Yumuşak Agar Koloni Oluşumu Tahlil: Yeni Bileşiklerin Kanser Hücre Çoğalması Üzerindeki Etkilerini Test Etmek İçin Bir Yöntem
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Horibata A. ve ark., Meme Kanseri Hücrelerinde Tümörojenikliğin inhibitörlerini tanımlamak için Yumuşak Agar Kolonisi Oluşumu Tahlilinin Kullanımı.
Bu video, padi enzim inhibitörü ve BB-Cl-amidinin meme kanseri tümörojenite in vitro üzerindeki etkilerini test etmek için yumuşak bir agar kolonisi oluşumunu açıklar. Bu tahlil aynı zamanda hücre dönüşüm potansiyelinin genetik pertürbasyonlar bağlamında nicel olarak değerlendirilmesini sağlar.
Protocol
1. % 3 Hazırlanması 2-Hidroksetil Agarose Temiz, kuru 100 ml cam şişeye 0,9 g 2 hidroksiyetil agarose (Agarose VII) ve ardından 30 ml damıtılmış su ekleyin. Karışımı 15 saniye mikrodalgaya koyun ve hafifçe döndürün. Agarose tozu tamamen çözünene kadar bu adımı en az üç kez daha tekrarlayın. Çözelti içeren şişeyi 15 dakika boyunca otoklavlayın. Daha fazla kullanmadan önce agarose çözeltisinin RT’ye soğumasını bekleyin. Çözümü RT’de saklayın….
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Zeiss Axiopot | Carl Zeiss Microscopy | 1021859251 | |
| Inverted Microscope | Olympus | CKX41 | |
| DMEM/F-12 | Lonza BioWhittaker | 12-719F | |
| HyClone Donor Equine Serum | Fisher Scientific | SH30074.03 | |
| Penicillin Streptomycin | Life Technologies | 15140-122 | |
| 2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature | Sigma-Aldrich | 39346-81-1 |
Cite This Article
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).