Volwassen zebravis elektrofysiologie: een methode om de extracellulaire elektrische activiteit van neuronen in vivo te meten
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Johnston, L., et al. Elektrofysiologische opname in de hersenen van intacte volwassen zebravissen. J.Vis. Exp. (2013)
Het protocol beschrijft de procedure om elektrofysiologie uit te voeren bij volwassen zebravissen. Deze methode kan worden gebruikt voor het meten van neurale activiteit in vivo.
Protocol
1. Elektrofysiologie Schakel de intubatiestopkraan uit en koppel snel het Luer-slot los dat de intubatiebasis verbindt met de tricaïnedruppel. Verplaats de intacte intubatie-instelling naar de elektrofysiologiemicroscoop en maak verbinding met het perfusiesysteem. Zet het habitatwater aan en doordrenkt met een snelheid van 1 ml / min gedurende ~ 1 uur, om de tricaine uit te wassen. Plaats de secundaire elektrode met behulp van een micromanipulator onder visuele control…
Materials
| Habitat water | pH 7.0-7.4, conductivity of 400-450 μS; maintained by Instant Ocean and Sodium Bicarbonate |
||
| 0.4% Tris-Buffered Tricaine | Sigma-Aldrich | E10521 | pH 7.2-7.4; stored at -20 oC |
| 60 ml Luer lock syringe tubes | Becton, Dickinson and Company | 309653 | |
| 3-way Stopcocks with Luer connections | |||
| 0.010 in Silver wire | A-M Systems, Inc. | ||
| Q-series electrode holder | |||
| Fisherbrand 100 mm x 15 mm Petri dish | Fisher Scientific | NC9299146 | |
| 34 G Beveled needle | World Precision Instruments, Inc. | NF34BV | |
| 37 cm x 42 cm Kimwip | Kimberly-Clark Professional | TW31KEM | |
| 1/8 in diameter tube | |||
| 1 mm diameter tube | |||
| Microscope (Leica MZ APO) | Another microscope can be used |
Cite This Article
Adult Zebrafish Electrophysiology: A Method to Measure the Extracellular Electrical Activity of Neurons In Vivo. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20192, doi: (2023).