Ensaio de formação de colônia de ágar macio: um método para testar efeitos de novos compostos na proliferação de células cancerosas
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Horibata A. et. al., Utilização do Ensaio de Formação da Colônia de Ágar Macio para Identificar Inibidores da Tumorigenicidade em Células cancerosas de mama. J. Vis. Exp. (2015).
Este vídeo descreve um ensaio de formação de colônia de ágar macio para testar os efeitos de um inibidor de enzima PADI e bb-cl-amidine sobre tumorigenicidade de câncer de mama in vitro. Este ensaio também permite a avaliação quantitativa do potencial de transformação celular no contexto das perturbações genéticas.
Protocol
1. Preparação de 3% 2-Hidroxietila Agarose Em uma garrafa de vidro limpa e seca de 100 ml, adicione 0,9 g de 2-hidroxietila agarose (Agarose VII) seguido por 30 ml de água destilada. Micro-ondas a mistura por 15 segundos e redemoinho suavemente. Repita este passo pelo menos mais três vezes até que o pó de agarose se dissolva completamente. Autoclave a garrafa contendo solução por 15 minutos. Permita que a solução agarose esfrie para RT antes de usar mais. Armazene a solu?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Zeiss Axiopot | Carl Zeiss Microscopy | 1021859251 | |
| Inverted Microscope | Olympus | CKX41 | |
| DMEM/F-12 | Lonza BioWhittaker | 12-719F | |
| HyClone Donor Equine Serum | Fisher Scientific | SH30074.03 | |
| Penicillin Streptomycin | Life Technologies | 15140-122 | |
| 2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature | Sigma-Aldrich | 39346-81-1 |
Cite This Article
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).