Summary

सामान्य गतिवान, मांसपेशियों की शक्ति, और चूहों में समन्वय का आकलन व्यवहार परीक्षण की बैटरी

Published: January 23, 2018
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Summary

व्यवहार परीक्षण पूर्व नैदानिक परीक्षणों में प्रयोग किया जाता है एक बीमारी या एक जानवर की भलाई पर उपचार के phenotypic प्रभाव का आकलन है । आदेश में विश्व स्तर पर मोटर कामकाज का आकलन करने के लिए, हम जनरल गतिवान, मांसपेशियों की शक्ति, और समंवय के लिए परीक्षण का चयन: ओपन फील्ड टेस्ट, मेष परीक्षण, और rotarod परीक्षण, क्रमशः ।

Abstract

व्यवहार परीक्षण पूर्व में प्रयोग किया जाता है नैदानिक परीक्षणों phenotypic प्रभाव और परिणाम है कि एक विशेष रोग या उपचार है पशुओं की भलाई और स्वास्थ्य पर है आकलन करने के लिए । वहां कई व्यवहार परीक्षण है कि लागू किया जा सकता है । हम जनरल गतिवान, ओपन फील्ड टेस्ट (बहुधा) के लिए एक परीक्षण का चयन किया; मांसपेशियों की ताकत के लिए एक परीक्षण, मेष टेस्ट (एमटी); और समंवय के लिए एक परीक्षण, rotarod टेस्ट (आरआर) । परीक्षण एक साप्ताहिक या मासिक आधार पर पूरा किया जा सकता है । सामान्य गतिवान के लिए एक परीक्षण के रूप में, अक्सर एक खुले क्षेत्र उपकरण में माउस है, जबकि बहुधा काम करने के लिए आंदोलन मापदंडों की निगरानी द्वारा कार्य करता है । क्षेत्र आम तौर पर एक 2 ‘ x 2 ‘ बॉक्स है, और आंदोलनों लेजर संवेदन के माध्यम से या वीडियो पर कब्जा के माध्यम से दर्ज कर रहे हैं । माउस खुले मैदान के केंद्र में रखा गया है और परीक्षण के लिए स्वतंत्र रूप से स्थानांतरित करने की अनुमति दी । मीट्रिक टन एक माउस के लिए विलंबता का उपयोग करता है मांसपेशियों की ताकत का एक उपाय के रूप में एक औंधा स्क्रीन गिर जाते हैं । एक माउस एक स्क्रीन है, जो एक स्पष्ट बॉक्स पर औंधा है पर रखा गया है, और उनके विलंबता के लिए समय पर गिर जाता है । तीन परीक्षणों के तीन परीक्षण के सर्वश्रेष्ठ के साथ प्रदर्शन कर रहे हैं, उस दिन के लिए रन बनाए । ६० s का स्कोर एक माउस औंधा छोड़ दिया है अधिकतम समय है । चूहों मेष परीक्षण परीक्षण के बीच एक 5 मिनट आराम अवधि दिया जाता है । अंत में, आरआर पर एक त्वरित प्रोटोकॉल मोटर समंवय और धीरज का आकलन है । एक परीक्षण के दौरान, एक माउस एक घूर्णन छड़ी पर चलता है के रूप में यह 4 rpm से 5 मिनट से अधिक ४० rpm को गति में बढ़ जाती है । परीक्षण समाप्त होता है जब माउस गिरने पर चुंबकीय दबाव संवेदक को छूता है । प्रत्येक माउस तीन परीक्षणों से गुजरती है, और सबसे अच्छा परीक्षण उस दिन के लिए रन बनाए है । यह संयुक्त व्यवहार डेटा गतिशीलता, समंवय, शक्ति, और परीक्षण जानवरों के आंदोलन के वैश्विक आकलन के लिए अनुमति देता है । तीन व्यवहार परीक्षण के उपायों में से कम से दो एक जानवर के लिए सुधार दिखाने के लिए समग्र सुधार मोटर समारोह होने के रूप में अर्हता प्राप्त करना चाहिए ।

Introduction

व्यवहार के परीक्षण के लक्ष्य को मापने के लिए है phenotypic लक्षण वर्णन, चाहे अध्ययन में केंद्रीय तंत्रिका तंत्र को प्रभावित करने वाले रोगों के एक नए माउस मॉडल के लिए या एक नए इलाज के एक परीक्षण के लिए । वहां व्यवहार परीक्षण की एक किस्म से चुन रहे हैं । व्यवहार परीक्षण का एक संयोजन का उपयोग करने के लिए तर्क अक्सर पूरी तरह से पूर्व नैदानिक उपचार परिणामों का आकलन करने के लिए है. व्यवहार परीक्षण के साथ साथ की बैटरी ओपन फील्ड टेस्ट (बहुधा), मेष टेस्ट (एमटी), और rotarod टेस्ट (आरआर) शामिल हैं ।

