직접적인 상호 작용과 3D 공동 배양: 그들의 상호 작용을 연구하기 위하여 단색세포와 암세포를 공동 배양합니다
Published: April 30, 2023
Abstract
출처: 에스피노자-산체스, 외. 세포외 매트릭스 추출물(ECME)-기반 의 3차원 시스템에서 단핵구와 1차 유방암 세포 간의 통신 분석. (2018).
이 비디오는 세포외 매트릭스 추출물(ECME) 기반 환경에서 그들의 상호 작용을 연구하기 위하여 단색세포를 가진 유방암 세포의 3D 공동 배양을 기술합니다. 이 방법은 콜라겐 분해, 면역 세포 모집 및 세포 침입과 같은 특정 기능을 연구하는 데 도움이됩니다.
Protocol
직접적인 상호 작용을 가진 1.3D 공동 배양 mRNA 및 단백질 발현의 분석을 위한 배양 후 각 세포 계보의 독립적인 분류를 허용하기 위하여 세포 배양 의 앞에 상이한 형광염료를 가진 BrC 세포 및 단핵세포를 레이블. 살아있는 세포의 세포막을 자유롭게 통과하는 쿠마린과 로다민의 상업적으로 이용 가능한 유도체를 사용하십시오. 레이블 지정을 위한 일반적인 프로토콜은 다음과…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| U937 | American Type Culture Collection ATCC | CRL-1593.2 | Monocytic cell line/histiocytic lymphoma |
| THP-1 | American Type Culture Collection ATCC | TIB-202 | Monocytic cell line/acute monocytic leukemia |
| MCF-10A | American Type Culture Collection ATCC | CRL-10317 | Non-transformed breast cell line |
| MCF-7 | American Type Culture Collection ATCC | HTB-22 | Breast Cancer Cell line |
| MDA-MB-231 | American Type Culture Collection ATCC | HTB-26 | Breast Cancer Cell line |
| RPMI 1640 medium | GIBCO BRL Life Technologies | 11875-093 | |
| DMEM/F12 | GIBCO BRL Life Technologies | 11039-021 | |
| Antibiotic/Antimycotic | GIBCO BRL Life Technologies | 15240-062 | 100 U/mL penicillin, 100 µg/mL streptomycin, and 0.25 µg/mL Fungizone |
| Fetal Bovine Serum | GIBCO BRL Life Technologies | 16000-044 | |
| Horse serum | GIBCO BRL Life Technologies | 16050114 | |
| 0.05% Trypsin-EDTA 1X | GIBCO BRL Life Technologies | 25300-062 | |
| PBS 1X (Phosphate Buffered Saline | GIBCO BRL Life Technologies | 20012-027 | |
| Epidermal Growth Factor (EGF) | PeproTech | AF-100-15 (1.00mg) | |
| Insulin | SIGMA-ALDRICH | I1882-100MG | |
| Hydrocortisone | SIGMA-ALDRICH | H088-5G | |
| Cholera toxin Vibrio cholerae | SIGMA-ALDRICH | C8052-1MG | |
| Matrigel | Corning Inc | 356237 | Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) mouse sarcoma, extracellular matrix extract, Store at -20°C until use at 4°C |
| Lab-Tek chamber slide with cover (8 well) | Nalge Nunc International | 177402 |
Cite This Article
3D Co-culture with Direct Interaction: Co-culturing Cancer Cells with Monocytes to Study Their Interaction. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20216, doi: (2023).