3D Культура Подвал Мембрана Анализ: Культивирование раковых клеток на 3D Подвал Мембрана Белковая матрица для изучения вторжения клеток
Published: April 30, 2023
Abstract
Источник: Цветкович, Д., и др. Количественная оценка инвазивности раковых клеток молочной железы с использованием трехмерной (3D) модели. J. Vis. Exp. (2014).
Это видео предоставляет подробную методологию для выращивания раковых клеток молочной железы в 3D мембранной мембранной белковой матрице, окстифицируя потенциал 3D-культуры в оценке вторжения клеток в окружающую среду.
Protocol
1. Трехмерная культура раковых клеток молочной железы в матрице мембран подвала (Техника встраивания) Обработка матрицы мембраны подвала Matrigel: Оттепель на льду на ночь при 4 градусов по Цельсию. Мембранная матрица подвала является жидкой при низкой температуре, но затвер?…
Representative Results
Рисунок 1. Трехмерная культура клеток рака молочной железы MDA-MB-231 в мембранной матрице подвала (техника встраивания). A-B) Схема экспериментальной установки (выполненной в дымовом капоте). C) Колодец стеклянного дна, покрытый 50 мкл мемб…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 35-mm glass-bottomed Confocal No.1 culture dishes | MatTek Corporation | P35G-1.0-14-C | Precooled before use |
| Bovine serum albumin (BSA) | BioShop | ALB003.100 | Used at 3% for IF |
| 1.5 ml tubes | VWR | CA10011-700 | CA10011-700 |
| 100-mm culture dish BD353003 | VWR | CABD353003 | Sterile, disposable |
| 15 ml Falcon tube | VWR | CA21008-918 | Sterile, disposable |
| 1 ml filtered tips | VWR | 10011-350 | Sterile, disposable |
| 200 μl filtered tips | VWR | 22234-016 | Sterile, disposable |
| 20 μl filtered tips | VWR | 22234-008 | Sterile, disposable |
| Fetal bovine serum (FBS) | Sigma | F1051 | Used at 10% (v/v) |
| RPMI 1640 Medium with Glutamine | Life Technologies | 11875-119 | Used for culturing of MDA-MB-231 cells |
| MEGM (bullet kit): MEBM (CC3151)+Single quots (CC4136) | Lonza | CC-3150 | Used for culturing of MCF10A cells |
| Olympus IX-81 microscope | Olympus | Used for 3D culture imaging (DIC images at 10X and 40X) |
Cite This Article
3D Culture Basement Membrane Assay: Culturing Cancer Cells on 3D Basement Membrane Protein Matrix to Study Cell Invasion. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20220, doi: (2023).