Soft Agar Colony Formation Assay: En metode til at teste virkningerne af nye forbindelser på kræftcellespredning
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Horibata A. et al., Udnyttelse af Soft Agar Colony Formation Assay til at identificere hæmmere af tumorigenicitet i brystkræftceller.
Denne video beskriver en blød agar koloni dannelse assay at teste virkningerne af en PADI enzym hæmmer og BB-Cl-amidine på brystkræft tumorigenicity in vitro. Denne analyse gør det også muligt at foretage en kvantitativ vurdering af celletransformationspotentialet i forbindelse med genetiske ændring.
Protocol
1. Præparat af 3% 2-Hydroxyethyl Agarose I en ren, tør 100 ml glasflaske tilsættes 0,9 g 2-hydroxyethyl agarose (Agarose VII) efterfulgt af 30 ml destilleret vand. Mikrobølgeovn blandingen i 15 sek og forsigtigt hvirvel. Gentag dette trin mindst tre gange mere, indtil agarosepulveret er helt opløst. Autoklaver den opløsningsholdige flaske i 15 minutter. Lad agaroseopløsningen køle af til RT før videre brug. Gem løsningen på RT. 2. Forbered…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Zeiss Axiopot | Carl Zeiss Microscopy | 1021859251 | |
| Inverted Microscope | Olympus | CKX41 | |
| DMEM/F-12 | Lonza BioWhittaker | 12-719F | |
| HyClone Donor Equine Serum | Fisher Scientific | SH30074.03 | |
| Penicillin Streptomycin | Life Technologies | 15140-122 | |
| 2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature | Sigma-Aldrich | 39346-81-1 |
Cite This Article
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).