Summary

SJL Farelerde Deneysel Otoimmün hipofizitis İndüksiyon

Published: December 17, 2010
doi:

Summary

Bu video otoimmün hipofizitis SJL fareler ve histopatoloji ile şiddetini değerlendirmek için nasıl ikna etmek için nasıl gösterir.

Abstract

Otoimmün hipofizitis, duyarlı farelere 1 içine bir adjuvan ile karışık hipofiz proteinlerin enjeksiyonu ile deneysel olarak üretilebilir . Fare modelleri genellikle insanlarda meydana gelen aynı süreçler iyi bir kopyası sağlayarak, bize hastalıkları nasıl açılmak çalışma izin verir. Tip 1A diyabet gibi bazı otoimmün hastalıklar için, insan meslektaşı benzer bir hastalık kendiliğinden geliştirmek modelleri (NOD fare) vardır. Ancak, diğer pek çok otoimmün hastalıklar için model deneysel olarak ihtiyacı var. Bu konuda ortak bir yaklaşım, çalışılan organ türetilen baskın bir antijen ile fare enjekte edilmesidir. Örneğin, otoimmun tiroidit ilgilenen araştırmacılar tiroglobulin 2 farelere enjekte ve myastenia gravis ilgilenenler asetilkolin reseptörü 3 enjekte. Belirli bir otoimmün hastalık için otoantijen bilinen değilse, araştırmacılar otoimmün reaksiyonu ile hedef organ ham protein ekstresi enjekte. Otoimmün hipofizitis, patojen otoantijen (ler) 4 tanımlanabilir kalır ve böylece ham hipofiz protein hazırlanmasında kullanılır . Bu video makalede SJL farelerde deneysel otoimmün hipofizitis nasıl ikna göstermektedir.

Protocol

Deneysel Protokolü Hipofiz immünojen (arkadaşı makalesine bakın) hazırlandıktan sonra, subkutan SJL fareler (Jackson Laboratuvarları, stok 000.686) içine enjekte edilir. 7 gün sonra ikinci bir aynı enjeksiyon tekrarlanır. Fare sonra in vivo ve post-mortem sonuçlarını toplamak için kullanılır. 1. Adım. Hipofiz immünojen SJL farelere subkutan enjeksiyon Fare ilk kez, 20 mg / ml 2,2,2-Tribromoethanol 0,5 ml (Aver…

Discussion

Dört teknikleri, deney hayvanlarında hipofizitis ikna etmek için bildirilmiştir. Freund s adjuvan ile karışık enjeksiyon hipofiz proteinlerin bu makalede anlatılan tekniği, 1967 6 kadar uzanan en eski ve daha yakın zamanda 1 geliştirilmiştir. Diğer teknikler, 1992 7 çözünür kızamıkçık virüsü glikoproteinler enjeksiyon, 2002 8'de doğrudan hipofiz bezine bir adenovirüs stereotaktik enjeksiyon, ve 2010 9, başka bir sıçan suşu böbrek ka…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu çalışma NIH hibe DK080351 PC ve Terry ve Kristine Gore ailesi cömert bir hediye tarafından desteklenmiştir.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
SJL mice (The Jackson Laboratories)     stock 000686  
2,2,2-Tribromoethanol (Avertin)   TCI America T-1420  
Beckstead’s fixative        

References

  1. Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. , (2008).
  2. Twarog, F. J., Rose, N. R. The production of thyroid autoantibodies in mice. J Immunol. 101, 242-2450 (1968).
  3. Patrick, J., Lindstrom, J. Autoimmune response to acetylcholine receptor. Science. 180, 871-872 (1973).
  4. Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).
  5. Beckstead, J. H. A simple technique for preservation of fixation-sensitive antigens in paraffin-embedded tissues: addendum. J Histochem Cytochem. 43, 345-345 (1995).
  6. Levine, S. Allergic adenophypophysitis: new experimental disease of the pituitary gland. Science. 158, 1190-1191 (1967).
  7. Yoon, J. W., Choi, D. S., Liang, H. C., Baek, H. S., Ko, I. Y., Jun, H. S., Gillam, S. Induction of an organ-specific autoimmune disease, lymphocytic hypophysitis, in hamsters by recombinant rubella virus glycoprotein and prevention of disease by neonatal thymectomy. Journal of Virology. 66, 1210-1214 (1992).
  8. Davis, J. R., McMahon, R. F., Lowenstein, P. R., Castro, M. G., Lincoln, G. A., McNeilly, A. S. Adenovirus-mediated gene transfer in the ovine pituitary gland is associated with hypophysitis. J Endocrinol. 173, 265-271 (2002).
  9. Rotondo, F., Quintanar-Stephano, A., Asa, S. L., Lombardero, M., Berczi, I., Scheithauer, B. W., Horvath, E., Kovacs, K. Adenohypophysitis in rat pituitary allografts. Int J Exp Pathol. , (2010).

Play Video

Cite This Article
Landek-Salgado, M. A., Tzou, S., Kimura, H., Caturegli, P. Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis in SJL Mice. J. Vis. Exp. (46), e2182, doi:10.3791/2182 (2010).

View Video