Summary

コミュニティ病院でIVのインスリン投与を向上させる

Published: June 11, 2012
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Summary

以前の紙のプロトコル、ターゲットの範囲内で、血中グルコース濃度の測定の大幅な増加にコンピュータ化されたグルコース管理システムの結果のインプリメンテーションと比較した場合。血糖値を監視するためにコンピュータ化されたグルコースの管理システムを使用して、重度の低血糖(<40 mg / dL)を、臨床的低血糖(<70 mg / dL以上)、および高血糖(> 180 mg / dL)をも観察することができますに減少する。

Abstract

糖尿病は、あっても非糖尿病患者で、入院患者の増加罹患率と死亡率の主要な独立した危険因子と、血中グルコース濃度である予後不良を予測1-4 2008年のコンセンサスステートメント臨床内分泌のアメリカ協会( AACE)と米国糖尿病協会(ADA) "が明確に有害転帰に関連付けられているにかかわらず、その原因の、入院患者の高血糖症"と述べている5それは、高血糖を認識することが重要であるだけでなく、既知または未診断の糖尿病患者で発生し以前に正常な耐糖能を有するもので急性疾患時に。

集中的な血糖コントロールや従来のグルコースに無作為に割り付けられたグルコースアルゴリズムの規則を使用した集中ケア評価 – サバイバルで正常血糖(NICE-SUGAR)6000大人の集中治療室(ICU)を介して関係する研究では、患者。コントロール6は驚くべきことに、この試験では、集中的な血糖コントロールが14%(P = 0.02、オッズ比1.14)で死亡のリスクを増加させることがわかった。さらに、重度の低血糖の増加率は、従来の対照群(P <0.001 6.8パーセント対0.5%、それぞれ)と比較して集中的な対照群であった。この極めて重要な試験と2人から、7,8ワイオミング州医療センター(WMC)が得られる低血糖の悪影響を回避しながら、入院患者に高血糖を制御することの重要性を実現しました。

IVインスリン紙プロトコルの複数のリビジョンにもかかわらず、WMCでの紙のプロトコルの利用からデータの分析は、正常血糖を達成するための面で低血糖を最小限に抑えながら、ことを示し、結果は準最適であった。したがって、体系的な実施計画を介して、患者の血糖値のモニタリングは、コンピュータ化されたグルコースマネージメントは、紙のIVインシュリンプロトコルを使用してから切り替えられたTシステム。コンピュータシステムのそれに紙のプロトコルを使用して血糖値を比較することによって、それは全体的に、コンピュータ化されたグルコース管理システムは従来の紙のプロトコルよりも迅速かつタイトな血糖コントロールをもたらすことが、決定された。具体的には、時間の大幅な増加は、ターゲットの血中グルコース濃度の範囲と同様に、重度の低血糖(BG <40 mg / dL)を、臨床的低血糖(BG <70 mg / dL以上)、および高血糖症の有病率の減少の中で過ごした(BG> 180 mg / dL以上)は、コンピュータ化されたグルコース管理システムの実装後の最初の5ヶ月で目撃された。低血糖のリスクを最小限に抑えながら、コンピュータシステムは、すべての測定値の75%以上に目標濃度を達成しました。コンピュータのグルコース管理システムを利用した低血​​糖症の有病率(BG <70 mg / dL以上)は、1%以下であった。

