Ablación hepática dirigida: Inducción de la muerte de hepatocitos con metronidazol en larvas transgénicas de pez cebra
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Choi T.Y., et al. Ablación específica de hepatocitos en peces cebra para estudiar la regeneración hepática impulsada por biliares. J. Vis. (2015)
El artículo describe la ablación hepática dirigida, un método para inducir la muerte por hepatocitos con metronidazol en larvas transgénicas de pez cebra. El protocolo de muestra describe el proceso para generar, manipular y evaluar la ablación hepática dirigida en peces cebra.
Protocol
1. Preparación de embriones/larvas Transfiera 100 embriones a una placa de Petri de 100 mm con 25 ml de agua de huevo. Mantenga no más de 100 embriones por placa de Petri y eleve a 28 °C. Para inhibir la pigmentación, agregue feniltiourea (PTU) en las placas de Petri antes de las 10 horas posteriores a la fertilización (HPF), y levante embriones/larvas hasta 80 HPF. La concentración final de PTU es de 0,2 mM.PRECAUCIÓN: La PTU es tóxica. Utilí con arreglo a las directrice…
Materials
| 3-amino benzoic acid ethyl ester (Tricaine) powder | Sigma-Aldrich | A5040 | Make 0.4% (15 mM) tricaine stock : Bring 0.4 g tricaine to 100 mL with egg water. Adjust to pH 7. |
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma-Aldrich | D8418 | |
| Metronidazole | Sigma-Aldrich | M1547 | |
| N-Phenylthiourea (PTU) | Sigma-Aldrich | P7629 | |
| 100 x 15 mm petri dish | Denville Scientific Inc. | M5300 | |
| egg water | 0.3 g/L of sea salts ‘Instant Ocean’ and 0.5 mM CaSO4 in distilled water. | ||
| epifluorescence microscope | Leica Microsystems | M205FA |
Cite This Article
Targeted Liver Ablation: Inducing Hepatocyte Death with Metronidazole in Transgenic Zebrafish Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20181, doi: (2023).