Interruzione cuticola: un metodo per raccogliere l'emolinfa dalle larve di Drosophila

Published: April 30, 2023

Abstract

Fonte: Reimels, T. A. e Pfleger, C.M. Metodi per esaminare la ghiandola linfatico e gli emociti nelle larve di Drosophila . J. Vis. Exp. (2016).

L’emolinfa Drosophila funge sia da sangue che da liquido interstiziale, circolando in tutto il corpo durante la larva e le fasi adulte. Questo video descrive un protocollo per raccogliere l’emolinfa larvale al fine di quantificare le cellule circolanti.

Protocol

Questo protocollo è un estratto da Reimels e Pfleger, Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. 1. Concentrazione di emociti circolanti Per ottenere larve di circa lo stesso stadio di sviluppo per questo saggio, limitare la raccolta delle uova consentendo alle femmine di deporre le uova per un periodo di tempo fisso di 2 – 6 ore. Raccogliere le larve nei pozzi di sezionatura dei piatti riempiti con 1x soluzione sa…

Materials

PBS tablets MP Biomedicals 2810305
dissecting dish Corning 7220-85
microcentrifuge tube Denville C2170
silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit Krayden (distributed through Fisher) NC9644388 (Fisher catalog number) Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions.
stereomicroscope Morrell Instruments (Nikon distributor) mna42000, mma36300 Nikon models SMZ1000 and SMZ645
tissue wipe VWR 82003-820
forceps Electron Microscopy Sciences 72700-DZ
p200 pipette Eppendorf 3120000054
Countess Automated Cell Counter Invitrogen C10227
Countess cell counting chamber slides Invitrogen C10283
hemocytometer Hausser Scientific 3200
trypan blue stain Life Technologies T10282

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Cite This Article
Cuticle Disruption: A Method to Collect Hemolymph from Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20126, doi: (2023).

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