행동의 배터리 테스트 사정 일반 운동, 근육 강도, 그리고 조정 마우스
Summary
행동 테스트 질병 또는 동물의 웰빙에 대 한 치료의 phenotypic 효과 평가 하기 위해 전 임상 시험에 사용 됩니다. 세계적으로 모터 기능 평가, 우리는 일반적인 운동, 근 력, 및 조정에 대 한 테스트를 선택: 오픈 필드 테스트, 메쉬 테스트 및 rotarod 테스트, 각각.
Abstract
행동 테스트 특정 질병 이나 치료에는 동물의 복지와 건강 phenotypic 효과 결과 평가 하기 위해 전 임상 시험에 사용 됩니다. 수많은 행동 테스트를 적용할 수 있다. 우리는 일반적인 운동에 대 한 테스트를 선택, 오픈 필드 테스트 (자주); 근육 강도 대 한 테스트, 메쉬 테스트 (MT); 그리고 조정, rotarod 테스트 (RR)에 대 한 테스트. 매주 또는 매월 단위로 테스트를 수행할 수 있습니다. 일반적인 운동에 대 한 테스트로 서 객관적으로 마우스 중 운동 매개 변수를 모니터링 하 여 자주 작품 오픈 필드 장치에 있다. 필드는 일반적으로 2′ x 2′ 상자, 그리고 움직임 레이저 감지 또는 비디오 캡처를 통해 기록 됩니다. 마우스 오픈 필드의 중앙에 배치 하 고 테스트에 대 한 자유롭게 움직일 수 있습니다. MT는 마우스에 대 한 대기 시간을 사용 하 여 근육 힘의 측정으로는 거꾸로 스크린 떨어져. 마우스는 화면, 명확한 상자, 반전 하 고가에 그들의 대기 시간에 대 한 타임에 배치 됩니다. 그 날에 대 한 득점 3 재판의 최고 3 재판 수행 됩니다. 60의 점수 s 거꾸로 마우스 왼쪽 최대 시간입니다. 쥐 망 테스트 실험 사이 5 분 휴식 시간을 받는다. 마지막으로,는 RR에 가속된 프로토콜 모터 조정 및 지구력을 평가합니다. 재판 중 마우스 회전 막대에 산책 40 rpm 5 분 이상 4 rpm에서 속도 증가. 평가판 끝 때 마우스 접촉 시 떨어지는 자성된 압력 센서입니다. 각 마우스 겪 습 3 재판, 그리고 최고의 재판 그 날에 대 한 점수입니다. 이 결합 된 행동 데이터 이동성, 조정, 힘, 및 시험 동물의 움직임의 글로벌 평가 할 수 있습니다. 적어도 두 세 가지 행동 테스트 측정에서 전반적인 향상 된 모터 기능을 가진 것으로 자격을 동물에 대 한 개선을 표시 해야 합니다.
Introduction
행동 테스트의 목표는 phenotypic 특성을 측정 하 중앙 신 경계에 영향을 미치는 질병의 새로운 마우스 모델에 대 한 또는 새로운 치료의 재판에 대 한 연구에 (서) 인지 이다. 다양 한 행동 테스트 중에서 선택할 수 있습니다. 행동 테스트의 조합을 사용 하 여에 대 한 근거는 완전히 전 임상 치료 결과 평가 하기 위해 자주. 여기 오픈 필드 테스트 (자주)을 포함 하는 행동 테스트의 배터리, 메쉬 테스트 (MT), 그리고는 rotarod 테스트 (RR).
자주 일반 운동 활동1,2,3,4,5,,67의 측정으로 사용 됩니다. 이 평가 수는 오픈 필드에서 자유롭게 이동 마우스 그리고 측정 된 값은 마우스의 움직임 행동 재판의 과정을 통해. 양육, 이동 거리, 시간을 포함 한 자주 사용 하 여 만든 정량 분석 보냈다 이동 (예를 들어, 산책 및 실행), 및 변화 활동에 시간 (예를 들어, 점프 하 고 느린/활동적인 움직임), 그래서 그것은 유용 하 고 설치류 문제의 철저 한 분석입니다.
MT는 쥐1,2,8,9,,1011의 강도 평가 하는 데 사용 됩니다. 철 격자 망의에 모든 4 개의 사지를 사용 하 여 중력의 영향을 반대 하는 동안 지속적인된 다리 긴장을 표시 하는 쥐의 기능 비-침략 적 측정에 대 한 수 있습니다. 이 평가 거꾸로 메쉬에 마우스를 배치 하 고가에 대기 시간 타이밍에 의해 이루어집니다. 이 테스트는 얼마나 오래 저장할 수 있는 자체 거꾸로 화면에 떨어지 전에 측정 하 여 마우스의 근육 강도 평가 합니다.
RR는 가속 프로토콜1,2,7,8,9,,1213를 사용 하는 동안 마우스의 조정을 평가 합니다. 4 rpm에서 시작 하는 공중에서 회전 하는 원통형 빔을 rotarod 기구에 의하여 이루어져 있다. 마우스 모터 조정 기술을 배울 수 있습니다 그리고 40 rpm까지 천천히, 점진적 증가 의해 도전을 했습니다. 고아 하 게, 일정 한 속도 프로토콜은 근육 강도의 측정 RR에 대 한 가속 프로토콜 평가 조정, 지구력, 근 력1,2,7, 14.
