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Radiomarcação e quantificação dos níveis celulares de Fosfoinositídeos por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplado Fluxo de Cintilação
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Radiolabeling and Quantification of Cellular Levels of Phosphoinositides by High Performance Liquid Chromatography-coupled Flow Scintillation

Radiomarcação e quantificação dos níveis celulares de Fosfoinositídeos por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplado Fluxo de Cintilação

DOI:
10.3791/53529-v

•

10:52 min

•

January 06, 2016

•

, ,
1Department of Chemistry and Biology, Program in Molecular Science,Ryerson University

Capítulos

  • 00:05Título
  • 00:58Yeast Cell Culture and Radiolabeling of Phosphoinositides
  • 02:58Deacylation and Extraction of the Radiolabeled Phosphoinositides
  • 05:14Separation of Tritium-labeled Glycero-inositides by High Pressure Liquid Chromatography (HPLC)
  • 07:15Data Analysis
  • 08:55Results: HPLC Analysis of Radiolabeled Phosphoinositides
  • 09:55Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Fosfoinositídeos estão sinalizando lipídios, cuja abundância relativa muda rapidamente em resposta a vários estímulos. Este artigo descreve um método para medir a abundância de fosfoinositídeos por meio de rotulagem metabolicamente células com 3 H- mio-inositol, seguido por extracção e desacilação. Extraídos glicero-inositides são então separados por cromatografia líquida de alto desempenho e quantificadas por cintilação fluxo.

Tags

RadiolabelingPhosphoinositidesHPLCFlow ScintillationYeastMammalian CellsInositolPerchloric AcidEDTACentrifugationSonicationLiquid CultureCell GrowthCell Lysis

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