Este vídeo fornece uma metodologia detalhada para o crescimento das células cancerígenas de mama em uma matriz proteica de membrana 3D, exemplificando o potencial da cultura 3D na avaliação da invasão celular no ambiente circundante.
Protocol
1. Cultura tridimensional de células cancerígenas de mama na Matriz de Membrana do Porão (Técnica de Incorporação) Manuseando matrigel matriz de membrana do porão: Descongele no gelo durante a noite a 4 °C. A matriz de membrana do porão é líquida a baixa temperatura, mas se solidifica à temperatura ambiente. Mantenha a matriz de membrana do porão no gelo(Figuras 1A-B). Cubra o prato confocal no.1 de fundo de vidro com 50 μl de matriz de membrana de por?…
Representative Results
Figura 1. Cultura tridimensional de células cancerígenas de mama MDA-MB-231 na matriz de membrana do porão (a técnica de incorporação). A-B) Um esquema da configuração experimental (realizado no capô da fumaça). C) O poço do prato com fundo de vidro revestido com 50 μl de matriz de membrana de porão. D) Prato(es) colocado em uma incubadora de cultura celular (a 37 °C com 5% de CO2) para permitir que a matriz…
3D Culture Basement Membrane Assay: Culturing Cancer Cells on 3D Basement Membrane Protein Matrix to Study Cell Invasion. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20220, doi: (2023).