低酸素環境下におけるヒトのマクロファージ偏光のプロテオーム解析

大食細胞は自然免疫系細胞の数組織の恒常性は、細胞外マトリックス¹の改造とアポトーシス細胞の除去を含む感染病原体に応答に至る生理機能に関与します。これらの細胞は、多くの可能なアクティベーション状態、偏波とも呼ばれますに変換する強力な表現型可塑性²によって特徴付けられます。これらの各種偏波の精密分子説明が大食細胞生物学³の分野で優先されます。それはいわゆる M1 ・ M2 の二分法、M1 プロ炎症性を表し M2 マクロファージ炎症を使用してこれらの分極を分類するために提案されている.このモデルは、急性感染症、アレルギー、肥満⁴など様々 な病理学的状況で適合します。しかし、慢性的な炎症を起こしている組織やがん、それ実証されていますこの分類は特定セルラ環境^5,6,に存在するマクロファージ幅広い表現レパートリーを把握することができます。⁷します。 現在のコンセンサスは、多次元モデルを使用して、特定のアイソレータケージ信号⁸を統合するマクロファージの偏波がよりよく記述されています。この結論は、M1 ・ M2 モデルが得られた偏波⁹の記述で効率的であることを示す人間の大食細胞のトランスクリプトーム解析により確認されています。

研究は、ヒトのマクロファージで各種偏波のプロテオームの署名を取得するためのプロトコルを提供することを目的を発表しました。我々 は様々 な酸素濃度の環境下でヒトのマクロファージを区別し、ラベル無料定量化を実行する全体のマクロファージ プロテオームからペプチドを取得する方法について説明します。この数量は、様々 なタンパク質の発現レベルの比較をできます。幹細胞の研究は、環境キー パラメーター¹⁰として酸素の重要性を明らかにしたと私たちはこの組織パラメーターができるヒトのマクロファージ偏波にどのように影響を与えるかを理解ましょう。酸素の分圧は、20% がおよそ (正確な値は約 18.6% 水の存在をしながら細胞文化のインキュベーターでよく使用されるものに、人間の体で 3 (合計の大気圧) の 20% からの範囲に発見されています。考慮)。

前作は、肺胞間質性マクロファージ機能とは異なる、これらの違いが部分的に露出¹²が異なる酸素濃度のためおそらくビュー¹¹の形態のポイントを示しています。さらに、骨髄由来マクロファージは、細菌¹²低酸素環境にさらされたときを phagocytize する能力の増大を示します。THP1 区別ヒトマクロファージ¹³、反対の効果が発見されているが、これらの結果は、大食細胞生物学のレギュレータを酸素には、人間の大食細胞の分子レベルでこの役割を明らかにする必要の考えを支持します。以前の研究では、これらの問題に対処するためのプロテオミクス手法を用いています。たくさんの蛋白質の発現量を同時に測定することにより我々 は偏波上の酸素の影響を強調表示され、新しい分子マーカーのリストを提供します。また、いくつかのマクロファージ機能にこれらの結果を関連することができた。特に、IL4 IL13 偏極マクロファージ、プロテオーム解析¹⁴によって明らかにされた ALOX15 のアップレギュレーションにリンクされていた」アポトーシス細胞の貪食能の率は増加したが分かった。本研究で我々 はこのような分析を実行する方法をについて説明します。