Protocol

1。 PART I:既存の紙のプロトコル既存の紙のプロトコル1.1のベースライン調査 WMCで開発された最初の紙の静脈内(IV)インスリンプロトコルは、ICU患者の80 to110 mg / dLの厳格な血糖コントロールと非ICU患者の95 to120 mg / dLのより自由な血糖コントロールを求めた。基礎IVインスリン注入などのインスリンボーラス投与を利用しました。9は目標範囲内で血中グルコース濃度を生成するためにこれらの紙のプロトコルの能力を判断するには、両方のプロトコル、13人の患者は、1221時間の合計のための非ICUプロトコルで管理された人続いていた637血糖値(BG)の決定である。このベースライン分析の結果は、既存のプロトコルへの改正を正当化し、ターゲットの範囲内で血中グルコース濃度( 図1)の適切な数を得られなかった。 紙のプロトコル1.2最初のリビジョンスタッフによってコミットされたエラーの受け入れ数が多いため、施設全体のIVインスリン紙のプロトコルは次のように改訂されました。 新しいプロトコルは、インスリン感受性の患者のレベルを反映して4のアルゴリズムを利用して、Trenceと同僚で公開プロトコルをモデルにした、より多くの患者特異的であった10 目標血中グルコース濃度の目標範囲は、新しいプロトコルに従って80から180 mg / dLに広がった。 唯一のIVインスリン注入調整が含まれていたとインスリンボーラス投与は、潜在的にエラーの44%を排除し、削除されました。 13以上の非ICUプロトコルの患者は649血糖測定と896時間の合計続いていた。紙プロトコルの最初のリビジョンからの結果は、別のリビジョンを正当化、ターゲットの範囲内で血中グルコース濃度( 図4)の適切な数を得られなかった。 1紙プロトコルの0.3番目の改正最初のリビジョンの解析の結果、さらに変更が紙のプロトコルに行われました。 あいまいな言葉は "晴れ"だった。 豊富な教育プログラムは、プロトコルのエンドユーザー(看護スタッフIE)で行われた。 これら二つの努力の後、第二改訂IVインスリン紙プロトコルは、複数の非ICUプロトコル16人の患者(18別の実装では、プロトコル、および594の血糖値測定の合計783時間)からのデータを使用して再評価した。 既存の紙のプロトコル1.4のベースライン調査最終的に、元の紙のプロトコルの使用が70未満mg / dLの測定値( 図1)≤94 mg / dLで、4.2%の有病率の血糖測定値の16.5%の有病率と関連していた。問題の発見は、だった低血糖イベントの85%(22/26)(すなわち、BGは<70 mg >開発は、高血糖と糖尿病性ケトアシドーシス(DKA)のCGMSテンプレートに基づいてセット。 血糖値の目標範囲の決定。 CGMSオフの患者を移行するための特定のインスリンの種類を含む、CGMSパラメータの決定。 エンドユーザー向けの総合的な教育計画の策定。 バイインおよび承認した後、契約は2009年3月に署名されたとCGMSの実装が予定されていた。 2009年5月に、プロジェクトはすべての当事者により開始された後、情報技術(IT)およびCGMSベンダーの代表者との予備的なプロジェクトの評価は、ありました。 すべての看護スタッフや医師、エンドユーザーは、効果的な血糖コントロールを達成するための肯定的な効果に関する情報を含む、CGMSの使用状況に教育を受けました:ソフトウェアのベンダーは、看護師とソフトウェアを確認するには、臨床看護師のチームを提供し、classrを提供するソフトウェアの画面やエントリー固有の情報を表示するためのコンピュータシミュレーションの経験上のOOMのトレーニングだけでなく、手。 薬局や内分泌病院イントラネットにプレプリント注文を開発し、アップロードしました。 オーダーセットは、投薬記録にIVの混和を入力するときに整合性を確保するために薬局の情報システムに組み込まれていました。 2009年9月に、ほぼすべての看護師の大規模な訓練の後、CGMSは、ICUとPCU(プログレッシブケアユニット)のライブ行ってきました。 CGMSへの移行フェーズでは、ベンダーの看護師チームがEndoToolの患者の最初のグループの開始を支援する3日間のオンサイトであった。 機関の他の部分への段階的なロールアウトは2009年10月に開始されました。 2.2制限およびCGMSプロトコルの利点制限事項:高い初期導入コスト、重要なITサポート要件、および継続的なメートルソフトウェアの手数料およびサポート要件をaintenance。 