बहुधा सामान्य हरकत गतिविधि1,2,3,4,5,6,7का एक माप के रूप में उपयोग किया जाता है । यह आकलन माउस को स्वतंत्र रूप से एक खुले क्षेत्र में स्थानांतरित करने के लिए अनुमति देता है, और माप लिया व्यवहार परीक्षण के पाठ्यक्रम पर माउस की गतिविधियों रहे हैं । मात्रात्मक विश्लेषण का उपयोग कर एक बार बार शामिल पालन, दूरी ले जाया गया, समय बढ़ खर्च (जैसे, चलने और चल रहा है), और समय के साथ गतिविधि में परिवर्तन (जैसे, कूद और धीमी/अतिसक्रिय आंदोलनों), यही वजह है कि यह एक उपयोगी है और मूषक व्यवहार का गहन विश्लेषण ।

मीट्रिक टन चूहों की ताकत का आकलन करने के लिए प्रयोग किया जाता है1,2,8,9,10,11. सभी चार अंगों के उपयोग के लिए एक तार ग्रिड मेष के बंद लटका चूहों की क्षमता का गैर इनवेसिव माप के लिए अनुमति देता है निरंतर अंग तनाव दिखाने के लिए गुरुत्वाकर्षण के प्रभाव का विरोध करते हुए । यह आकलन एक उल्टे जाल पर एक माउस रखकर किया जाता है और गिरावट के लिए अपने विलंबता समय । यह परीक्षण बंद गिरने से पहले उल्टे स्क्रीन पर खुद को पकड़ कर सकते हैं कितना समय मापने के द्वारा माउस की मांसपेशियों की ताकत का आकलन.

आरआर एक माउस के समंवय का आकलन करते हुए तेजी प्रोटोकॉल1,2,7,8,9,12,13का उपयोग कर । rotarod तंत्र एक बेलनाकार बीम कि 4 rpm पर शुरू हवा में घूमता के होते हैं । माउस इस मोटर समंवय कौशल सीख सकते है और फिर धीमी गति से चुनौती दी है, वृद्धिशील ४० rpm तक बढ़ जाती है । , आरआर के लिए तेजी प्रोटोकॉल समंवय, धीरज, और मांसपेशियों की ताकत1,2,7का आकलन है, जबकि प्रतिष्ठित, लगातार गति प्रोटोकॉल मांसपेशियों की ताकत का एक उपाय है, 14.

इन तीन व्यवहार परीक्षण के लाभ कर रहे है कि वे पूरी तरह से कुतर व्यवहार परीक्षण समुदाय में स्वीकार किए जाते है2,7,8,9, और जब बस के योग के रूप में नहीं लिया व्यक्तिगत परीक्षणों, लेकिन सामूहिक रूप से, वे phenotypic व्यवहार के एक वैश्विक आकलन के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है जब प्रयोगात्मक उपचार के विभिंन परिणामों की जांच । बहुधा समग्र हरकत गतिविधि2के लिए केवल परीक्षणों में से एक है । आरआर भी एक ही तरीके से समंवय2का आकलन करने के लिए, के अलावा अंय चाल विश्लेषण सॉफ्टवेयर है, जो यहां चर्चा नहीं की जाएगी का उपयोग करें । वहां कुछ तरीके है जिसमें एक चूहे की मांसपेशियों की ताकत का आकलन किया जा सकता है; हालांकि, मीट्रिक टन, या एक तार लटका परीक्षण का उपयोग कर, प्रचलित साहित्य में इस्तेमाल किया गया है और मांसपेशियों की ताकत के परीक्षण के लिए एक विश्वसनीय विधि के रूप में स्वीकार कर लिया है2,8,9,10, 11. सामांय गतिवान और समंवय को मापने के लिए कई अंय तकनीकों बहुत समय लगता है और विश्वसनीय डेटा का उत्पादन नहीं कर सकते है (उदा, मैंयुअल रूप से समय माउस आंदोलन या स्वयं को चाल विश्लेषण के लिए पंजे पेंटिंग) । बहुधा और आरआर के लिए स्वचालित सिस्टम विश्वसनीयता और उत्पादित डेटा की वैधता में वृद्धि और समय और प्रयास को बचाने के ।

