Summary

La inducción de la hipofisitis autoinmune experimental en ratones SJL

Published: December 17, 2010
doi:

Summary

Este video muestra la forma de inducir hipofisitis autoinmune en ratones SJL y la forma de evaluar su gravedad por la histopatología.

Abstract

Hipofisitis autoinmune se puede reproducir experimentalmente mediante la inyección de proteínas de la hipófisis se mezcla con un adyuvante en ratones susceptibles 1. Los modelos de ratón nos permitirá estudiar cómo se desarrollan las enfermedades, a menudo proporciona una buena réplica de los mismos procesos que ocurren en los seres humanos. Para algunas enfermedades autoinmunes, como la diabetes tipo 1A, hay modelos (el ratón NOD), que desarrollan espontáneamente una enfermedad similar a la contraparte humana. Para muchas otras enfermedades autoinmunes, sin embargo, el modelo necesita ser inducida experimentalmente. Un enfoque común a este respecto consiste en inyectar el ratón con un antígeno dominante derivada de la del órgano estudiado. Por ejemplo, los investigadores interesados ​​en la tiroiditis autoinmune inyectar ratones con tiroglobulina 2, y aquellos interesados ​​en la miastenia gravis inyectarles el receptor de acetilcolina 3. Si el autoantígeno para una enfermedad autoinmune en particular no se conoce, los investigadores inyectan un extracto de proteína cruda del órgano blanco de la reacción autoinmune. Para hipofisitis autoinmune, el autoantígeno patógenos (s) aún no se han identificado 4, y por lo tanto una preparación de proteína cruda pituitaria se utiliza. En este artículo de vídeo se demuestra cómo inducir hipofisitis autoinmune experimental en ratones SJL.

Protocol

Protocolo experimental Una vez que el inmunógeno pituitaria está preparado (véase el artículo del compañero), se inyecta por vía subcutánea en ratones SJL (de los Laboratorios Jackson, las acciones de 000.686). Una inyección de idéntica se repite 7 días después. Los ratones se utilizan para recoger en vivo y los resultados post-mortem. Paso 1. La inyección subcutánea de inmunógeno hipófisis en ratones SJL Los raton…

Discussion

Cuatro técnicas se han reportado para inducir hipofisitis en animales de experimentación. La técnica descrita en este artículo, que es la inyección de proteínas pituitaria mezclada con adyuvante de Freund s, es la más antigua, que data de 1967 6, y se ha mejorado, más recientemente, 1. Otras técnicas son la inyección de glicoproteínas solubles virus de la rubéola en 1992 7, la inyección estereotáxica de un adenovirus directamente en la glándula pituitaria en 2002 8,</…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue apoyado por el NIH subvención DK080351 para PC, y por una generosa donación de la familia de Terry y Kristine Gore.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
SJL mice (The Jackson Laboratories)     stock 000686  
2,2,2-Tribromoethanol (Avertin)   TCI America T-1420  
Beckstead’s fixative        

Referências

  1. Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. , (2008).
  2. Twarog, F. J., Rose, N. R. The production of thyroid autoantibodies in mice. J Immunol. 101, 242-2450 (1968).
  3. Patrick, J., Lindstrom, J. Autoimmune response to acetylcholine receptor. Science. 180, 871-872 (1973).
  4. Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).
  5. Beckstead, J. H. A simple technique for preservation of fixation-sensitive antigens in paraffin-embedded tissues: addendum. J Histochem Cytochem. 43, 345-345 (1995).
  6. Levine, S. Allergic adenophypophysitis: new experimental disease of the pituitary gland. Science. 158, 1190-1191 (1967).
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  8. Davis, J. R., McMahon, R. F., Lowenstein, P. R., Castro, M. G., Lincoln, G. A., McNeilly, A. S. Adenovirus-mediated gene transfer in the ovine pituitary gland is associated with hypophysitis. J Endocrinol. 173, 265-271 (2002).
  9. Rotondo, F., Quintanar-Stephano, A., Asa, S. L., Lombardero, M., Berczi, I., Scheithauer, B. W., Horvath, E., Kovacs, K. Adenohypophysitis in rat pituitary allografts. Int J Exp Pathol. , (2010).

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Citar este artigo
Landek-Salgado, M. A., Tzou, S., Kimura, H., Caturegli, P. Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis in SJL Mice. J. Vis. Exp. (46), e2182, doi:10.3791/2182 (2010).

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