利点:目標範囲内の患者の血糖の長いメンテナンス、目標範囲に患者の血糖値を、以下の低血糖や高血糖、プロトコルの実装でエラーを減らし、容易に患者のデータの抽出、患者のインスリンの特定のレベルに基づいて作成済みのSQ遷移命令の高速入り口抵抗、および臨床アラートに建てられた。 プロトコル 3。コンピュータ化されたグルコースモニタリングのためのEndoToolを使用して、 プログラムを開いた後、リンクを "新しい患者のための検索"をクリックして、興味のある患者を見つける。次に、ポップアップウィンドウの "新規患者のための検索"では、ユーザーIDとパスワードを入力してログインします。 [OK]をクリックした後、画面に "新しい患者のための検索"の口座番号のウィンドウに口座番号を入力してください。その後、 "検索"をクリックした後、新しい患者情報は、患者がSELになることができ、表示されるected。 患者を追加するには、[OK]をクリックすると、人口の画面が表示されます。そのような患者の糖尿病の状態、体重、クレアチニンレベルは、この画面上で患者の臨床情報を入力し、患者が過去24時間内の任意の経口または静注ステロイドを受け取ったかどうかを指定します。 臨床データが入力されたら、[保存]をクリックし、初期のカルテ画面を起動し続け、その後、患者の初期のグルコースの測定値を入力してください。ボックスは、入力されたグルコースの確認を求めるポップアップ表示されます。再び血糖値を入力し、[OK]をクリックします。 これで、すべての患者情報が画面上の緑 "確認"ポップで正しいかどうかを確認し、[OK]をクリックします。 どのくらいのインスリンボーラスのは、(必要に応じて)与えるためにどの程度の割合で注入を実行するには、次のグルコースが表示されますを確認するときに通知黄色の "計算"画面の次。 その後のグルコースの測定値が入力されると、EndoToolは、fを求めまたは "余分"カロリーは、患者の血糖値の読み取りに影響を与えたかもしれない、与えられた場合に推奨されるインスリン投与量が実際に投与されていることを確認。必要に応じて緑色の "確認"画面で、インスリン投与量とカロリーの情報を調整します。 [OK]をクリックすると、インスリンのボーラス投与(必要に応じて)、インスリン注入速度、次のチェック時間情報を持つ黄色の "計算"画面が表示されます。これらの推奨事項に注意して行った後、FINISHED]をクリックします。 4。 EndoTool性の検証、警告、記録保持、およびオフユニットの使用早期に血糖値をチェックするとき、EndoToolは、患者が誤って選択されていないことを確認するために、要求の検証を要求します。正しい患者が選択されている場合は、[OK]をクリックします。 予期しない血糖値が入力された、またはいくつかのケースでは、予想される場合、情報が欠落している場合は、 "臨床諮問"ウィンドウがポップアップ表示されます。警告情報に注目した後、COをクリックします患者情報に必要な変更を行うことNTINUE。 各患者のグルコース、インスリンのボーラス量、インスリン注入速度、チェック間の間隔、およびこれらのデータを入力して看護師の名前のレコードを検索するには、 "グルコース·レコード"タブをクリックします。 患者がEndoToolが利用できないエリアにユニットをオフに行く必要がある場合、ホーム画面の左側の列の上部にあるボックス内の "プリント患者レポート/注文する"リンクをクリックします。 "IVインスリン点滴オーダー(EndoToolせずに一時的に使用される)"ボックスを選択して、患者が戻るまでのIVインスリン注入を調整し、EndoToolに戻って配置することができるための推奨事項を印刷表示するには[OK]をクリックします。その後、印刷するには、左、左上隅にあるプリンタのアイコンをクリックします。 最後に、患者がEndoToolの遷移オフに準備および皮下インスリン以上ある場合には、EndoToolは、最初の24時間の遷移用量の推奨事項を提供します。これらのTRAnsition注文はまた、 "印刷の患者レポート/受注"のリンクからアクセスできます。 "固定インスリンの順序オプション"を選択し、適切な遷移順序を選択してください。 5。結果前述のように、紙のプロトコルの実装では、血糖値の測定値( 図1)と低血糖イベントの増加( 図2)でエラーが発生します。詳しい調査の結果、これらのエラーの複数の原因が( 図3)が明らかになりました。インスリンのボーラスを省略し、すべてのエラーの55%を占めプロトコルでそうするように指示された場合のインスリン注入速度を変更しない。他のエラーの種類は、IVインスリン率の誤った変更が、高すぎたり低すぎたり、誤ったインスリンボーラス投与量投与が高すぎるのいずれか、または低すぎるのどちらかが含まれています。 