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A Rapid and Facile Pipeline for Generating Genomic Point Mutants in C. elegans Using CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins
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Un rápido y fácil tubería para generar genómica punto mutantes de C. elegans utilizando CRISPR/Cas9 ribonucleoproteínas

DOI:
10.3791/57518-v

•

08:37 min

•

April 30, 2018

•

, , , ,
1Department of Pharmacology,University of Michigan

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:42sgRNA Target Selection and Homology-directed Repair Template Design
  • 02:21Prepare Injection Mix and Injection Protocol
  • 03:18Screen P0 Plates and Single mCherry(+) F1s
  • 04:03Single Worm PCR and Genotyping
  • 05:41Indentification and Sequence Verification of Edited Animals
  • 06:34Results: Rapid CRISPR/Cas9 Generated Point Mutations in C. elegans sod-1
  • 07:50Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aquí, presentamos un método para diseñar el genoma de C. elegans utilizando ribonucleoproteínas Cas9 CRISPR y plantillas de reparación dependiente de homología.

Tags

CRISPR/Cas9Genomic Point MutationC. ElegansHomology Directed RepairSsODNSgRNARestriction Endonuclease SiteNeurociênciaNeurodegenerative DiseaseEndogenous Regulatory ControlProtein OverexpressionPipelineRapidFacile

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