Summary

אינדוקציה של Hypophysitis אוטואימוניות הניסויי עכברים SJL

Published: December 17, 2010
doi:

Summary

וידאו זה מראה כיצד לגרום hypophysitis אוטואימוניות בעכברים SJL וכיצד להעריך חומרתה ידי histopathology.

Abstract

Hypophysitis אוטואימוניות ניתן לשחזר בניסוי ידי הזרקה של חלבונים יותרת המוח מעורב עם adjuvant לעכברים רגישים 1. מודלים עכבר מאפשרים לנו ללמוד כיצד להתפתח מחלות, לעתים קרובות מתן העתק טוב של אותם תהליכים המתרחשים בבני אדם. עבור כמה מחלות אוטואימוניות, כמו סוכרת מסוג 1A, יש מודלים (העכבר NOD) כי באופן ספונטני לפתח מחלה דומה מקבילו האנושי. עבור רבים מחלות אוטואימוניות אחרות, לעומת זאת, המודל צריך להיות המושרה בניסוי. הגישה הנפוצה בהקשר זה היא להזריק את העכבר עם אנטיגן דומיננטי נגזר איבר הנלמד. לדוגמה, החוקרים מעוניינים השימוטו אוטואימוניות להזריק עכברים עם thyroglobulin 2, למעוניינים מיאסטניה גרביס להזריק אותם עם קולטן האצטילכולין 3. אם autoantigen למחלה אוטואימונית מסוימת אינה ידועה, החוקרים להזריק תמצית חלבון גולמי של איבר המטרה מהתגובה אוטואימוניות. עבור hypophysitis אוטואימוניות, autoantigen פתוגניים (ים) להישאר להיות מזוהה 4, ובכך הכנה גולמי חלבון יותרת המוח משמש. במאמר זה אנו וידאו להדגים כיצד לגרום hypophysitis אוטואימוניות הניסוי בעכברים SJL.

Protocol

ניסיוני פרוטוקול לאחר immunogen יותרת המוח מוכן (ראה מאמר נלווה), הוא מוזרק תת עורי לעכברים SJL (מעבדות ג'קסון, 000,686 מניות). הזרקת זהה השני הוא חזר 7 ימים לאחר מכן. עכברים משמשים כדי לאסוף in vivo ו שלאחר המוות התוצאות. <p class="jove_title" style=";…

Discussion

ארבע טכניקות דווחו לגרום hypophysitis בחיות מעבדה. השיטה המתוארת במאמר זה, כי הוא הזרקה של חלבונים יותרת המוח מעורב עם משלים של פרוינד, הוא אחד העתיקים, שראשיתה 1967 6, שופרה לאחרונה 1. טכניקות אחרות הן הזרקה של גליקופרוטאינים וירוס מסיסים אדמת בשנת 1992 7, הזרקת…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

עבודה זו נתמכה על ידי NIH מענק DK080351 למחשב, ועל ידי מתנה נדיבה של טרי משפחה קריסטין גור.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
SJL mice (The Jackson Laboratories)     stock 000686  
2,2,2-Tribromoethanol (Avertin)   TCI America T-1420  
Beckstead’s fixative        

Referências

  1. Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. , (2008).
  2. Twarog, F. J., Rose, N. R. The production of thyroid autoantibodies in mice. J Immunol. 101, 242-2450 (1968).
  3. Patrick, J., Lindstrom, J. Autoimmune response to acetylcholine receptor. Science. 180, 871-872 (1973).
  4. Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).
  5. Beckstead, J. H. A simple technique for preservation of fixation-sensitive antigens in paraffin-embedded tissues: addendum. J Histochem Cytochem. 43, 345-345 (1995).
  6. Levine, S. Allergic adenophypophysitis: new experimental disease of the pituitary gland. Science. 158, 1190-1191 (1967).
  7. Yoon, J. W., Choi, D. S., Liang, H. C., Baek, H. S., Ko, I. Y., Jun, H. S., Gillam, S. Induction of an organ-specific autoimmune disease, lymphocytic hypophysitis, in hamsters by recombinant rubella virus glycoprotein and prevention of disease by neonatal thymectomy. Journal of Virology. 66, 1210-1214 (1992).
  8. Davis, J. R., McMahon, R. F., Lowenstein, P. R., Castro, M. G., Lincoln, G. A., McNeilly, A. S. Adenovirus-mediated gene transfer in the ovine pituitary gland is associated with hypophysitis. J Endocrinol. 173, 265-271 (2002).
  9. Rotondo, F., Quintanar-Stephano, A., Asa, S. L., Lombardero, M., Berczi, I., Scheithauer, B. W., Horvath, E., Kovacs, K. Adenohypophysitis in rat pituitary allografts. Int J Exp Pathol. , (2010).

Play Video

Citar este artigo
Landek-Salgado, M. A., Tzou, S., Kimura, H., Caturegli, P. Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis in SJL Mice. J. Vis. Exp. (46), e2182, doi:10.3791/2182 (2010).

View Video