WMC、キャスパー、ワイオミング州に本拠を置く非営利医療センターの非では、207台があります。そのすべての患者に注意してください。データキャプチャ期間中に各リビジョンのために収集したデータは、非ICUプロトコルの患者のためだった。彼らはデータがキャプチャされた時点での現在のプロトコル上のすべての患者であったため、患者は同等であった。そこにそれぞれの患者の血糖コントロールが個別されているため、一日あたり、それぞれの患者の合計のグルコース測定の異なる数字があって、一日あたりの読み取り数とプロトコル上での日数は、個々の患者の臨床状態を反映したものです。そこにCGMS群ではより多くの患者であったとCGMSを使用してデータをキャプチャする機能が大幅に紙のプロトコルグループの手動チャート·データ·キャプチャに比べて集中的に少ない労働力であるため、データキャプチャ期間は、そのグループのために大きかった。 紙のプロトコル5.2最初のリビジョンわずか2.5%が80 mg / dLであった、0.3%が60 mg / dL以上( 図であった間、すべての血糖測定値の3分の1は、180 mg / dLの以上であった4)。さらに、治療の日に患者ごとに血糖測定値の分析は、1日目の測定値の大部分は目標範囲内にないことが示されたこと、および2日目以降から、測定値の大部分は80の目標の範囲内であった180 mg / dLの。 改訂されたプロトコルから逸脱スタッフの頻度についても検討した。改訂されたプロトコルから逸脱するためにどのような臨床正当化も求められていました。そこに317のプロトコルからの逸脱の合計があっただけで21(7%)が臨床的に正当であった。これは、プロトコル上のすべての3時間ごとに1の割合で発生した臨床正当化せずに、そのプロトコルの逸脱を意味していました。偏差の種類が不適切です( 図5)BG濃度が目標範囲内に既にあった場合には、滴定間違ったアルゴリズムを使用して、間違った時の血糖値測定用のサンプルを描画、およびプロトコルから間違ったIVのインスリン注入速度を選択することが含まれてい。 紙のプロトコルの5.3番目の改正さらに紙のプロトコルへの2番目の改正後、低血糖(<60 mg > 180 mg / dL以上)の率はそれぞれ4.7%、26.3%、( 図6)で非常に高いであり続けた。また、当日の2と血糖測定値の大部分を超えて80から180 mg / dLの目標範囲内であったことが判明した。 懸念され、再び、臨床正当化せずにプロトコルからの逸脱は83.5%(243分の203)で、依然として非常に高かった。これは、臨床的正当化せずにプロトコルからの逸脱は、プロトコル上で4時間ごとにごとに1の割合で発生したことを意味します。さらに分析すると、臨床正当化せずにプロトコルからの逸脱の原因を同定した。エラーの原因は、以前の分析( 図5)のものと基本的には変化はなかった、不適切な滴定が含まれていたときにBG Concentrationsは間違った時に血糖値測定用のサンプルを描画、およびプロトコル( 図7)から間違ったIVのインスリン注入速度を選択し、間違ったアルゴリズムを使用して、目標の範囲内であった。 これらのデータを確認した後、低刺激と高血糖の発生率が容認できないと判断された。紙プロトコルの第2改訂版は180 mg / dLの上記の有病率は32.8パーセントから26.3パーセントに減少して高血糖の低下の有病率をもたらしていました。しかし、低血糖の増加率は、60 mg / dLでは0.3%から4.7%に増加未満BGの有病率となりました。 残念なことに、明示的にあいまいなエリアをクリアするための試みで、プロトコルを見直すことで、プロトコルの複雑さは増加した。これは、正しくプロトコルを利用し看護スタッフとの難しさにつながった。頻繁に、複数の看護師が次何をすべきかを決定するためにグループを形成します。多くの場合、間違った決定はまだ行われました。 5.4 CGMS実装目標血中グルコース濃度の範囲内で費やされる時間の大幅な増加と同様に、重度の低血糖(BG <40 mg > 180 mg / dL以上)がCGMSを使用( 図8)の最初の5ヶ月で目撃された。いくつかの興味深い結果を提供し、様々な投与プロトコルの使用によって達成さ実際の血中グルコース濃度を調べる。 2つのリビジョンを含む初期の紙のプロトコルを使用するには、CGMSのプロトコルと比べて大幅に高い血糖レート(以下70 mg / dLまたは60 mg / dL)を生成する。さらに、CGMSプロトコルは、紙のプロトコル( 表1)と比べて処理時間のはるかに長い比率の目標範囲内に血中グルコース濃度を維持した。 jove_content "> 図1初期の紙IVインスリンプロトコル:BG濃度範囲。