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Ensaio de Glicosylase Uracil-DNA por Desorção a Laser Assistida por Matriz/Análise de Espectrometria de Massa
JoVE Journal
Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Uracil-DNA Glycosylase Assay by Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flight Mass Spectrometry Analysis
DOI:

12:19 min

April 22, 2022

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Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 01:28DNA Glycosylase Assay
  • 04:43Transferring UDG Reaction Products to a Matrix Chip
  • 05:33Setting up the Assay Parameters on the Mass Spectrometer
  • 07:19Mass Spectrometer Operation, Viewing Mass Spectra, and Analyzing the Data
  • 09:03Results: UDG Assay Using MALDI-TOF MS for AP Site Containing Product Analysis
  • 11:01Conclusion

Summary

Tadução automática

Um método não-rótulo, não-isotópico não-radio-isotópico para avaliar a atividade uracil-DNA glicosylase foi desenvolvido usando espectrometria de massa MALDI-TOF para análise direta do produto que contém local apurinic/apyrimidinic. O ensaio provou ser bastante simples, específico, rápido e fácil de usar para a medição de glicosilase de DNA.

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