية ، وقد كشفت لنا الرواية وغيرها من الأفكار في تنظيم انقسام الخلايا غير المتماثلة ومكافحة تفعيل الشق يشير في الخلايا سوب (الأمثلة تشمل إشارات 1-6،7 ، 8).
The authors have nothing to disclose.