データは、元のIVインスリン紙議定書の下で管理され、基礎IVインスリン注入および/またはインスリンボーラス投与のいずれかを投与した患者の血中グルコース濃度の範囲は棒グラフで表示されます。 ICU患者の80から110 mg / dLのと95から120の元のプロトコル、厳格な血糖コントロールの下では、非ICU患者ではmg / dL以上を使用した。目標の範囲内で血中グルコース濃度を生成するために紙のプロトコルの能力を決定するために、13人の患者は637 BGの決定で1221時間の合計のための非ICUプロトコルで管理された人に続いた。オリジナルの紙のプロトコルの使用は血糖≤94 mg / dLの測定値と70未満mg / dLの測定値の4.2%の有病率の16.5%の有病率と関連していた。 g2.jpgの "alt ="図2 "/> 図2の初期IVインスリン紙プロトコル:低血糖の原因。初期プロトコルのClose評価が低血糖イベントの85%(22/26)(すなわち、BG <70 mg > 。BG濃度範囲: 図6は、IVインスリン紙プロトコル(第2回改訂)を改訂しました。 16人の患者(18別の実装では、プロトコル、および594の血糖値測定の合計783時間)からのデータは、紙のプロトコルの2番目の改訂の下で血糖コントロールの改善を評価するために測定した。それは、それぞれ、低血糖(<60 mg > 180 mg / dL)の率は4.7パーセントと26.3パーセントで、容認できないままであることを決定した。 図7改訂IVインスリン紙プロトコル(第2改訂版):臨床的根拠もなく逸脱。第二改正の下で、臨床正当化せずにプロトコルからの逸脱は、プロトコル上で4時間ごとにごとに1の割合で不当な逸脱、その結果、83.5パーセント(243分の203)で、高水準で推移した。さらに分析したところ、原因はOF偏差はプロトコルの以前のバージョンの下でそれらと同じになるように決定し、それに加えて含まれていた、BG濃度が目標範囲内にいたとき、滴定間違ったアルゴリズムを使用して、間違った時の血糖値測定用のサンプルを描画不適切な、とプロトコルから間違ったIVのインスリン注入速度を選択します。 図8 CGMS:BG濃度範囲。患者BG範囲はCGMSプロトコルの使用の最初の5ヶ月間モニターした。目標血中グルコース濃度の範囲内で費やされた時間は大幅に増加し、重度の低血糖(BG <40 mg > 180 mg / dL以上)があった減少した。 血糖測定値(%) </strong> Hypoglycemiabelow 70 mg / dLの ターゲットの範囲内 オリジナルの紙のプロトコル 4.2 32.2 紙のプロトコルリビジョン#1 * 1.4 64.7 紙のプロトコルリビジョン#2 * 6.9 63.6 CGMS 0.8 86.1 表1血中グルコース測定値:紙対CGMS。 (*元のデータキャプチャは、一貫性を保つためにデータが再解析が70 mg / dLの低血糖のカットオフを使用していた、しかし、60 mg / dLを下回る低血糖率のためだった)。 <tボディ> 日付/時刻 撮影した手順 2008年初め CGMSについては、各ベンダのプレゼンテーション 2008年初頭に+ 3ヶ月 ROI準備(紙プロトコルシステムの分析、CGMS、CGMS、紙プロトコルの投薬ミスの一般的な推定コストの削減と投影結果)とSugarbabies *を、財務、品質管理、プロフェッショナル·プラクティス委員会、品質と安全調整委員会に提示し、管理委員会。 2009年3月 CGMS実装のバイイン、承認、契約の署名、およびスケジューリング月 – 2009年5月 CGMSオーダーセットの開発(高血糖、DKAと、BGの対象範囲決定のための)、CGMSパラメータ(CGMSから患者を移行するための特定のインスリンの種類を含む)、およびエンドユーザーのための総合的な教育計画の</tr> 2009年5月 ITとCGMSベンダーとの予備的プロジェクトの評価月2009年9月施設全体の介護と医療スタッフの研修、薬理学および内分泌によるプレプリントの受注開発、薬局の情報システムへのオーダーセットの入口 2009年9月 ICUとPCUに実装CGMS 2009年10月機関の他の部分にロールを段階的に廃止 表2。CGMSプロトコルの実装タイムライン。 CGMS:コン​​ピュータグルコース監視システム。ROI:投資収益率、DKA:糖尿病性ケトアシドーシス、BG:血糖、IT:情報技術、ICU:集中治療部、PCU:プログレッシブケアユニット。 * Sugarbabies:糖尿病治療、インスリン療法、低刺激と高血糖の管理を監督する責任WMC病院の委員会。

