Journal
/
Genética
/
الشاشات الوراثية المجمعة المستندة إلى كريسبر في خلايا الثدييات
JoVE Journal
Genética
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Genética
Pooled CRISPR-Based Genetic Screens in Mammalian Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

الشاشات الوراثية المجمعة المستندة إلى كريسبر في خلايا الثدييات

DOI:
10.3791/59780-v

•

00:09 min

•

September 04, 2019

•

, , , ,
1Donnelly Centre,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto, 3Institute for Biomaterials and Biomedical Engineering,University of Toronto

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:36Pooled CRISPR sgRNA Lentiviral Library Plasmid Amplification
  • 02:24Large-scale CRISPR sgRNA Library Lentivirus Production
  • 03:47Primary Screen Infection, Selection, and Cell Passaging
  • 05:41CRISPR Sample Preparation and Sequencing
  • 06:43Results: Genome-scale CRISPR Screening
  • 07:54Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

توفر تقنية CRISPR-Cas9 طريقة فعالة لتحرير الجينوم الثدييات بدقة في أي نوع من أنواع الخلايا وتمثل وسيلة جديدة لأداء الشاشات الوراثية على نطاق الجينوم. ويرد هنا بروتوكول مفصل يناقش الخطوات اللازمة للنجاح في أداء شاشات كريسبر-كاس9 المجمعة على نطاق الجينوم.

Tags

CRISPRGenetic ScreensMammalian CellsDrop-out ScreensGuide LibrariesEssential GenesCancerDrug MechanismsCell LinesLentivirusAntibiotic SelectionPlasmid TransformationElectrocompetent CellsLBCarbenicillinPlasmid Purification293T CellsTransfection

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

التلاعب الجيني للمسببات الأمراض النباتية<em> السوادية الذروية</em> لدراسة علم الأحياء الفطرية النباتية وميكروب التفاعلات

جيل يعتمد على الاختيار ومستقل من كريسبر / كاس 9 بوساطة جين نوكوتس في خلايا الثدييات

شرنا المجمعة الشاشة لإعادة تنشيط MeCP2 على كروموسوم X غير نشط

تكيف تهجين التقاط البروتينات المرتبطة بلونين للبروتينات في خلايا الثدييات

ساعد فورمالدهايد عزل العناصر التنظيمية لتدبير الكروماتين الوصول في خلايا الثدييات

تحليل بيانات تسلسل من دفعة الخميرة 2-الهجين شاشات المعلوماتي

تشريح للدالة محسن باستخدام محسن متعدد المستندة إلى كريسبر التدخل في خطوط الخلايا

عزل وتوصيف والمستندة إلى MicroRNA التحوير الوراثي للخلايا الجذعية البشرية جريب طب الأسنان

الهندسة الوراثية ديسكويديوم ديكتيوستيليوم "الخلايا استناداً إلى" التحديد والنمو في البكتيريا

تحرير الجينوم في "خطوط خلايا الثدييات" استخدام Cas كريسبر

Read Article