이 세 가지 행동 테스트의 장점은 그들은 설치류 행동 테스트 커뮤니티2,7,,89, 전체와의 합으로 뿐 아니라 촬영 허용 널리는 개별 테스트를 하지만, 그들은 실험적인 치료의 다른 결과 조사할 때 phenotypic 동작의 글로벌 평가로 사용할 수 있습니다. 자주 전반적인 운동 활동2에 대 한 유일한 테스트 중 하나입니다. RR 여기 논의 될 것 이다 걸음 걸이 분석 소프트웨어를 사용 하 여 다른 조정2, 평가 하는 유일한 방법 중 하나 이기도 합니다. 몇 가지는 마우스의 근 력 평가 될 수 있다; 그러나, MT, 또는 와이어 중지 테스트를 사용 하 여 prevalently는 문학에서 사용 되 고 허용 되 고 근육 강도2,,89,10, 를 테스트 하기 위한 신뢰할 수 있는 방법으로 11. 일반 운동 및 조정 측정을 위한 많은 다른 기술이 매우 시간이 소모 되 고 신뢰할 수 있는 데이터 (예: 마우스 움직임을 수동으로 타이밍 또는 수동으로 회화 발 걸음 걸이 분석을 위해) 생성 하지 않을 수 있습니다. 자동화 된 시스템은 자주와 RR에 대 한 신뢰성과 타당성의 생산 데이터와 시간과 노력 절약 증가.
예를 들어,이 배터리 테스트를 수행할 때 Sandhoff 질병 마우스 모델의 neurodegeneration을 감안할 때는 자주 것이 테스트는 보통 3 개월에서 시작이 마우스 모델에서 볼 수 있는 모터 이상이 평가 하는 데 사용의 첫 번째. 또한 모터 조화 적자 나이의 12 주에서 명백한 시작 되어야 한다. 근 력에서 적자 약 14 주 나이의 시작 한다 그러나 궁극적으로 16 주에 의해 훨씬 더 중요 한 된다.
이러한 테스트는 Sandhoff 질병1,8,13,7, 파 킨 슨 병 같은 신경 퇴행 성 질환9 를 포함 하 여 중요 한 모터 손상 시키는 질병을 공부 하는 경우에 유용 Huntington의 질병, 다 발성 경화 증입니다. 테스트는 또한 노후화를 공부 하 고 비교 노인 평가 또는 건강의 측정에 사용할 수 있습니다. 보행자 세 소요와 운동 및 균형에 변화 많은 이러한 질병 상태에서 볼 수 있습니다. 그러나, 이러한 테스트의 유용성 유행 신경 근육 증상으로 질병에 국한 되지 않습니다.
거기에 아무 혼란 변수 동기 부여 또는 설명된 행동 테스트 측정의 참신 지적 되었습니다 note 하시기 바랍니다. 그것은 절대적으로 특정 질병 상태와 병 리 연구팀은 마우스 보여줍니다 어떤 phenotypic 증상; 하기 전에 예비 행동 데이터를 수집 연구원 해야 다음 주기적으로 (매주) 모든 모터 결함 차지 하 고에 대 한 확인. 많은 질병 phenotypic 증상의 빠른 개시 그리고 주간 테스트 없이 이러한 증상 것 하지 수 차지 했다.
Protocol
Representative Results
Discussion
모든 테스트에 대 한 청소 및 소독 contagions와 쥐에 선택 항목을 최소화 하기 위해 표면. 또한, 확인 그 쥐 실험과 행동 사이 충분 한 휴식 기간 주어진 테스트 하는 자주, RR, 그리고 산을 사용 하는 경우
자주, 그것은 각 마우스 오픈 필드 중간에 배치 되 고 중심으로 프로그램 마우스의 출시에 따라 시작은 중요 합니다. 수 없는 손 움직임 센서 시작 프로그램에 등록할 수 있는?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리는 그들의 지속적인된 지원을 하 고 우리의 연구 자금에 대 한 새로운 희망 Resarch 재단을 감사 하 고 싶습니다. 우리는 또한이 작품에 대 한 부분 재정 지원에 대 한 IITC를 감사 하 고 싶습니다.
Materials
| IITC Life Sciences Rotarod with Series 8 computing software | IITC Life Sciences | 755 | |
| Square Open Field 45 x 45 x 40 cm (grey color). Other floor color available: white, black. | Harvard Aparatus (PanLab) | 760190 | |
| Open Field Preconfigured Module | Harvard Aparatus (PanLab) | 760688 | |
| Smart V3.0 Software Platform | Harvard Aparatus (PanLab) | 760681 | |
| Video converter (analog/digital) | Harvard Aparatus (PanLab) | 760262 | |
| Roof fixing sys for camera | Harvard Aparatus (PanLab) | 760277 | |
| Analog Sony Camera & lenseNTSC | Harvard Aparatus (PanLab) | 760505 |
Referências
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