Discussion

このEndoToolシステムがあるため、その高度なアルゴリズムと使いやすさから選ばれました。プログラムは、米国食品医薬品局(FDA)がクリアされ、医療保険の携行性と責任に関する法律(HIPAA)に準拠であることに機関を支援します。それは余分なハードウェアを必要とせずに病院のサーバーとイントラネット上にロードすることができます。

ソフトウェアは、患者固有の血中グルコース濃度の入力に基づいて、患者固有の生理的なインスリン投与曲線を計算するために数学的モデリングを使用しています。 IVのインスリン投与量の基礎は、制御された数学に基づいて、複雑なフィードバック機構である。ソフトウェアは、患者の以前のグルコースの測定値-組み込んだ4つの最新の測定値を分析し、解釈するために33のアルゴリズムを使用して – その時点で最も適切なIVのインスリン投与量を計算する。後続の各血糖測定値のエントリで、カーブはミニムに調整され血中グルコース濃度の極端な局所化。その最初の計算で、そのような存在/コルチコステロイドの糖尿病や使用の有無などの血中グルコース濃度に影響を与える要因のシステムアカウント。 CGMSは、正確かつタイムリーな投与量と速度の情報を提供していますが、ベッドサイドでクリティカルシンキングはまだIVのインスリン投与が必要となります。コンピュータ誘導ソフトウェアは、IVインスリン率と炭水化物の摂取量、新しい患者のスタートアップのための情報、どのようなコンピュータの中断​​(すなわち、サーバのダウンタイム)の間に行うことについて、エンドユーザーへのガイダンスを提供します。

彼らはソフトウェアを理解し、信頼できると感じたまではCGMSの実装時に、医師からいくつかの初期抵抗があった。しかし、医療スタッフは、システムが使用していた方法は簡単見たときに減少する抵抗は、それは彼らがその勧告を上書きすることができた方法どのように効果的な血中グルコース濃度を制御することであった場合、およびclinicall必要に応じてyを入力します。全体として、看護スタッフは、紙のプロトコルとそれらの増加欲求不満のためにCGMSを実装するために熱望していた。しかし、当初はCGMSが推奨されたより高いインスリン注入率およびボーラス投与量を受け入れるの看護師からいくつかの躊躇があった。時には、システムは、一般的に紙のプロトコルで推奨されているよりも、目標の範囲内で患者を維持するためにはるかに高い注入速度とボーラス用量をお勧めします。看護師からCGMSお薦めや稀に提案した注入速度/ボーラス用量を逸脱しないと快適になりました。

入院患者の良好な血糖コントロールの重要性がよく文献に記載されています。これらの研究は、グルコースが効果的に入院中に制御され、罹患率および死亡率の減少を示している。ワイオミング州医療センターでコンピュータ化されたグルコース管理システムに紙IVインスリンプロトコルを使用してからスイッチが質をもたらした低血糖のリスクを最小限に抑えながらリリー高血糖患者の現在のガイドラインに従って、血糖コントロールを改善しました。良好な血糖コントロールの利点はよくヘルスケアの専門家の間で知られているにもかかわらず、このような戦略を実装する( 表2)慎重に計画しました。紙プロトコルの複数のリビジョンにもかかわらず、低血糖を最小限に抑えながら、正常血糖を達成するための条件の結果は、次善のでした。全体として、CGMSは、すべての測定値の75%以上にターゲット濃度を達成するため、より迅速かつより厳密な血糖コントロールを可能にした。静脈内インスリンを投与する場合、低血糖の自然な恐れがある。しかし、CGMSを利用した低血​​糖症の有病率は1%未満もなかった。

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者は、この原稿の準備のために初期の紙静脈内(IV)インスリンプロトコルとDevy A.リー、学士(薬学)、CMPPのデータ収集と分析のためにPharmDランディWesnitzer、と彼女の援助をPharmDアン·ジェントリーを認める編集と原稿準備中彼女の援助。

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Magee, M. C. Improving IV Insulin Administration in a Community Hospital. J. Vis. Exp. (64), e3705, doi:10.3791/3705 (2012).

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