उदाहरण के लिए, Sandhoff रोग माउस मॉडल के neurodegeneration दिया, जब परीक्षणों की इस बैटरी प्रदर्शन, अक्सर इन परीक्षणों के पहले मोटर विषमताओं है कि आम तौर पर इस माउस मॉडल में देखा जाता है की उंर के 3 महीने में शुरू मूल्यांकन का इस्तेमाल किया जाएगा । मोटर समंवय में घाटा भी उंर के 12 हफ्तों में शुरू स्पष्ट हो जाना चाहिए । मांसपेशियों की ताकत में घाटा उंर के 14 सप्ताह के आसपास शुरू हो जाना चाहिए, लेकिन वे अंततः 16 सप्ताह से ज्यादा महत्वपूर्ण हो जाते हैं ।

ये परीक्षण उपयोगी है जब रोगों का अध्ययन है कि महत्वपूर्ण मोटर विकलांगता के कारण, neurodegenerative रोगों सहित9 जैसे Sandhoff रोग1,8,13, पार्किंसंस रोग7, हटिंगटन की बीमारी, मल्टीपल स्केलेरोसिस । परीक्षण भी उंर बढ़ने का अध्ययन करने के लिए और तुलनात्मक बुढ़ापे आकलन या स्वास्थ्य की माप बनाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । चाल गड़बड़ी और गतिवान और संतुलन में परिवर्तन इन रोग राज्यों के कई में देखा जाता है । हालांकि, इन परीक्षणों की उपयोगिता प्रचलित neuromuscular लक्षणों के साथ रोगों तक ही सीमित नहीं है ।

कृपया ध्यान दें कि वहां कोई ढूंढने की प्रेरणा या वर्णित व्यवहार परीक्षण उपायों में से किसी की नवीनता के संबंध में उल्लेख किया चर गया है । यह कुछ रोग राज्यों और विकृतियों के लिए आवश्यक है कि शोधकर्ताओं ने प्रारंभिक व्यवहार डेटा प्राप्त करने से पहले माउस किसी भी phenotypic लक्षण दिखाता है; शोधकर्ता तो आवधिक (साप्ताहिक) सुनिश्चित करना चाहिए कि सभी मोटर विकलांगता के लिए खाते हैं । कई रोगों phenotypic लक्षण की एक त्वरित शुरुआत है, और साप्ताहिक परीक्षण के बिना, इन लक्षणों के लिए हिसाब नहीं होगा ।

Protocol

सभी प्रोटोकॉल वर्णित के साथ साथ अनुसार प्रदर्शन किया गया, और द्वारा अनुमोदित किया गया, महारानी विश्वविद्यालय पशु देखभाल समिति । व्यवहार परीक्षण की आवृत्ति साप्ताहिक या मासिक, या दो का एक संयोजन (यान?…

Representative Results

अध्ययन जानवरों व्यवहार परीक्षण प्रतिमान साप्ताहिक या मासिक विश्लेषण के लिए आवश्यक समय आवश्यक बिंदुओं को समायोजित करने के लिए गुजरना कर सकते हैं । व्यवहार परीक्षण समय पर उदाहरणों के लिए <s…

Discussion

सभी परीक्षणों के लिए, साफ और चूहों को contagions और विरोधियों को कम करने के लिए सतह को संक्रमित । इसके अलावा, निश्चित है कि चूहों परीक्षणों के बीच पर्याप्त आराम समय दिया जाता है और व्यवहार परीक्षण के बीच जब अक्?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

हम अपने निरंतर समर्थन और हमारे अनुसंधान के वित्तपोषण के लिए नई आशा Resarch फाउंडेशन का शुक्रिया अदा करना चाहूंगा । हम भी इस काम के लिए आंशिक वित्तीय सहायता के लिए IITC शुक्रिया अदा करना चाहूंगा ।

Materials

IITC Life Sciences Rotarod with Series 8 computing software  IITC Life Sciences 755
Square Open Field 45 x 45 x 40 cm (grey color). Other floor color available: white, black. Harvard Aparatus (PanLab) 760190
 Open Field Preconfigured Module Harvard Aparatus (PanLab) 760688
Smart V3.0 Software Platform  Harvard Aparatus (PanLab) 760681
Video converter (analog/digital) Harvard Aparatus (PanLab) 760262
Roof fixing sys for camera Harvard Aparatus (PanLab) 760277
Analog Sony Camera & lenseNTSC Harvard Aparatus (PanLab) 760505

Referências

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Osmon, K. J., Vyas, M., Woodley, E., Thompson, P., Walia, J. S. Battery of Behavioral Tests Assessing General Locomotion, Muscular Strength, and Coordination in Mice. J. Vis. Exp. (131), e55491, doi:10.3791/55491 (2018).

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