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Using Three-color Single-molecule FRET to Study the Correlation of Protein Interactions
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Uso del traste de una sola molécula a estudiar la correlación de las interacciones proteína

DOI:
10.3791/56896-v

•

11:22 min

•

January 30, 2018

•

, , ,
1Institute of Physical Chemistry,University of Freiburg, 2Department of Bionanoscience, Kavli Institute of Nanoscience Delft,Delft University of Technology

Capítulos

  • 00:05Título
  • 00:37Total Internal Reflection Fluorescence Microscope (TIRFM) Flow Chamber Assembly
  • 02:15Three-color smFRET Measurement of Hsp90
  • 05:52Data Analysis
  • 09:08Results: Protein Interactions of Hsp90
  • 10:47Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aquí, presentamos un protocolo para obtener datos smFRET tricolor y su análisis con un conjunto 3D modelo de Markov ocultos. Con este enfoque, los científicos pueden extraer información cinética de sistemas complejos de la proteína, incluyendo cooperatividad o interacción correlacionadas.

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Keywords: Three-color Single-molecule FRETProtein InteractionsCooperativityQuantitative BiologyProtein ComplexesDynamic InteractionsFlow Chamber AssemblyPEG-biotin Functionalized SlideMulti-color Prism TIRF MicroscopeEMCCD Camera Configuration

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