Eilandtest: een methode met hoge doorvoer om drosophila-locomotorisch gedrag te evalueren
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Eidhof, I., et al. High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay. J.Vis. Exp. (2017).
Deze video beschrijft de eilandtest, een gedragsmethode die wordt gebruikt om drosophila-voortbeweging te bestuderen. Het voorbeeldprotocol bevat een installatie voor de test die compatibel is met semi-geautomatiseerde beeldanalyse.
Protocol
Dit protocol is een fragment uit Eidhof et al., High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay, J. Vis. Exp. (2017). 1. Bouw van de Island Assay Box Bereid een dienblad van een robuust materiaal, zoals polymethylmethacylaat (PMMA), voor op een laag water(d.w.z. een bad). Zorg ervoor dat het materiaal niet wit is.OPMERKING: Afmetingen van 40 x 35 x 2,5 cm3 worden aanbevolen …
Representative Results
Figuur 1: Stroomdiagram met de vereisten, experimentele procedure en analyse van de eilandtest. (A) Eilandtestapparatuur. (B) Experimentele opstelling voor de eilandtest. (C) Eilandtest. (D) Verwerking van eilandtestgegevens met de macro “Drosophila Island Assay”. De “Drosophila Island Assay” macro bestaat uit 3 submacro’s: 1) stapel en …
Materials
| 25 x 95 mm Drosophila vials | Flystuff | 32-116SB | – |
| Logitech C525 HD Webcam | Logitech | – | Any webcam with USB connection is suitable. |
| Stand to hold webcam | – | – | – |
| Lamp | – | – | 12 V LED lights are appropriate |
| Pounding pad | – | – | Any mouse pad works |
| Island Assay box | – | – | Dimensions 40x35x2.5 cm. Hole 20×30 cm. Transparent. |
| Island Assay bath | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Non white. |
| Island/platform | – | – | Dimensions 42x38x25 cm. Uniform white. |
| Soap | – | – | Standard dishwashing detergent is suitable. |
| Computer | – | – | Scripts run both on Windows and Mac |
| Image-recording software: HandiAvi® | AZcendant® | – | HandyAvi is only compatible with Windows and has been described throughout the manuscript. It can be downloaded from: http://www.azcendant.com/DownloadHandyAvi.html (version 5.0) |
| Image-recording software: WebcamCapture | – | – | Fiji/ImageJ plugin that can be used on Mac alternative to HandyAvi for image-recordings and can be downloaded from: https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/ When using this method, the user has to use the same folder setup and image-recording settings indicated in this manuscript, with the exception that for each experimental replicate, the captured image stack should be exported as Stack.tiff to the corresponding experimental replicate folder. Upon running the "Drosophila Island Assay" macro on this data, no text should be present in the "First frame identifier" setting. |
Cite This Article
Island Assay: A High-Throughput Method to Evaluate Drosophila Locomotor Behavior. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20103, doi: (2023).