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원형 RT-PCR 기반 전략을 사용하여 옥수수 미토콘드리아의 기본 및 처리된 성적증명서의 차별 및 매핑
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Genética
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JoVE Journal Genética
Discrimintion and Mapping of the Primary and Processed Transcripts in Maize Mitochondrion Using a Circular RT-PCR-based Strategy
DOI:

07:26 min

July 29, 2019

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Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:39Preparation of Crude Mitochondrion from Maize Developing Kernels
  • 01:45RNA 5’ Polyphosphatase Treatment and Circularization
  • 02:33Reverse Transcription and Normalization
  • 03:30PCR Amplification and Determination of Transcript Termini
  • 04:34Verification of the cRT-PCR Mapping Results by RNA Gel Blot Hybridization
  • 05:00Discrimination of Primary and Processed 5’ Ends
  • 05:26Determination of Maize mRNA Termini Using the Circular RT-PCR-based Strategy
  • 07:05Conclusion

Summary

Tadução automática

우리는 원형 RT-PCR, 정량적 RT-PCR, RNA 5' 폴리포스파타제 처리 및 북부 블롯을 결합하여 원형 RT-PCR 기반 전략을 제시합니다. 이 프로토콜은 불안정한 5' 삼인산염의 영향을 최소화하기 위한 정규화 단계를 포함하며, 옥수수 미토콘드리아에 안정적으로 축적된 1차 및 처리된 전사체를 차별하고 매핑하는 데 적합하다.

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