Hücre DışıLaştırıcı Meme Yağ Pedleri: Meme Yağı Pedlerinden Hücre Dışı Matris Hidrojelleri Türetme
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Alves ve ark., Hücre Dışı Matris Hidrojelleri Kullanarak Normal Doku Radyasyon Etkilerinin Incelenmesi. J. Vis. Exp. (2019).
Bu video, in vitro çalışmalar için ex vivo ışınlamayı takiben murine meme yağ pedlerini hücre dışı haleleştirerek hücre dışı matris hidrojelleri türetmenin bir tekniğini açıklamaktadır. Bu hidrojel, tümör hücresi davranışını incelemek için radyasyon sonrası in vivo meme dokusu ortamını taklit etmeye yardımcı olur.
Protocol
1. Hücreden Arındırma NOT: Bu prosedür, DNA’yı verimli bir şekilde çıkarmak için sodyum dodecyl sülfat yerine sodyum deoksikolat iyonik deterjanı içeren yağ desellülerizasyonuna odaklanan daha önce yayınlanan yöntemlerden uyarlanmıştır. 1. günde,donmuş Meme Yağı pedlerini veya MFP’leri -80 °C’den çıkarın ve oda sıcaklığında çözün. Çözdükten sonra, MFP’leri hassas bir görev silme işleminde kıs…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 10% Neutral Buffered Formalin, Cube with Spigot | VWR | 16004-128 | |
| 2-methylbutane | Alfa Aesar | 19387 | |
| Bovine Serum Albumin | Sigma-Aldrich | A1933-25G | |
| Dulbecco's phosphate-buffered saline | Gibco | 14040133 | |
| Fisher Healthcare Tissue-Plus O.C.T. Compound | Fisher Scientific | 23-730-571 | cryostat embedding medium |
| Kimtech Science Kimwipes | Kimberly Clark | delicate task wipes | |
| n-Propanol (Peroxide-Free/ Sequencing), Fisher BioReagents | Fisher Scientific | BP1130-500 | |
| PBS (10X), pH 7.4 | Quality Biological, Inc. | 119-069-151 | Phosphate-buffered saline |
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15140-122 | |
| Peracetic acid | Sigma-Aldrich | 77240-100ML | |
| Triton x-100 | Sigma-Aldrich | X100-100ML | t-Octylphenoxypolyethoxyethanol |
| Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red | Gibco | 25200-056 | |
| Richard-Allan Scientific Signature Series Hematoxylin 7211 | Richard-Allan Scientific | 7211 | |
| Whatman qualitative filter paper, Grade 4 | Whatman | 1004-110 | grade 4 qualitative filter paper |
| Xylenes (Certified ACS), Fisher Chemical | Fisher Scientific | X5-5 |
Cite This Article
Decellularizing Mammary Fat Pads: Deriving Extracellular Matrix Hydrogels from Mammary Fat Pads. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20229, doi: (2023).