Étudier l'influence gliales hétérogénéité cellulaire sur la croissance axonale aide d'une méthode coculture Nouveau

Dans le système nerveux central de tous les mammifères, les axones sectionnés après une blessure sont incapables de se régénérer à leurs objectifs initiaux et la récupération fonctionnelle est très pauvre ^1. L'échec de la régénération des axones est le résultat combiné de plusieurs facteurs, notamment l'environnement des cellules gliales hostile, inhibition des molécules liées et une diminution de la myéline des neurones intrinsèques de régénération capacité ^2. Les astrocytes sont les cellules les plus prédominantes gliales dans le système nerveux central et de jouer un rôle important dans les fonctions axone sous la physiologie et la pathologie des conditions ^3. Contraste pour les oligodendrocytes homologues, les astrocytes sont une population cellulaire hétérogène composé par différentes sous-populations d'astrocytes avec des morphologies différentes et ⁴ l'expression des gènes. La signification fonctionnelle de cette hétérogénéité, comme leurs influences sur la croissance des axones, est largement inconnue.

Pour étudier les cellules gliales, en particulier la fonction de l'hétérogénéité des astrocytes dans le comportement des neurones, nous avons établi une nouvelle méthode de co-culture de haute purifiée dorsale neurones ganglions de la racine avec des cellules gliales obtenu à partir du cortex de rat. Par cette technique, nous avons pu comparer directement l'adhérence et la croissance des axones des neurones sur les sous-populations différentes astrocytes dans les mêmes conditions.

Dans ce rapport, nous donnons le protocole détaillé de cette méthode pour l'isolement et la culture des astrocytes, neurones ganglions de la racine dorsale isolement et de purification, et la co-culture de neurones avec GHM astrocytes. Cette méthode pourrait également être étendu aux autres régions du cerveau à l'étude cellulaire ou régionales interaction spécifique entre neurones et cellules gliales.